I 缓冲液的准备 1、平衡缓冲液:20 mM PBS,150 mM NaCl,pH7.4-8.5。 2、洗脱缓冲液:0.1 M Glycine,pH2.5-3.0。 3、再生缓冲液:1 M NaCl。 4、中和缓冲液:1 M Tris-Cl,pH9.0。 注意: 1)以上缓冲液使用前均需0.45μM滤膜过滤。 2)为提高抗体和介质的吸附力。可适当提高平衡缓冲液中的盐浓度和ph值。
II 样本制备 1、样品用平衡缓冲液稀释5-10倍。 2、细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰,去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。 注意:样品在上柱前需0.45μM微孔滤膜过滤。