MALDI蛋白样品处理试剂盒北京厂家现货

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百奥莱博专业生产销*(代"售")MALDI蛋白样品处理试剂盒北京厂家现货，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：MALDI蛋白样品处理试剂盒北京厂家现货
编号：BTN111007
英文名：MS Sample Preparation Kit
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：500次
本产品用于基质辅助激光解吸离子化(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization)分析，所含的基质液是MALDI分析的必不可少的关键成分，其主要作用一是起到分子溶剂的作用，使样品分子分开，但又不会使蛋白质发生共价修饰；而是能从激光脉冲中吸收能量，使蛋白质发生瞬间相变，用于质谱分析。

产品特点：
1．即开即用，用户不需要单独准备各种成分。
2．经过优化，可用于各种样品的MALDI分析。可以选择CCA(羟基*丙*(代"烯")酸)、DHB(2,5-二羟基*甲*(代"酸"))和SA(芥子酸)三种不同的基质。
 CCA适用于分子量在5Kd一下的蛋白质和多肽分析(肽指纹图谱)；
 DHB适合于一般蛋白质、多肽、低聚糖、脂和合成多聚物的分析；
 SA适合分子量在3Kd-150Kd的蛋白质分析。

试剂盒组成：

 

成分	规格
MS专用溶解液	50ml
基质液成份一	50mg
基质液成份二	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

一、样品准备
1．将蛋白样品真空冻干后加入MS专用溶解液100μL，溶解半小时(期间可以按下步配制基质液)。蛋白质的终浓度最好在1-10 pmol/μL之间。如果是Reverse-Phase-HPLC制备的样品，则可以不加MS专用溶解液而直接使用。注意：一定要在蛋白质样品真空冻干前将其中的缓冲液、盐、去污剂和变性剂等去除，否则它们会严重影响蛋白质晶体的形成，没有蛋白晶体的形成就不能进行MALDI分析。
2．称量1mg左右的基质干粉到一干净的EP管中，按每mg CCA加100μL基质液成份二的比例加入基质液成份二，混匀后离心。注意：此是用于结晶用的饱和溶液，可能有沉淀，故需要离心。注意：基质液最好新鲜配制。本试剂盒提供50mg，足够配50次 200μL的基质液。
3．选用下面两种上样法之一上样。也可以自选其他的上样方法。

二、Dried-Droplet法上样
1．将1μL蛋白质样品与1μL新配的饱和基质液混匀。注意：可以多做几个不同的蛋白质样品和基质液的比例，在1:1-10:1均可。
2．用移液器将1μL混合液点到MS仪器的样品靶上，让液体在室温下挥发干净。注意：不要有气泡，枪头也不要触及靶面，也不能搅动上样后的混合液，在未结晶之前不要摇晃。样品靶必须充分清洗干净，以免上次试验的残留样品的干扰。
3．如果样品中含有非挥发性杂质，在此步可以用自备的MilliQ水洗涤晶体一次。
4．将样品靶插入质谱仪内，后续操作按MALDI-TOF仪器使用手册进行。
5．同样方法处理自备对照样品(一般仪器厂家提供)。

三、Thin-Layer法上样
1．用移液器将1μL基质液点到MS仪器的样品靶上，在基质液挥发前迅速进入下一步操作。
2．迅速用移液器将1μL样品点到MS仪器的样品靶上，让液体在室温下挥发干净，一般需要5分钟。
3．将样品靶插入质谱仪内，后续操作按仪器使用手册进行。
4．同样方法处理自备对照样品(一般仪器厂家提供)。
5．同样方法处理标准品(仪器厂商提供)。


关于MALDI蛋白样品处理试剂盒北京厂家现货的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·MMLV逆转录酶
编号：BTN60905
英文名称：MMLV Reverse Transcriptase
规格：10000U
该酶是突变型的MMLV逆转录DNA聚合酶，从表达莫洛尼氏鼠白血病病毒reverse transcriptase基因(pol基因)的E.coli细胞中分离纯化而得，由一个分子量为76.1KDa的单亚基组成，可催化以单链DNA、RNA或DNA:RNA杂交链为模板的互补DNA链的聚合反应。跟野生型相比,它没有RNase H活性。

产品特点;
1．延伸性能好，可合成长达12.5 Kb的fμLl-length cDNA。
2．最佳反应温度为42℃，但在50℃时仍然有活性，70℃10分钟能使其失活。
3．能以Cy3-，Cy5-，rhodamine-，aminoallyl-，fluorescein等标记的nucleotides 为底物。
4．可用于first strand cDNA 合成，second strand cDNA 合成，DNA labeling，RNA primer extension等。
5．与PCR 兼容，RT产物可以用于PCR和real-time PCR。
6．能被金属螯合剂，无机磷酸，焦磷酸和多胺抑制。
7．没有RNase H活性。

产品组成：

成分	规格
MMLV逆转录酶(200U/μL)	50μl
5×RT Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有限期一年。

使用方法：

一、合成PCR用的1st-strand cDNA
1．按下表配制RT反应体系:

加入物	加入量
总RNA 或poly(A)mRNA 或专一的RNA	100-500 ng 10-500 ng 0.01pg-500ng
注：RNA样品不能有基因组DNA污染。
Oligo(dT)18(0.5ug/μL) 或随机引物(0.2ug/μL) 或RNA模板专一性引物	1μL 1μL 15-20pmol
注：随机引物于RNA模板的比例跟最后得到的cDNA的平均长度成反比
RNase-free水	补水到12μL

2．70℃保温5分钟后立即冰浴。
3．严格按下表顺序加入各成分：

5×RT Buffer	4μL
RNase Inhibitor(20U/μL)	1μL
dNTP(10mM each)	2μL

4．37℃保温5分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板，可以改成45℃保温5分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是25℃(5分钟)。
5．加入1μL(200U)MMLV逆转录酶，反应终体积为20μL。
6．42℃保温60分钟(但如果使用随机引物，需要先25℃保温10分钟，然后再转移到42℃保温60分钟)。
7．70℃保温10分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR模板使用，不需要纯化。

二、合成建文库用的1st-strand cDNA
1．按下表配制RT反应体系:

加入物	加入量
poly(A)mRNA 或专一的RNA	1ug 0.5-1ug
注：RNA样品不能有基因组DNA污染。
Oligo(dT)18(0.5ug/μL) 或随机引物(0.2ug/μL) 或RNA模板专一性引物	1μL 1μL 100pmol
注：随机引物于RNA模板的比例跟最后得到的cDNA的平均长度成反比
RNase-free水	补水到12μL

2．70℃保温5分钟后立即冰浴。
3．严格按下表顺序加入各成分：

5×RT Buffer	4μL
RNase Inhibitor(20U/μL)	1μL
dNTP(10mM each)	2μL

4．37℃保温5分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板，可以改成45℃保温5分钟。如果使用随机引物，则保温温度只能是25℃(5分钟)。
5．加入1μL(200 U)MMLV逆转录酶，反应终体积为20μL。
6．42℃保温60分钟(但如果使用随机引物，需要先25℃保温10分钟，然后再转移到42℃保温60分钟)。
7．70℃保温10分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的cDNA可以用于第二链cDNA的合成或放置在-20℃。


MALDI蛋白样品处理试剂盒北京厂家现货关键词：BTN111007,MS Sample Preparation Kit,MALDI蛋白样品处理试剂盒

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