5M异硫氰酸胍溶液(RNase-free) 生化试剂

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应5M异硫*酸胍溶液(RNase-free) 生化试剂，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：5M异硫*酸胍溶液(RNase-free) 生化试剂
规格：250mL
品牌：百奥莱博
编号：BTN100883

除5M异硫*酸胍溶液(RNase-free) 生化试剂外，我公司正在打折促销以下产品：
107-43-7 Betaine 甜菜碱
5-羟甲基糠醛 Nalidixic acid 67-47-0
碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸*二*微板法)   50T|100T
ARB10327 人内皮脂肪酶(EL)酶联免疫定量检测 Human endothelial lipase,el ELISA KIT
聚氧乙*(代"烯")月桂醇醚 MUG 6540-99-4
BTN131088 荧光素(FITC)标记亲和素 FITC-Avidin
F050302 人IgG抗体 Human IgG
甲基绿染色液(2%)   100ml
BTN120503 柱式藻类RNAOUT Column Algal RNAOUT
ARB11746 人嗜铬蛋白A(CgA)elisa检测 Human chromogranin,cga ELISA KIT
D-别异亮*酸 Boc-Arg(Tos)-OH 1509-35-9
BFD029 三聚*胺快速检测试剂盒
D-*丙*酸 N-Acetyl-L-tryptophan 673-06-3
D(-)樟脑磺酸 DL-Glyceraldehyde 3144-16-9
BTN100868 SDS-PAGE分离胶配胶液 SDS-PAGE Resolving Gel Buffer
ARB13340 牛CD3分子(CD3)尿液中含量检测 
5M异硫*酸胍溶液(RNase-free) 生化试剂关键词：BTN100883,5M异硫*酸胍溶液(RNase-free),百奥莱博


·一站式GST标记蛋白质微量纯化套装(含溶菌酶和核酸酶)
编号：BTN111116B
英文名称：One-Stop GST-Tagged Protein Miniprep Pack(B)
规格：20次
重组蛋白N端的GST谷胱甘肽S转移酶能提高重组蛋白的水溶性，所以常用于蛋白质重组表达。GST-谷胱甘肽亲和层析是利用GST 标记的蛋白能与谷胱甘肽层析介质结合，并能被还原型谷胱甘肽洗脱的特点而建立，是目前分离纯化GST 标记蛋白质的重要方法。本产品就是专门用于上述目的，其原理如下：


产品特点：
1．一站式套装，含所需的谷胱甘肽介质、溶液和层析柱，用户只需要提供表达GST 标记蛋白的细菌(酵母、杆状病毒、培养细胞)即可，非常方便。
2．专一性强，一次过柱即可获得纯度高达95%的GST-标记蛋白。
3．只能在非变性条件下使用，只可用于纯化没形成包涵体的GST 标记蛋白。
4．每次可以处理20mL的表达菌液，适合初步筛选和鉴定。
5．提供4mL浓度为50%的谷胱甘肽-Agarose 介质，可吸附5-10mg GST 标记蛋白质。
6．本介质可以反复使用多次。

试剂盒组成：

 

成分	20次(A)	20次(B)
谷胱甘肽-Agarose介质,50%	4ml	4ml
10×PBS缓冲液	100ml	100ml
溶液A	1ml	无
GST洗脱缓冲液成分一	25ml	25ml
GST洗脱缓冲液成分二	约80mg	约80mg
溶菌酶(20KU/mg)	无	30mg
Benzonase(2U/μL)	无	20μl
PMSF(10mg/mL)	0.5ml	0.5ml
6mL层析柱(带筛板)	1套	1套
说明书	1份	1份

储存条件：常温运输和保存，溶菌酶、Benzonase和PMSF 需低温运输。收到货后，介质需4℃保存，溶菌酶、Benzonase和PMSF 需-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
注意：
1．每步得到的样品最好都留存少量作为SDS-PAGE分析的对照，在下面描述中就不再提醒。
2．本实验需要用到的1×PBS缓冲液可用自备的超纯水稀释本试剂盒提供的10×PBS缓冲液而得。PBS缓冲液用超纯水稀释后极其容易长细菌，注意防止污染。
3．GST 洗脱液的配制方法是将约80mg GST 洗脱液成分二干粉全部加入到GST 洗脱液成分一溶液中，摇晃直到干粉全部溶解即得GST 洗脱液，分装成小份放-20℃保存，每次用一管。

一、重组蛋白的表达和细菌收集
1．37℃振荡培养20mL含表达质粒的细菌到OD600=0.6-0.8。
2．加IPTG 到终浓度为0.1mM，30℃振荡培养3小时或22℃振荡培养8小时(或过夜)。
3．4℃ 5000g离心10分钟收集20mL表达菌液，弃上清。
4．用1×PBS缓冲液重悬细菌沉淀，4℃ 5000g离心10分钟，弃上清。沉淀可直接用于裂解或放-80℃保存。

二、细胞裂解
5．如果用本产品A型，用1mL冰浴的新鲜配制的细胞裂解液(1mL 1×PBS缓冲液+50μl溶液A+ 25μl 10mg/mL的PMSF溶液)重悬细菌沉淀，冰上超声裂解菌体直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。超声参数需根据仪器型号自行摸索，一般选1K-10K 频率处理15次，每次20秒，间隔1分钟(必需放置在冰上)。裂解物不能粘稠，否则会堵塞层析柱。
6．如果用本产品B型，在1mL冰浴的新鲜配制的细胞裂解液(在20mL 1×PBS缓冲液中加入所有30mg 溶菌酶干粉，溶解后分装成1mL/管，取一管使用，剩余的-20℃放置)中加入25μl 10mg/mL的PMSF溶液和1μl Benzonase，用此混合液重悬细菌沉淀后冰上放置30分钟，得到细菌裂解物。
7．将超声或酶法细胞裂解物在13000 g 4℃离心10分钟去除未裂解细胞和裂解细胞碎片以防堵柱，所得上清即含可溶性GST 标记蛋白。

三、层析柱的制备和GST蛋白纯化
8．摇晃将谷胱甘肽-Agarose 介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中(介质用量需要根据GST蛋白产量决定，100mL菌液一般使用200μL介质即可)。下列步骤各溶液的用量均针对200μL介质而定，如果介质用量不同，各溶液用量需相应调整。
9．用5mL预冷的1×PBS缓冲液洗柱。
10．将第7 步得到的上清液(含可溶性GST标记蛋白)上柱，让重力使上柱液自然流出，收集并保存穿透液用于SDS-PAGE电泳。GST和谷胱甘肽之间的结合很缓慢，所以流速一定不能快，否则结合不充分。流速一般在0.2-1mL/分钟即可。如要提高GST 标记蛋白与介质的结合效率，可用本试剂盒提供的红盖将层析柱下的漏液口堵上，让细菌裂解液和介质在4℃结合30分钟或过夜。也可以将穿透液反复上柱。
11．用0.5-2mL 1×PBS缓冲液洗柱，收集并保存穿透液(含杂蛋白)。
12．用0.2-1mL GST洗脱液洗柱，收集并保存穿透液(含GST 标记蛋白)。由于可能含蛋白酶污染，所以穿透液不能在4℃放置，需立即用于后续处理(如浓度测定或SDS-PAGE电泳)或-80℃长期放置。
13．对收集的2种穿透液和洗脱液进行蛋白定量或SDS-PAGE分析。注意：如果不预先脱盐，则只能用Bradford法或OD 检测法(1 OD280 约等于0.5mg/mL蛋白)测定穿透液和洗脱液的蛋白浓度。由于GST的分子量为26 KD，所以在SDS-PAGE胶上，GST 标记蛋白将比天然蛋白大26 KD。

附：GST柱的恢复(本试剂盒不含所需试剂)
1．用3倍体积的6M盐*(代"酸")胍处理柱子10分钟。
2．用3倍体积的超纯水处理柱子10分钟。
3．用3倍体积的缓冲液一(0.5M NaCl，0.1M Tris·HCl，pH8.5)处理柱子10分钟。
4．用3倍体积的缓冲液二(0.5M NaCl，0.1M Tris·HCl，pH4.5)处理柱子10分钟。
5．再重复3-4 步两次。
6．用3倍体积的超纯水处理柱子3次。
7．用3倍体积的1×PBS缓冲液处理柱子2次。
8．堵上漏口，加3倍体积的1×PBS缓冲液待用。若长时间不用，则第7步和第8步的1×PBS改成20%的乙醇。


5M异硫*酸胍溶液(RNase-free) 生化试剂关键词：BTN100883,5M异硫*酸胍溶液(RNase-free),百奥莱博
  我公司是集科研和生产为一体的专业化生物工程公司。特别是ELISA研发，代测，技术服务这一产品已使百奥莱博成为中国知名公司。 公司产品涵盖ELISA研发、细胞培养，各种生化试剂、各种酶类、分子生物学试剂盒、5M异硫*酸胍溶液(RNase-free)、培养基等。我们进一步加强人才经营、产品经营，不断提升企业的核心竟争力，实现具有高科技产业体系、知识化创业团队的国际化的公司，服务于生命科学领域，迎接世界经济一体化所带来的机遇与挑战。



·电泳级Tricine干粉
编号：BTN90311
英文名称：Tricine，EG Powder
规格：100g
本产品是电泳级的Tricine，即三(羟甲基)甲基甘*酸，主要用于多肽电泳时替代SDS-PAGE中的Glycine，故又叫Tricine-SDS-PAGE电泳。主要用于配制电泳液。


储存条件：常温运输和保存，有效期两年。

·凝胶法内毒素半定量试剂盒
编号：BTN130504
英文名称：Endotoxin semi-quantitative kit(Gel Method)
规格：10×0.1mL
本试剂盒又称鲎试剂，为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品。鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度，pH值及无干扰物质)，细菌内毒素激活C因子，引起一系列酶促反应，使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。

试剂盒组成：

成分	规格
鲎试剂,灵敏度0.06 EU/mL	0.1ml×10支
说明书	1份

储存条件：常温运输，阴凉处避光保存，有效期两年。

使用方法：

一、样品溶液的制备
样品的pH值应在6.0–8.0 之间，若超出此范围，需用无热原缓冲液或0.1N*氧化*、0.1N 盐*(代"酸")调节。若样品中可能存在鲎实验的干扰物质，见本说明书4.2“样品的干扰实验”。若样品中可能含有导致鲎试剂中G 因子旁路反应的(1,3)β－D－葡聚糖，需选用不会对(1,3)β－D－葡聚糖起反应的特异性鲎试剂。

二：细菌内毒素标准溶液及对照液的准备
2.1细菌内毒素标准溶液(本试剂盒不提供)
 取细菌内毒素工作标准品1支，按《细菌内毒素工作标准品使用说明书》配制2λ ，1λ ,0.5λ,及0.25λ的一系列内毒素标准溶液(λ为鲎试剂灵敏度标示值)。备用。
 注：鲎试剂灵敏度复核实验见本手册其他常用实验方案。
2.2 阴性对照液：即无内毒素水。
2.3 阳性对照液：即浓度为2λ的内毒素标准溶液。
2.4样品阳性对照液：即添加浓度为2λ内毒素标准的样品溶液。

三：内毒素检测
3.1 鲎试剂的溶解：按标示量(本试剂盒为0.1mL/支)加无内毒素水于鲎试剂中，轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要引起气泡，溶解后的试剂应在10 min内使用(即配即用)。
3.2样品溶液的制备
 样品最大有效稀释倍数(MVD)的计算：
 MVD＝ C•L/λ
 λ：测试用鲎试剂灵敏度标示值(EU/mL)；L：样品细菌内毒素限值；C：样品浓度或样品复溶后所得样品浓度。当L 单位为EU/mL(溶液)时，C的单位为1mL/mL；当L单位为EU/mg或者EU/U时，C的单位为mg/mL或者U/mL。按照计算所得体积，加无内毒素水制备样品溶液。
3.3 各反应管中分别加入0.1mL 阴性对照液，阳性对照液，样品，或样品阳性对照液。
 封闭管口，轻轻摇匀，垂直放入37℃的恒温器中温育60分钟±2分钟，温育期间避免振动。
3.4 结果判断
3.4.1 将试管从恒温器中轻轻取出，缓慢倒转180°。若管内的内容物呈坚实凝胶，不变形，不从管壁滑脱为阳性，记录为(+)；不呈凝胶或虽生成凝胶但不能保持完整并从管壁滑脱为阴性，记录为(－)。
3.4.2 只有当阴性对照管结果均为阴性，阳性对照管、样品阳性对照管结果均为阳性，实验方有效，否则无效。若阴性对照管为阳性，提示鲎试剂、无内毒素水或实验器具可能受到污染。若阳性对照管为阴性，提示鲎试剂活性减失、内毒素标准溶液效价降低，鲎试剂的灵敏度或内毒素的效价标示不准确，或内毒素标准溶液的稀释不正确。若样品阳性对照管为阴性，提示反应体系内有干扰因素存在。

四：其他常用实验方案
4.1 鲎试剂灵敏度复核实验
 当使用新批号的鲎试剂或实验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时，应按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“鲎试剂灵敏度复核实验”进行实验。按照下式复核灵敏度：λ＝lg-1(ΣX/4)，当0. 5λ≤λ ≤2.0λ时，鲎试剂灵敏度复核合格，检测时仍以标示灵敏度λ为准。
4.2样品的干扰实验
 当鲎试剂、样品的来源、配方、生产工艺或实验环境中发生了任何有可能影响实验结果的变化时，须按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“干扰实验”进行干扰实验。以样品代替无内毒素水为溶剂，配制2λ，λ，0.5λ，及0.25λ的内毒素系列标准溶液进行灵敏度复核。若灵敏度复核值在0.5λ 到2λ之间(包含0.5 λ及2 λ)，则认为在此实验条件下样品无干扰。若灵敏度复核值在0.5λ 到2λ之外，则认为在此实验条件下样品有干扰，需对样品进行稀释(稀释倍数不得超过最大有效稀释倍数MVD)或进行其它处理消除干扰。
4.3凝胶限度实验
 凝胶限度实验用于判断样品的内毒素含量是否超过药典所规定的细菌内毒素限值。按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“凝胶限度实验”进行实验。在实验有效的情况下，如果样品管的两个平行管均为阴性，判定样品的内毒素含量小于药典规定限值。如果样品管的两个平行管均为阳性，判定样品的内毒素含量不符合药典规定。如果样品管的两个平行管一管为阳性，另一管为阴性，需进行复试。复试时，样品需做4个平行管，若所有平行管均为阴性，判定样品符合规定，否则判定样品不符合规定。
4.4凝胶半定量实验
 本方法系通过确定反应终点浓度来量化样品中内毒素含量。详见《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“凝胶半定量实验”。



  我公司所售商品均为100%厂家供货，品质保证，价格优惠！
1.试剂包装：1g、5g、10g、25g、100g、500g等不同包装，欢迎来电咨询：5M异硫*酸胍溶液(RNase-free),生化试剂
2.试剂纯度：97%-99%以上
3.库存均有现货。
4.产品订购以订货当日最新价格为准。
5.所有产品为确保质量，出库均复检。


  5M异硫*酸胍溶液(RNase-free)的纯度及用途：纯度高质含量低，适用于研究和配制标准液； 纯度较高，杂质含量较低，适用于定性和定量分析 重量略低于二级试剂，用途近似二级试剂 化学试剂按纯度由低到高可分为工业纯、实验纯（LR）、化学纯（CP）、分析纯（AR）、优级纯（GR）和超纯等多种规格。

我公司生产供应销*(代"售")的生化试剂正全品类优惠促销，十分期待您的咨询选购5M异硫*酸胍溶液(RNase-free) 生化试剂。