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低温运输和-20℃保存、有效期一年。
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长期
- 英文名:
Universal Enzyme Buffer
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412
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")通用酶缓冲液供应,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:通用酶缓冲液供应
品牌:百奥莱博
英文名:Universal Enzyme Buffer
规格:1mL
编号:BTN131180
产地:国产|进口
本产品是通用的工具酶缓冲液,跟常见的各种分子生物学工具酶兼容,免去试验中更换缓冲液的麻烦。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
通用酶缓冲液供应极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
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通用酶缓冲液供应关键词:BTN131180,通用酶缓冲液,Universal Enzyme Buffer
·AMV逆转录酶
编号:BTN90502
英文名称:AMV Reverse Transcriptase
规格:200U
AMV逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒(AMV),其方法由Houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157KD的αβ全酶。本酶经高度纯化,完全无核酸酶污染。本酶可用于cDNA合成,也可用于RNA和DNA的双脱氧测序。AMV逆转录酶以总RNA或polyA+ RNA为模板,具有以RNA为模板的DNA聚合酶活性,DNA为模板的DNA聚合酶活性和RNase H酶活性,最适反应温度在42-55℃,最高可达60℃,如果使用焦磷酸*,最适温度为37-41℃。按照标准使用方法可以得到长至10-12 kb cDNA。本AMV逆转录酶比普通AMV逆转录酶和MMLV逆转录酶能耐受更高的温度和合成更长的cDNA。
产品特点:
1.高灵敏度,可以1ng的总RNA进行cDNA合成。
2.反应温度可升高到60℃,可有效打开RNA二级结构,适用于二级结构复杂的RNA模板。
3.可合成长至10-12kb的cDNA。
4.可用于first strand cDNA合成、RT-PCR、RNA测序和双脱氧法DNA测序、引物延伸和DNA片段的3´-末端标记。
5.本酶具有内源性的RNase H活性,所以最好不要用于cDNA文库的构建。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| AMV 逆转录酶(10U/μL) | 20μl |
| 5×AMV Buffer | 200μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:以poly(rA)为模板,以oligo(dT)12-18 为引物,在37℃温度下,在10分钟将1nmol的dTMP掺入入到多核苷酸中所需酶量为一个单位。
使用方法:(合成1st-strand cDNA)
1.按下表配制RT反应体系:
| 加入物 | 加入量 |
| 总RNA 或poly(A)mRNA 或专一的RNA |
500-2000ng 50-500ng 0.05pg-500ng |
| 注:RNA样品不能有基因组DNA污染。 | |
| Oligo(dT)18(0.5ug/μL) 或随机引物(0.2ug/μL) 或RNA模板专一性引物 |
1μL 1μL 15-20pmol |
| 注:随机引物于RNA模板的比例跟最后得到的cDNA的平均长度成反比 | |
| RNase-free水 | 补水到11μL |
2.70℃保温5分钟后立即冰浴。
3.严格按下表顺序加入各成分:
| 5×AMV Buffer(本产品提供) | 5μL |
| RNase Inhibitor(40U/μL,自备) | 1μL |
| 焦磷酸* 40mM(预热到42℃) | 2.5μL |
| dNTP(10mM each,自备) | 2.5μL |
| AMV逆转录酶 | 1-3μL(=10-30U) |
4.补水使反应终体积为25μL。
5.42℃保温60分钟(对Oligo dT引物或模板专一引物)或37℃保温60分钟(对随机引物)。如果不使用焦磷酸*,反应温度可以提高到42-55℃,最高可达60℃。
6.70℃保温10分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR模板使用,不需要纯化。50μL Taq DNA聚合酶催化的PCR体系中最多可以使用25μL的RT产物,一般使用10μL AMV催化的RT产物即可。
我公司正在优惠促销工具酶等系列产品,期待您的咨询选购通用酶缓冲液供应。
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