cDNA第二链合成试剂盒促销

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百奥莱博专业生产供应cDNA第二链合成试剂盒促销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：cDNA第二链合成试剂盒促销
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：Second Strand cDNA Synthesis Kit
规格：30次
编号：BTN131005
cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口，再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链。

产品特点：
1. 即开即用，含有合成cDNA第二链的所有试剂。
2. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
5×cDNA第二链合成缓冲液	480μl
20×cDNA第二链合成酶混合液	120μl
0.2 M EDTA溶液	120μl
超纯水	2ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
一、合成cDNA第一条链
本试剂盒不提供cDNA第一链合成试剂，用户需自备相关试剂合成cDNA第一链。
二、合成cDNA第二链
1.在冰浴上向已经完成合成cDNA第一条链的反应体系中依次加入下表试剂：

成分	用量
cDNA第一链合成反应液	10μl
超纯水	48μl
cDNA第二链合成缓冲液	16μl
cDNA第二链合成酶混合液	4μl
轻柔吹打混匀后，短暂离心，16℃保温2小时
自备的T4 DNA聚合酶	2μl
轻柔吹打混匀后，16℃继续保温30分钟
0.2M EDTA溶液	4μl

注：如果不需要将双链cDNA平末端化，则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μl检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片，则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常，需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等实验。

关于cDNA第二链合成试剂盒促销的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
利福平溶液(50mg/ml) Rifampicin 50mg/ml 10ml
ARB12526 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)免费代测 Rat inhibitory subunit of nf-κbα,ikbα ELISA KIT
ARB11804 人雌激素诱导蛋白PS2 含量分析 Human estrogen-induced protein ps2 ELISA KIT
F030224 HRP标记兔抗牛IgG抗体 Rabbit Anti-Bovine IgG*HRP
HEPES溶液(pH7.0)  1mol/L 100ml
37348-90-4 两性电解质4-6
ARB13965 猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)酶标法分析 Porcine insulin-like growth factors-1,igf-1 ELISA KIT
叶绿素AB混合物 Bacitracin zinc 1406-65-1
DL-缬*酸 Glimepiride 516-06-3
Taq稀释缓冲液   100ml
ARB13089 小鼠细胞色素氧化酶(CC0)代做ELISA实验 Mouse cytochrom-oxidase,cco ELISA KIT
DP119 N96磁珠法质粒DNA小提试剂盒
001003 绵羊血清 100ml|500ml
ARB10489 人白介素2受体(IL-2R)含量检测 Human interleukin-2 receptor,IL-2r ELISA KIT
cDNA第二链合成试剂盒促销关键词：cDNA第二链合成试剂盒,Second Strand cDNA Synthesis Kit,BTN131005


·RNase H
编号：BTN120413
英文名称：Ribonuclease H
规格：600U
RNase H是特异性分解RNA-DNA杂交体中的RNA链的核糖核酸内切酶，产生具有游离 3´-OH和5´-磷酸末端的产物，该酶对单链的核酸，双链DNA或双链RNA不起作用。

产品用途：
1．通过Okayama-Berg法进行cDNA Cloning。
2．DNA-RNA杂交体的检定。
3．在Oligo(dT)存在下除去mRNA的Poly(A)末端。
4．mRNA的定量。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：以Poly(rA)*Poly(dT)为底物，在30℃、pH7.7的条件下，20分钟内产生1nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位

纯度：
1．50U的本酶和1μg的λDNA-Hind III分解物在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．50U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
3．50U的本酶和1μg的16S，23S rRNA在37℃下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

·AFLP试剂盒(EcoRI-MseI)
编号：BTN100903
英文名称：AFLP Kit(EcoRI-MseI)
规格：1600次
本产品在传统AFLP-PCR的基础上经过精心优化而开发。AFLP(amplified fragment length polymorphism)原理是一种结合RFLP和PCR技术特点的、迄今为止最有效分子标记分型技术，其原理如下：


产品特点：
1．一站式，足够50次酶切-连接反应、50次预扩反应和1600次AFLP PCR(PCR按30μL体系计算)，但不包括DNA 纯化和带型分析试剂(如PAGE电泳试剂和银染试剂)。
2．本系列产品提供EcoRI-MseI 组合，适用于GC含量在50%以上的基因组。对GC含量在50%以下的基因组，需从本公司采购AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3．各种参数都经过优化，一次PCR所得AFLP片段数一般在10-100之间，可重复性好，误差小于0.6%。
4．本产品适用于基因组在500 Mb-6000Mb的材料(如动物和植物)，对于基因组在50-500Mb的材料(如细菌和真菌)或50Mb以下的材料(如质粒，cosmid，BAC，YAC和PAC等)，需要分别另购专门的+1型预扩引物混合液和+3型EcoRI引物(8 种)AFLP引物对。

试剂盒组成：

成分	规格
酶切-连接Buffer，10×	100μl
EcoRI-MseI酶混合液	100μl
EcoRI-MseI 接头混合物	1ml
T4 DNA连接酶(1U/μL)	50μl
+0型预扩引物混合液	750μl
PCR Mix 3.0	9ml×3
对照DNA(50ng/μL)	20μl
+2型EcoRI引物(8条)	1ml每种
+3型MseI引物(8条)	1ml每种
TE溶液，pH8.0	10ml
超纯水	10ml
说明书	1份

+2型EcoRI引物和+3型MseI引物最后碱基的序列

引物名称	8条引物3´最后碱基
+2型EcoRI引物	-AA,-AT,-AG,-AC,-TA,-TT,-TG,-TC
+3型MseI引物	-CAA,-CAC,-CAG,-CAT,-CTA,-CTC,-CTG,-CTT

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

自备试剂：Southern级DNA纯化试剂，尿素-PAGE电泳套装，银染试剂盒。

使用方法：

一、DNA提取(本试剂盒不提供相关试剂)
用户需要自备50-500ng Southern级别的基因组DNA，用前最好预实验以确保DNA能够被EcoRI和MseI内切酶彻底切开。

二、限制性酶切和接头连接反应(本试剂盒足够50次本反应)
1．在0.2mL离心管中加入设置20μL的限制性内切酶酶切体系：

成分	用量
酶切-连接Buffer，10×	2μl
样品DNA	50ng(对小基因组材料) 500ng(对大基因组材料) 如果用对照，则用5μL
EcoR I-Mse I酶混合液	2μl
超纯水	加水到20μl

2．轻柔混匀并短暂离心后，37℃保温2小时酶切(若PCR 仪器不带热盖，则必须加50μL自备石蜡油，否则水分会蒸发影响反应。下同)，70℃保温15分钟灭活内切酶。
3．在上述酶反应体系中加入20μl EcoRI-MseI 接头混合物和1μl T4 DNA连接酶，轻柔混匀并短暂离心后，20℃保温2小时让接头跟DNA片段相连。
4．在一个离心管中加入10μl上步得到的连接反应液和90μL TE缓冲液，pH8，充分混匀，得到酶切-连接反应10倍稀释液，未用完的酶切-连接反应原液(30μL)可放-20℃保存。

三、预扩增(本试剂盒足够50次本反应)
5．在0.2mL离心管中设置30μl的PCR 体系：

成分	体积
酶切-连接反应液10倍稀释液	5μl
+0型预扩引物混合液	10μl
PCR Mix 3.0	15μl

6．离心数秒，按下列参数进行PCR预扩增：

	温度	时间
PCR(20次)	94℃	30s
	56℃	60s
	72℃	60s

7．可以取10μl PCR产物在1.5%琼脂糖胶上电泳检测，产物为100-1500bp 模糊条带。
8．将剩下的预扩反应液用TE 稀释50倍，直接用于下步反应或放-20℃保存待用。

四、选择性PCR扩增(本试剂盒足够至少1600次本反应)
9．在0.2mL PCR 管中，加入下列成分(如果用户已经知道哪个一种或几种引物组合适合自己的材料，则直接使用；如果不知道，则需要预先测试所有64 种组合，设置64个PCR反应)，下面只是一种组合：

成分	体积
预扩反应液50倍稀释液	5μl
+2型EcoR I引物之一(八种之一)	5μl
+3型Mse I引物之一(八种之一)	5μl
PCR Mix 3.0	15μl

10．轻柔混匀后离心数秒，按下列参数进行PCR：

	温度	时间
PCR(13次)	94℃	30s
	65℃	30s(每次循环递减0.7℃)
	72℃	60s
PCR(13次)	94℃	30s
	55℃	30s
	72℃	60s
延伸	72℃	5min

五、尿素-PAGE电泳和银染(需另购试剂并按相关说明书进行)


cDNA第二链合成试剂盒促销关键词：cDNA第二链合成试剂盒,Second Strand cDNA Synthesis Kit,BTN131005

磷酸酶B(兔肌) Sodium metavanadate 9012-69-5
ARB13542 兔子B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)含量分析 Rabbit b-cell leukemia/lymphoma 2,bcl-2 ELISA KIT
ARB10537 人主要组织相容性复合体I类(MHCⅠ/HLAⅠ)含量检测 Human major Histocomp*(代"a")tibility complex Ⅰ,mhcⅠ/hla-Ⅰ ELISA KIT
ARB11719 人痢疾内阿米巴抗原Elisa定量检测 Human entamoeba Histolytica antigen ELISA KIT
ARB13135 小鼠前心*肽(Pro-ANP)ELISA检测服务 Mouse pro atrial natriuretic Peptide,pro-anp ELISA KIT
F030821 BIOTIN标记兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG*BIOTIN
DP341 磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂盒
Western blot二抗稀释液   50ml|100ml
ARB12881 小鼠丙*(代"酮")酸脱*酶E1(PDH E1)检测服务 Mouse pyruvate dehydrogenase-e1,pdh e1 ELISA KIT
1772-03-8 D-*基半乳糖 D(+)Galactosamine hydrochloride
BL1102 40%丙*(代"烯")酰胺(19:1)
ARB10584 人延伸蛋白A(EloA)含量检测 Human elongin a,eloa ELISA KIT

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