北京现货Karnovsky固定液供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货Karnovsky固定液供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货Karnovsky固定液供应
产地：国产|进口
编号：BTN131226
英文名：Karvovsky Fixative Solution
规格：250mL
Karnovsky固定液是组织化学中最常用的混合型固定液之一，主要成分含能快速渗透的多聚甲醛和缓慢渗透的戊二醛。它能很好保存组织的抗原性和精细结构，故尤其适用于电镜免疫化学样品的固定。本产品是在Karnovsky原始配方的基础上修改而得。

产品特点：
1．既可用于灌注法固定，也可用于浸泡法固定。
2．渗透能力强，固定均匀，组织收缩小，染色效果好。
3．适用范围广，可以用于固定从细菌、真菌，植物到动物的各种生物材料。
4．对原始配方进行了改良，不使用有毒的含砷化合物，减少了对操作者的毒害。
5．固定的组织经过包埋切片等处理用既可用于光学显微镜检测，也可用于电子显微镜检测。

储存条件：低温运输、4℃保存，保存期为1年。

使用方法：
1．对动物，最好先灌注固定，然后再浸泡固定10-30分钟。对植物、真菌、细菌、病毒、原虫等材料，直接采用浸泡法固定。浸泡在Karnovsky 固定液中的材料可以在4℃放置5年。
2．固定后的组织洗涤后即可用于包埋、切片、染色、检测等后续操作。

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·1M Tris-HCl(pH7.5)(DNA级)
编号：BTN101205
规格：250mL

·dCTP溶液(2.5mM)
编号：BTN130915
英文名称：dCTP Solution(2.5mM)
规格：2mL
dCTP分子式为C9H13N3O13P3Na3,分子量是533.1，消光系数为9.1×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为271nm。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法)
编号：BTN100303
英文名称：Fungus DNA Column extraction kit(Glass bead method)
规格：50次
真菌DNA提取是一个难题，一是因为真菌有菌丝体、孢子等多种完全不同的结构形态，二是因为其细胞壁一般都很厚，比较难以破碎。本产品是液氮研磨法柱式真菌DNA提取试剂盒的姊妹产品，它利用玻璃珠法破碎细胞，主要用于从真菌孢子和液体培养的真菌细胞中提取DNA(液氮研磨法柱式真菌DNA提取试剂盒采用液氮研磨法破碎细胞，适用于从真菌菌丝体中提取其基因组DNA)。

产品特点：
1. 即开即用，提供包括玻璃珠、离心吸附柱在内的所有试剂和耗材。
2. 采用玻璃珠法破碎细胞，属于物理方法，远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好，也不容易带入外援真菌DNA。
3. 本方法提取一个样品只需要10余分钟，方便、快速和高效。
4.一次可以处理5mL的过夜真菌培养物，所得的基因组DNA OD260/OD280一般都在1.8左右，长度一般在20 kb左右，每mL菌液的DNA产率一般在1-3ug。可以直接用于PCR和酶切等后续试验。

试剂盒组成：

 

成成分	规格
溶液A	25ml
溶液B	25ml
溶液C	75ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
酸洗玻璃珠，400μm	25g
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，保存期为一年。

使用方法：
1. 对菌液：取3-5mL过夜培养的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中，12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
2. 对菌落：用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落(约50mg)，转移到装有1mL水的干净的塑料离心管中，洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
3. 对孢子材料，一般取0.1g左右，直接加入到离心管中，然后进入下一步操作。
4.在材料中加入无菌水1mL，振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
5.沉淀中加入500μl溶液A和0.5克的玻璃珠，涡旋震荡10分钟。
6. 加入500μL的溶液B，涡旋震荡3分钟，12000rpm离心2分钟，将上清液全部转移到一个5mL的干净的塑料离心管中。或者每管0.3mL，分别转移到2-3个1.5mL的干净的塑料离心管中。
7.在上清中加入3倍体积的溶液C，颠倒数次混匀后，分三次上离心吸附柱，每次上柱后均先室温放置2分钟，然后12000rpm离心1分钟，倒掉穿透液，再第二次上柱，重复上面的操作，直到挂柱步骤完成。
8.在离心吸附柱中加入500μl通用洗柱液，12000rpm离心1分钟，倒掉穿透液。
9. 重复上步操作一次。
10. 12000rpm空柱离心1分钟。
11. 加入50-100μl DNA洗脱液2.0，室温放置1分钟以上，12000rpm离心1分钟，穿透液即为真菌DNA样品。
12. 为了得到更多的DNA样品，可以重复上步操作1-2次。
13. 所得DNA即可立即使用或放冰箱长期保存。


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·酵母DNA提取试剂盒
编号：BTN130990
英文名称：Yeast DNA extraction kit
规格：50次

·Southern级植物DNA提取试剂盒
编号：BTN130940
英文名称：Plant DNA extraction kit(Southern Grade)
规格：10次

·DNA碱性胶上样液
编号：BTN101222
英文名称：DNAload for Alkaline Gel
规格：1.5mL
本品是6×的DNA碱变性琼脂糖电泳上样液，含有碱溶液、助沉剂、染料等成分。

产品特点：
1. 即开即用，不需要制备各种溶液。
2. 使用简单，电泳时，先将DNA样品与本上样液1：5混合即可直接上样。
3.还可以用于DNA碱变性琼脂糖电泳。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

·脂蛋白纯化试剂盒
编号：BTN130885
英文名称：Lipoprotein Purification Kit
规格：50次
本品是6×的DNA碱变性琼脂糖电泳上样液，含有碱溶液、助沉剂、染料等成分。

产品特点：
1. 即开即用，不需要制备各种溶液。
2. 使用简单，电泳时，先将DNA样品与本上样液1：5混合即可直接上样。
3.还可以用于DNA碱变性琼脂糖电泳。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

·人基因组DNA(男性)
编号：BTN131031
英文名称：Human Genomic DNA(Male)
规格：100μg
本产品为人基因组DNA，来源于多位匿名的捐献者，其中BTN131031为男性基因组DNA；BTN131032为女性基因组DNA。利用脉冲电场凝胶电泳测量，90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。。

储存条件：低温运输、4℃保存、有效期一年。

·TCEP溶液(0.5M)
编号：BTN131056
英文名称：TCEP Solution
规格：5mL
本产品是0.5M的TCEP溶液，是在SDS-PAGE分析之前一种无味的高效还原样品的试剂。

产品特点：
1．即用、无味、稳定、中性的0.5 MTCEP溶液。
2．无需制备TCEP•HCl储存液，无需在SDS-PAGE上样前进行中和。
3．方便、省时的还原剂TECP。
4．中性pH降低在还原步骤中剪切酰胺键的可能性。
5．室温稳定，节省冰箱的空间。可以使实验室的环境更加安全、清洁。
6．便宜,可重复使用也可一次性使用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


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·一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD)
编号：BTN100908A
英文名称：One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(A)
规格：30次
本产品是在SDS-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)套装基础上改良而得，主要改良的地方有两处：一是配胶液的pH偏酸，二是将还原剂加入到电泳液中。

产品特点：
1．偏酸的pH使PAGE胶比常规SDS-PAGE 更加稳定，便于配预制胶，增加实验的可重复性。
2．能降低蛋白质的脱*反应和烷基化反应，也能阻止蛋白质的二硫键再生成。
3．把还原剂整合到电泳液中，避免了蛋白质在电泳过程中重新形成二硫键，蛋白条带比常规SDS-PAGE 更加锐利。
4．可把分离胶和浓缩胶配胶液整合成一个，成分更简单。
5．更换电泳液即可用于不同大小的蛋白(A型电泳液适合20 kD以上蛋白，B型适合2-50 kD蛋白)，分离多肽时不需要Tricine-SDS-PAGE。
6．即开即用，用户不需单独准备各种成分，十分方便。
7．安全，免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺。
8．电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。

产品组成：

成分	30T(A)	30T(B)
丙*(代"烯")酰胺(干粉)	60g	60g
甲叉双丙*(代"烯")酰胺(干粉)	3g	3g
长效期SDS-PAGE 配胶液，4×	200ml	200ml
长效期SDS-PAGE还原剂	10ml	10ml
TEMED	1.5ml	1.5ml
过硫*(代"酸")铵	1g	1g
长效SDS-PAGE上样液，5×	1ml	1ml
长效期SDS-PAGE电泳液A型	20L	-
长效期SDS-PAGE电泳液B型	-	20L
说明书	1份	1份

储存条件：常温运输和保存(SDS-PAGE上样液需-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：

一、使用本产品不需要浓缩胶，直接配制分离胶。如果使用A型电泳液(分离30 KD以上蛋白质用)，最好配制10%的PAGE胶；如果使用B型电泳液(分离2-30 KD的蛋白质用)，最好配制12%的PAGE胶。也可以选择其他胶浓度，但各成分用量需要按比例调整。
1．第一次使用本产品时需先配制30%丙*(代"烯")酰胺溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水，充分摇晃直到溶解即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺溶液(用手大约摇10-20分钟)。
2．第一次使用本产品时还需配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液(简称30% AB溶液,下同): 不同实验需要加入不同比例的甲叉双丙*(代"烯")酰胺。对长效期SDS-PAGE电泳，丙*(代"烯")酰胺与甲叉双丙*(代"烯")酰胺比例一般在19:1，因为此时PAGE胶的孔径最小，分辨率最高。制备方法是将3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉加入到200mL上步配好的30%丙*(代"烯")酰胺溶液中，摇晃溶解即得30%的AB溶液，该溶液最好4℃避光(可包上锡箔纸壁光)保存并在一个月内用完。30% AB溶液具有神经毒性，一定要戴手套操作。
3．新鲜配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵)：按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL 去离子水的比例将去离子水加到装有硫*(代"酸")铵干粉的1.5mL EP 管中，摇晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
4．本产品不需要配制分离胶和浓缩胶两种胶，只需要配一种连续胶。配制方法如下(以下是以配制10mL的胶的用量为例，用户自己需要根据胶的大小决定所需体积)：

胶浓度	用量(mL)			总体积 (mL)
	去离子水	30% AB溶液	4×长效期SDS-PAGE配胶液
10%(对A型)	4.20	3.30	2.50	10
12%(对B型)	3.50	4.00	2.50	10

5．摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应，不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
6．加入50μL新配制的10%APS和30μL TEMED(这是配制10mL胶的用量，配制更大体积的胶则按比例增加)，迅速摇匀后倒胶。
7．在胶的液面达到顶部的时候停止灌胶并插入梳子，室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
8．拔出梳子，用水冲洗加样孔。
9．配制的PAGE胶可以在4℃长期放置数月，直到使用。注意：需要盖上1×长效期SDS-PAGE 配胶液，否则PAGE胶会变干而无法使用。
10．使用时，将凝胶板固定在电泳装置上，往上槽和下槽加入足够量的1×长效期SDS-PAGE电泳液(A型或B型)。
 注意：长效期SDS-PAGE电泳液A型或B型均以干粉形式提供，足够配20 L 1×电泳液。配制时需将全部干粉(含多种没有充分混合的成分，必须一次性全部使用)溶解在去离子水中，并定容到1 L，得到20×长效期SDS-PAGE电泳液，使用时再用去离子水稀释成1×电泳液。20×长效期SDS-PAGE电泳液不需要调pH，可以室温放置。
11．在上槽中加入适量的1×长效期SDS-PAGE电泳液和1/200 体积(以电泳液体积为基数)的长效期SDS-PAGE还原剂并用玻璃棒搅拌混合均匀。
12．在蛋白质样品中加入5×长效期SDS-PAGE上样液(8μL样品加2μL上样液)，72℃加热10分钟。注意：上样液中的一些成分在低温保存时会沉淀，所以用前需要65℃保温10分钟左右使沉淀溶解，混匀后才能使用。上样液中的2-巯基乙*(代"醇")容易挥发，使用多次后用户可以在10μl样品(蛋白质样品+上样液的混合液)中补加0.5μl自备的2-巯基乙*(代"醇")原液，以便使蛋白质充分变性。如果样品是蛋白质沉淀(如TCA沉淀得到的蛋白质)，则需要用Tris缓冲液将其pH调到中性(可用pH试纸检测)，否则残留溶剂可能会改变上样液的pH，严重影响电泳效果。
13．短暂离心，取上清液上样。上样的蛋白总量跟检测方法相关，如果用银染，可以只上样ng级别(对每条带的蛋白量而言)，如果用考染，需要上样μg级别(对每条带的蛋白量而言)。
14．用150V恒压电压进行电泳，直到染料进入胶底部(在B型电泳液中，*酚蓝的速度相当于3-5 KD的蛋白质)。注意：在长效期SDS-PAGE中的电泳速度要快于普通SDS-PAGE。在B型电泳液中的速度又快于A型电泳液。过程中，电流会降低，属于正常现象。
15．终止电泳，取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或转膜)。注意：Western转膜需要专门的转膜液(百奥莱博可以提供)。

二、如果需要更高分辨率，也可把上法配制的胶当成分离胶，并在其上再叠加4%的浓缩胶，操作如下：
16．按上面方法配制分离胶，只是倒胶后在胶面距离顶部1.5cm的时候，或者距梳子齿0.5cm时，停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm 厚的水，使胶顶部液面平整。室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)后，用1×长效期SDS-PAGE 配胶液洗涤凝固的胶的顶部，待用。
17．配制4%浓缩胶(参考上节第4-6 步)。倒胶后在液面达到顶部时停止灌胶，插入梳子，室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
18．拔出梳子，用1×电泳液(A型或B型)冲洗加样孔，后续处理接第7步。

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