基因转染增强剂特价促销

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百奥莱博专业生产供应基因转染增强剂特价促销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：基因转染增强剂特价促销
编号：BTN140621
规格：0.5mL
品牌：百奥莱博
英文名：Hexadimethrine bromide
产地：国产|进口
聚凝胺Polybrene又名为*化己二甲铵、海美*铵，CAS号：28728-55-4。聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物，常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强转染效率。Polybrene 增强转染效率原理图如下：


产品特点：
1．Polybrene广泛应用于脂质体转染、逆转录病毒介导的基因转染及慢病毒介导的基因转染等实验，可以显著提高各种逆转录病毒、慢病毒及脂质体的转染效率。
2．Polybrene对某些细胞(如末端分化的神经元，DC细胞)毒性较大，初次应用建议先做毒性测试。
3．Polybrene还是一种有效的抗肝素剂(肝素拮抗剂)，常用来生产非特异性凝集的红细胞；还可用于蛋白测序，小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象；PVDF 膜上加入Polybrene能提高膜的亲和性。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

慢病毒感染举例：
1．第一天按实验需要将细胞铺板(比如24孔板)。细胞数以第2 天密度约50%为宜。37℃培养过夜。
2．第二天感染前，从-80℃冰箱取出病毒，冰浴融化，参考相关文献或者根据预实验得到的MOI 值用新鲜完全培养基将病毒稀释成所需浓度。
 注意：轻轻混匀，不要使用振荡器。
3．吸去细胞原有培养基，将按照MOI 稀释好的病毒液+培养基+ Polybrene(对于293细胞，终浓度6μg/mL)加入细胞中，轻轻摇匀。37℃培养过夜。
 注：病毒液-培养基-Polybrene 混合液，按如下操作制备混合液：
①添加完全培养基(60mm培养皿2mL，100mm培养皿3mL)，37℃预热；
②加入病毒轻轻混匀；
③加入Polybrene 至终浓度为2μg-12μg/mL。
轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。当MOI高于20时，建议客户添加Polybrene(终浓度2～12μg/mL，浓度因不同的细胞而异，具体的请参考相关文献)来提高病毒的感染效率。如果感染目的细胞是Jurkat，kasumi，NB4，H929，GBC-SD，MCF-7等，建议不要添加Polybrene；大部分原代细胞感染也不需要添加Polybrene，以上仅供参考。
4．感染48小时后，吸除含慢病毒的培养基，换为新鲜的培养基。
5．继续培养24～48小时后，根据需要收集细胞检测目的蛋白的表达。

质粒转染：
1．第一天按实验需要将细胞铺板(比如24孔板)。细胞数以第2 天密度约50%为宜。37℃培养过夜。
2．准备 DNA-培养基-Polybrene混合液。按如下操作制备混合液：
①添加完全培养基(60mm培养皿2mL，100mm培养皿3mL)，37℃预热；
②添加10ng～10μg质粒轻轻混匀；
③加入Polybrene 至终浓度为5μg-10μg/mL。
 轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。
3．去除培养基，在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液，在37℃孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h 轻柔混匀。
4．去除 DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution(15%DMSO in 1×HBSS)轻轻盖住细胞(60mm培养皿3mL，100mm培养皿4mL)。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s，使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。
5．立即去除DMSO shock solution，用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5mL培养液清洗，100mm培养皿每次用10mL培养液清洗。
6．加入完全培养基到细胞中，根据需要进行后续实验。
 稳定转化：去除生长培养基，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
 瞬时表达：去除生长培养基，加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。

备注：Polybrene的使用浓度依据细胞种类，转染方法等影响，以下使用浓度仅作参考。
1．为提高腺病毒转染效率和LacZ转基因表达，使用6μg/mL Polybrene处理病毒载体后转入BHK-21细胞(MOI为100)，转染率提高到95%，没有用Polybrene处理的只有2.3%转染率。
2．在KSHV(Kaposi"s sarcoma-associated herpesvirus)纯化和转染实验中，浓缩的病毒与8μg/mL Polybrene加到BCBL-1细胞中37℃下孵育2h。
3．在逆转录病毒构建研究中，用v-rasHa 逆转录病毒转染角质细胞(Keratinocytes)后在含有4μg/mL Polybrene培养基中培养3天，病毒滴度为1×107 virus/mL，MOI 为1。
4．在shRNA编码的慢病毒载体的转染研究中，病毒上清中加入8μg/mL Polybrene，转染到HEK293细胞中。
5．在慢病毒shRNA转染研究中，将含有6μg/mL Polybrene的新鲜培养基加入到培养24h的RCC10细胞中，用慢病毒颗粒转染细胞。

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基因转染增强剂特价促销关键词：28728-55-4,基因转染增强剂,Hexadimethrine bromide

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PY02-068  抗生素检定培养基Ⅵ号  250克  
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RNase A(10mg/ml)   1ml|5ml
ARB13189 小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)代做ELISA实验 Mouse insulin-like growth factor binding protein 6,igfbp-6 ELISA KIT
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ARB10907 人抗精子抗体(AsAb)酶标法分析 Human anti-sperm antibody,asab ELISA KIT
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·小鼠基因组DNA
编号：BTN131033
英文名称：Mouse Genomic DNA
规格：100μg
本产品为小鼠基因组DNA，是从无疾病小鼠全血中分离到的。利用脉冲电场凝胶电泳测量，90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括 PCR)及基因组文库构建等实验。

储存条件：低温运输、4℃保存、有效期一年。

·核酸清除剂
编号：BTN81216
英文名称：Nucleic Acid Scavenger
规格：1.5mL
本产品用于去除蛋白样品中的核酸污染。蛋白双向电泳的关键是制备好的样品，其中包括核酸的清除，因为核酸能与蛋白质结合，影响聚焦。同时，核酸的分子量大，容易堵塞凝胶，造成条带拖尾。此外，如果使用银染的方法检测蛋白质，污染的核酸也会被染色，为此我司开发了本产品。

产品特点：
1. 使用简单，加入样品中简单保温即可。
2. 效率高，10分钟内可以清除核酸(DNA和RNA)对蛋白质电泳的干扰。
3.基于酶学消化，所以会引入DNase和RNase。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在样品中加入0.1倍体积的本产品，轻柔混匀。
2.在冰上保温10-30分钟，使核酸降解成单核苷酸或寡核苷酸。

注意事项：
这两种酶也有可能在双向电泳图谱呈现蛋白斑点。用超离心方法也能除去核酸，但也可能除去大片分子质量的蛋白质，在低离子强度时，带负电的核酸和带正电的蛋白质会形成复合物，所以用高pH和高离子强度的溶液能减少这种反应，单最后还必需去盐。

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