Western封堵液说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")Western封堵液说明书，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：Western封堵液说明书
英文名：Western Blocking Solution
产地：国产|进口
编号：BTN131104
规格：250mL
品牌：百奥莱博
本产品含有鲑鱼血清，不与哺乳动物抗体发生相互作用，背景极低或不产生背景。无哺乳动物蛋白，降低非特异相互作用风险。可用缓冲液按1:10稀释后使用。

产品特点：
1．作为通用的Western 封闭试剂使用。
2．保证低背景。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

欲咨询购买Western封堵液说明书，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：
O-(内-二环[2,2,1]庚-5-稀-2,3-二甲酰亚胺)-N,N,N",N"-四甲基六*磷酸盐 Chromotropic acid disodiu*(代"m") salt dihydrate 208462-94-6
喹哪啶红指示剂   100ml
D-亮*酸甲酯盐*(代"酸")盐 L-(?)-Glucose 5845-53-4
ARB12860 小鼠心肌肌*蛋白I(cTn-I)elisa检测 Mouse cardiac troponin i,ctn-i ELISA KIT
增强型miRNA荧光定量检测试剂盒(SYBR Green) 
BTN130537 *蛋白酶抑制剂Ⅰ溶液 Calpain InhibitorⅠSolution
F040108 鸡卵清蛋白偶联莱克多巴胺 OVA-RAC
F050322 绵羊IgG抗体 Sheep IgG
BTN130581 小鼠抗mCherry标签单抗 Anti mCherry-Tag Mouse Mab
ARB12583 大鼠烟*(代"碱")型乙酰胆碱受体(N-AChR)ELISA检测服务 Rat nicotinic acetylcholine receptor,n-achr ELISA KIT
ARB10916 人抗磷脂抗体(Apl/APA)检测服务 Human anti-phospholipid antibody,apl/apa ELISA KIT
5,5-二巯基-2,2-二硝基*(代"*")甲*(代"酸") Non-fat Powdered Milk 69-78-3
F030103 HRP标记小鼠抗乙肝表面抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBsAg*HRP
Western封堵液说明书关键词：BTN131104,Western Blocking Solution,Western封堵液


·人基因组DNA混合液
编号：BTN131034
英文名称：Human Genomic DNA Mix
规格：100μg
本产品为人基因组DNA，由来源于多位匿名的捐献者的DNA混合而得到。利用脉冲电场凝胶电泳测量，90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。

储存条件：低温运输、4℃保存、有效期一年。

·生物素标记dUTP溶液(Biotin-11-dUTP)
编号：BTN100920
英文名称：Biotin-dUTP Solution
规格：50μL
本产品是浓度为1mM的Biotin-11-dUTP。分子式：C28H41N6O17P3SNa3，分子量：927.6。分子结构式图如下：

Biotin-11-dUTP常用于PCR、缺口平移、cDNA合成、随机引物标记和引物延伸等方法标记DNA。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

·血清血浆游离RNA提取试剂盒
编号：BTN130978
英文名称：Serum/Plasma RNA column Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于从血清/血浆等液体样品中提取游离RNA的产品。

试剂盒特点：
1. 操作简单，整个过程只需要20分钟左右，不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高，通过RT-PCR检测到的最终灵敏度可以达到50拷贝/mL。
3. 安全无毒，不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
4.与RT-PCR和荧光RT-PCR兼容。
5. 价廉物美，性价比远低于国外同类产品。
6.适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。

试剂盒组成：

 

成份	编号	规格
溶液A	BTN130978A	30mL
离心吸附柱(小提)	BTN60911	50套
通用洗柱液	BTN60408	50mL
RNA洗脱液	BTN71207	10mL

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL血清/血浆样品。如果样品需要富集，可以将1.5mL液体在4℃下24，000 g冷冻离心60分钟，移弃1.3mL后继续操作。
2. 加入0.6mL溶液A，振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意：溶液A在 4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将溶液全部转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟。
4. 12000～15000g室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
5. 加入0.8mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000～15000g室温离心1分钟，弃收集管中穿透液。
6. 12000～15000g室温离心半分钟。
7.在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μL通用洗脱液，然后将离心吸附柱套入一新的1.5mL离心管中，室温放置2分钟。
8. 12000～15000g室温离心1分钟，离心管中收集的样品即为RNA。
9. RNA样品可以直接用于RT-PCR或逆转录反应，也可放-80℃长期保存。注：游离的RNA一般含量极少，不宜用电泳法检测。

疑难解答
Q：提取血清血浆等液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难？
A：原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存，每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子，每种RNA有很多拷贝)，同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一)，样品中病毒数往往又不是很多，使得样品中病毒核酸的绝对量往往比一个细胞中核酸的绝对量还少，所以操作中十分容易丢失。另外，由于得到的核酸绝对量很少，不能使用电泳和测OD检测，只能通过PCR或RT-PCR检测，而PCR或RT-PCR的条件又需要优化，所以要确定提取是否成功十分不容易。


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·ATP溶液，1mM
编号：BTN131013
英文名称：ATP adenosine triphosphate Solution，1 mM
规格：1mL
本产品为浓度为1mM的ATP溶液，可以直接用作ATP发光法细胞活力检测试剂盒的底物使用。三磷酸腺苷是由腺嘌呤、核糖和3个磷酸基团连接而成，水解时释放出能量较多，是生物体内最直接的能量来源。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·非酶RNA清除剂1.0
编号：BTN51203
英文名称：Non-enzymatic RNA scavenger 1.0
规格：1.5mL
本品为非酶法质粒RNA和蛋白质污染的去除试剂，专用于从碱变性法纯化的质粒中去除其中的绝大部分RNA污染和大部分蛋白质污染。

产品特点：
1.高效，能去除质粒粗提物中80%左右的RNA污染和60%的蛋白污染。而常用的RNase或LiCl处理只能去除RNA，不能去除蛋白质污染。
2.快速，整个过程只需要十余分钟，不需要37℃保温。
3. 经过本产品处理过的样品，由于没有RNA和蛋白质的干扰，使用硅胶膜或其他吸附离心法吸附、回收质粒DNA的效率比没处理过的样品更高。
4. 价格不到RNase A的1/2，在质粒的大规模制备时成本优势更加明显。
5. 制备临床用(如基因治疗)的质粒DNA时，可以减少后期在临床报批、生产、质检和使用中的很多麻烦(使用生物来源的RNase A和蛋白酶时，容易带入对人体有害的内毒素、LPS等污染物)。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

一、从碱变性澄清液中去除RNA和蛋白质
1. 将约1/5体积的RNA Scavenger加入到碱变性澄清液中(加溶液III后离心得到的上清液一般是450μl，所以需要加入50μl)。
2. 混匀后室温放置10分钟。
3.室温8000g离心10分钟。
4.转移上清到一新的离心管中，后续处理跟经典的方法一样(即加入等体积的异丙醇或两倍体积的乙醇,混匀后室温离心10分钟,弃上清液后用1mL 75%乙醇洗一次,短暂离心，去掉残留液体,加入适量TE缓冲液溶解质粒待用)。

二、从质粒粗提液中去除RNA和蛋白质
1、将1/4体积的RNA Scavenger-1直接加入到已经溶解在TE或其他溶解液的质粒DNA中。
2、混匀后室温放置10分钟。
3、室温8000g离心10分钟。
4、转移上清到一新的离心管中，加入等体积的异丙醇或两倍体积的乙醇。
5、混匀后室温离心10分钟。
6、弃上清液后用1mL 75%乙醇洗一次。
7、短暂离心，去掉残留液体。
8、加入适量TE缓冲液溶解质粒待用。

使用效果：

图注：用经典的碱变性法从1.5mL E.coli过夜培养液中提取的pGEM-3质粒粗提物(加溶液ⅡI离心上清)经过RNA Scavenger处理后(LA+RNA Scavenger)与未经处理的样品(AL)电泳比较。上样量为1/5。

图注：用经典的碱变性法提取的pGEM-3质粒DNA溶于TE中后，经过RNA Scavenger处理的(+)与未经处理的(-)样品进行电泳比较。处理过的样品失去80%左右的RNA。

疑难解答：
Q：电泳检测质粒DNA时也需要将其RNA污染去掉吗?
A：是。否则RNA 将结合大部分的EB溶液,使质粒DNA的带型减弱。
Q：RNA Scavenger-1跟RNA Scavenger-2 有何区别？
A：
1. RNA Scavenger-2处理过的样品不再需要醇/盐沉淀处理，而RNAScavenger-1处理的样品还需要醇/盐沉淀去除RNA Scavenger-1；
2. RNA Scavenger-2与柱式硅胶膜纯化方法兼容，而RNA Scavenger-1 不兼容；
3. RNA Scavenger-2 不但可以用于去除质粒DNA的RNA污染，还可以用于去除基因DNA的RNA污染，而RNA Scavenger-1只能用于质粒DNA样品。

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