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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
O.C.T. Compound
- 库存:
99
- 供应商:
江蓝纯
- 规格:
118ML/118ML*12
| 规格: | 118ML | 产品价格: | ¥400.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 118ML*12 | 产品价格: | ¥3600.0 |
OCT冰冻切片包埋剂是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,目前已广泛用于免疫组化实验室中,其用途是在冰冻切片时支撑组织,以增加组织的连续性,减少皱折及碎裂。又因OCT混合物为水溶性,故在漂片时可溶于水,所以在以后的染色中不会增加背景染色。
利用OCT混合物(opti-mum cutting temperature compound)预先浸润组织,然后再进行恒冷箱切片,使切片质量得到改善。
OCT包埋剂(SAKURA产品,MADE IN USA)包埋流程:
1. 将放在蔗糖溶液中的组织块取出,放入20g L-1 蔗糖与OCT包埋剂1:1体积比例混合液中,室温浸泡2h
2. 移入OCT包埋剂中室温浸泡4h,更换新的OCT包埋剂,室温浸泡6h.
3. 将标本置于托物台,用恒冷箱切片机切片(一般-22℃),片厚10μm,贴于预处理的载玻片上,-20℃冰箱保存。
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文献和实验。(此步骤一定要吸干水分,如有液体残留,OCT包埋后,组织表面形成冰晶,影响切片效果)。整个样本处理过程需要保持低温环境。 组织冰冻 在金属烧杯中加入三分之二的异戊烷(使样本足以完全浸入液体中), 然后放入液氮容器(与异戊烷的液面相平)中,使其充分接触,孵育15分钟。同时将所有过程中的采集器具进行预冷。 用预冷的样本匙将新鲜组织浸没在异戊烷中,速冻约1min或直至组织完全冷冻。 采用异戊烷而不是液氮的原因是液氮的沸点低,组织直接放入液氮后会沸腾,在组织周围产生气穴,导致组织降温过程
切片前实验准备 1.将OCT包埋的的组织块放入标本台: a.用OCT填充样品碟。 b.将OCT包埋的组织块置于台面,切面朝向台外 c.将样品碟和组织块放置在低温恒温室内的低温恒温器上 d.让OCT和组织块冻结并粘附在标本台上 2.使用冰冻切片去除多余的OCT: a.一旦冷冻,将组织块安装在低温恒温器的卡碟处,开始切片以去除多余的OCT。 b.切片情况在不同的组织和低温恒温器中有所不同。按照制造商的建议进行冷冻切片 c.继续切片,直到组织可见。 3.组织区域的切割选取
/per spot左右即可满足分析需要,不同于冰冻组织50k reads pair/per spot的要求。 八、总结 FFPE样本空间转录组实验流程相对OCT样本来讲,操作更加繁琐复杂,消耗的时间更长,但是它突破了过去从FFPE样本组织中获取空间基因表达信息的障碍,使得长期保存的珍贵样本的空间基因表达信息也能够检测到,能更好的利用现有的临床样本库资源进行回溯性研究等,实现病理图像化和基因数字化的完美结合。 吉凯承接过的部分空转样本类型
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