MTT检测试剂盒哪里卖

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应MTT检测试剂盒哪里卖，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：MTT检测试剂盒哪里卖
编号：BTN111105
英文名：MTT Assay Kit
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
MTT广泛用于检测细胞生长，其原理是MTT可以被活细胞线粒体内的脱*酶还原生成深紫色的formazan结晶，而死细胞则无此活性。深紫色的formazan结晶被溶解后可以通过测定490nm波长的光吸收而测定出其浓度，并由此推测出细胞的活力，细胞增殖越旺盛，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。其原理如下：


产品特点：
1．采用独特的Formazan溶解液，可以充分溶解formazan，减少误差。
2．背景低，灵敏度高，线性范围宽，重复性好。
3．本产品为足够500次(5个96孔细胞培养板)微孔板检测。
4．可用于生物活性因子活性检测、抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验、肿瘤放射敏感性测定等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	5ml
溶液B	50ml
说明书	1份

储存条件：低温运输、-20℃保存(但溶液B也可以常温运输和保存)，有效期一年。

使用方法：
下面操作是检测细胞毒性的试验，其他应用跟此类似或更简单(如生长曲线试验)，操作步骤可以以此为基础稍作修改即可，故不再赘述。

㈠、接种细胞
1．按常规胰酶消化法消化汇合的单层细胞，收集到含血清的培养基中。
2．200g离心5分钟收集细胞沉淀。
3．用培养基重悬细胞沉淀，制备成单细胞悬浮液并计数。
4．将细胞稀释到2.5×10³个/mL～5×10⁴个/mL之间(需要根据细胞的生长速度决定)，如果不知道生长数度，一般可以稀释到1×10⁴个/mL。
5．将足够量的细胞悬液转移到培养皿中(便于用排枪取样)。一个96孔板的MTT检测需要约20mL的细胞悬液。
6．用排枪在96孔板除的第2-11列各孔正中央加入200μL细胞悬液(对正常细胞)。如果是肿瘤细胞，则加入100μL肿瘤细胞悬液和100μL培养基(总体积为200μL)。注意：一定要把细胞加在孔的正中，否则细胞会聚集在孔的角落处，影响试验。
7．用排枪在96孔板除的第1和第12各孔中加入跟细胞悬液等体积的培养基。第1 列各孔将作为+培养基-细胞+MTT对照(用于测OD时调零)，第12列加培养基的作用是减少边缘效应对第11 列反应的影响。
8．按常规细胞培养方法在37℃和5% CO2条件下孵育1-3天，使细胞进入指数生长期。

㈡、药物处理
9．用培养基将药物稀释到8个待测浓度(如果不知道待测浓度，则需要预试验确定)，一般一种药物需要做3块平行板。
10．去除第2到第11列(共10列)各孔中的培养基(不要触动细胞)，保留第1 列和第12列各孔中的培养基。
11．在第2和第11列(共2列)的各孔中加入200μL新鲜培养基，这些孔将作为+培养基+细胞-药物的对照。
12．在第3到第10列(共8列)各孔中加入8个浓度梯度的待测药物，每列加入一个浓度的药物。
13．按常规方法把96孔板继续放在在37℃和5% CO2条件下孵育一定的时间，此段时间即为药物处理细胞的时间，由用户自己决定。
14．处理结束后去除第2 到第11列(共10列，均含细胞)所有孔中的培养基，并再加入100μL新鲜培养基。
15．每天换培养使细胞数量扩增2-3倍(所需时间随细胞不同而不同)。

㈢、存活细胞计数
16．在生长末期，去除第1到第11列各孔中的培养基后，再加入100μL新鲜培养基和10μL溶液A(含MTT成分)，用锡箔包裹住96孔板后放在37℃和5% CO2条件下继续培养4-8小时。注意：溶液A在低温情况下会凝固，使用前请室温放置或20-25℃水浴至全部溶解，摇匀后使用。MTT有致癌性，一定要带手套操作。
17．小心吸弃孔内培养基(含溶液A)。由于培养基可能会影响光吸收，最好尽可能去除。
18．每孔加入100μL溶液B，置摇床上低速振荡10分钟，使MTT形成的formazan结晶物充分溶解。
19．由于产物不稳定，故需要立即在酶联免疫检测仪上选择490nm测定吸光度。
 注意：用第1 列各孔(+培养基-细胞+MTT对照)调零。
20．计数同样处理的各次重复的平均值。
21．以药物浓度为横轴，以吸光度为纵轴绘制曲线。由于各处理吸光度绝对值差别很大，一般需将其转化成生长抑制率(以不加药物的第2和第11列各孔数据的平均数作为100%)，这样便于计算出IC50，用于各种药物处理效果的比较。注意：如果测生长曲线，则以时间为横轴。正常生长曲线一般呈现S型，具有促进作用的则斜率加大。

MTT检测试剂盒哪里卖极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·柱式葡萄球菌RNA提取试剂盒
编号：BTN130844
英文名称：Staphylococcus RNA Column extraction kit
规格：50次

·柱式酵母质粒DNA提取试剂盒
编号：BTN70202
英文名称：Yeast plasmid DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于提取酵母质粒DNA的产品(不适用于酵母dsRNA质粒)。本产品根据酵母细胞壁十分坚硬的特点，在细菌质粒碱裂解法的基础上，增加了高效裂解酵母细胞壁的预处理步骤，可在1小时左右得到可以用于PCR或转化酵母质粒DNA。

试剂盒特点：
1.快速，整个过程只需要一个小时左右，可同时处理多个样品。
2. 得到的酵母质粒DNA 纯度高，可直接用于转化和PCR等实验。
3.可以从平板上的菌斑或液体培养的酵母中抽提质粒DNA。
4. 安全，不需使用玻璃珠、酚、*仿等试剂。
5. 每5-10mL 酵母培养液一般可以提取到1μg左右的高拷贝酵母质粒DNA。
6. 即开即用，经济实惠，客户自己不需要准备额外的试剂。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	13ml
溶液C	13ml
溶液D	18ml
破壁酶	50mg
RNase A溶液10mg/mL)	0.15ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(RNase A溶液4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 将5-10mL 酵母过夜液体培养物分多次转移到1.5mL塑料离心管中。每转移一次后，需要12000～15000×g室温离心1分钟，然后吸弃液体培养基。注意：不要使用培养时间超过16小时的酵母液体培养物，否则质粒DNA产量偏低；也不要使用超过10mL的酵母液体培养物，否则破壁不充分，降低质粒DNA产量。
2. 加入1mL自备的无菌水，充分震荡混匀，12000～15000×g室温离心1分钟，吸弃上清。
3. 加入600μl溶液A，充分震荡细胞沉淀重悬，95℃保温10分钟。
4. 12000～15000×g室温离心1分钟，弃上清液。
5. 加入250μl含破壁酶的溶液B(配制方法是将本试剂盒提供的50mg 粉末状的破壁酶和0.15mL RNase A溶液全部加入到装有13mL溶液B的塑料瓶中，轻柔摇晃混匀后使用。未用完的部分需要分装成小份然后放-20℃保存，否则破壁酶很容易失去活性)，吹打混匀。
6. 37℃保温30分钟，延长保温时间到60分钟有利于细胞壁的裂解。注意：放置较长时间后，溶液B中的裂壁酶会逐渐失活，额外再加入一些裂壁酶(如蜗牛酶、Lyticase、Zymolyase、Lywallzyme等，总浓度为1mg/mL)可以极大提高产量。
7. 将离心管放冰浴冷却后，加入250μl溶液C，轻轻颠倒混匀直至裂解液变得澄清，然后室温放置5-10分钟。注意：不要剧烈震荡，否则基因组DNA 将断裂并污染质粒DNA。
8. 加入350μl溶液D，轻轻颠倒混匀几次，管内将出现白色沉淀物，然后冰浴放置10-30分钟(如果质粒较长，最好放置30分钟)。
9. 12000～15000×g室温离心6-10分钟，将上清液转移到离心吸附柱中。
 注意：不要将漂浮在液面的沉淀物(如果有的话)转移到离心吸附柱中。上清液可以分多次转移。
10.室温下放置至少2分钟以让质粒DNA 充分结合到离心吸附柱上。
11.12000～15000×g室温离心1分钟，弃穿透液。
12. 将500μl 通用洗柱液加入离心吸附柱中，12000～15000×g室温离心1分钟，弃穿透液。
13. 重复上步操作一次。
14.12000～15000×g室温离心1分钟去除离心吸附柱中残留液体。不要此步省略，否则残留洗液将影响后续的电泳、PCR和转化实验。
15. 将离心吸附柱套在一干净的1.5mL塑料离心管中，加入30-100μl DNA 洗脱液2.0(加入的量取决于预期的DNA浓度)至离心吸附柱的膜的中央。
16.室温下放置至少2分钟。
17.12000～15000×g室温离心1分钟以洗脱DNA。
18. 如有必要，可以再加入适量DNA 洗脱液2.0洗出残留的DNA。第二次洗脱得到的DNA的产量约为第一次的30-50%。不要将已经洗脱的、含DNA的溶液再加上去。


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·1mL亲和层析柱
编号：BTN140649
英文名称：Affinity Chromatography Colum(1mL)
规格：1mL
本产品适用范围广泛，可用于纯化分离重组蛋白、抗体和抗原、多肽、糖蛋白、磷酸化蛋白、DNA及DNA结合蛋白等生物大分子；还可以用于去除生物样品中的内毒素等污染。

亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而发明的纯化技术。它是利用生物分子间存在的特异性相互作用(如抗原－抗体、酶－底物或抑制剂、激素－受体等)，通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，对另一个分子进行分离纯化。

亲和层析柱常见的使用方法有重力法、手动加压法、蠕动泵法，其示意图如下：


储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

常用亲和标签及纯化方案：



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·柱式DNA清除剂
编号：BTN90318
英文名称：Column DNA Scavenger
规格：50次
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染，这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。

本产品是非酶DNA清除剂-2的柱式升级产品，可用于细胞总RNA样品中基因组DNA污染的去除。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。柱式非酶DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷，同时还具有比非酶DNA清除剂-2操作上更快速的特点。

产品特点：
1. 操作更加简单快速，全部操作只需要几分钟。
2. 回收率高达80%以上。
3.高效，能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平，而RNA分子完整性不受任何影响。
4. 本身不含RNase污染。
5. 稳定，本产品为非酶产品，可以常温运输和4℃长期保存；而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
6. 性价比高，单位成本远低于RNase-free DNase。

产品组成：

成分	规格
溶液A	2.5ml
溶液B	50ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存。

使用方法：

1. 将50μl总RNA溶液与溶液A按1：1的比例混合，充分震荡半分钟。注意：RNA溶液中盐(如*离子)的浓度不能高于0.2 M，如果RNA溶液的量不足50μl，最好加无RNase水补足到50μl以便后续操作。
2. 加入相当于RNA溶液和溶液A混合液总体积9倍体积的溶液B，颠倒数次充分混匀。注意：溶解溶液B沉淀。溶液B在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将混合液转移到离心吸附柱中，室温12000rpm离心半分钟，弃穿透液。
4. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
5.一次洗涤一般足够去除杂质。如果有必要，可以再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟并弃穿透液。一般情况，此步可以省略。
6. 加0.7mL溶液C到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透。
7.室温12000rpm离心半分钟。此步十分重要，否则会影响RNA的使用。
8. 将离心吸附柱转移到一个新的1.5mL离心管中，加入30-50μl RNA洗脱液，室温放置1-2分钟。室温12000rpm离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

疑难解答：
Q：能否用本产品对同一样品进行反复处理？
A：可以。
Q：本产品跟DNA Scavenger-2(BTN70801)有何区别？
A：本产品为柱式升级产品，比DNA Scavenger-2更快速清除RNA样品中的DNA污染。

北京百莱博科技有限公司是细胞及免疫学产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购MTT检测试剂盒哪里卖。