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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输
- 保质期:
1年
- 英文名:
Enhanced DAB Chromogenic Kit
- 库存:
352
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应增强型DAB显色试剂盒优惠,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:增强型DAB显色试剂盒优惠
编号:BTN81223
产地:国产|进口
英文名:Enhanced DAB Chromogenic Kit
品牌:百奥莱博
规格:100mL
增强型DAB显色试剂盒中含有检测辣根过氧化物酶(HRP)的所有试剂,适合于检测各种印迹膜上标记的HRP。其反应原理是HRP可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置转变为深褐色的化合物,可根据颜色的有无和深浅来检测HRP的存在与否或存在量,进而推测HPR标记物识别的靶分子的位置及含量。该反应的示意图如下:

产品特点:
1.即开即用,不需要用户准备任何材料。
2.DAB以干粉提供,方便运输。
3.可用于各种印迹膜(包括Southern、Northern、Western印迹膜)和免疫组化中的组织切片。免疫组织显色后还可用Nuclear fast red复染。
4.跟PVDF膜、尼龙膜兼容。
5.显色过程中需要避光,在显色后可拍照或扫描。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| DAB干粉 | 100mg |
| 10mL棕色塑料瓶 | 1个 |
| DAB溶解液 | 100ml |
| 增强剂 | 1ml |
| H2O2 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注意:本产品可以配制100mL增强型DAB显色液,但其具体使用次数根据跟印迹膜的大小密切相关。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期1年
自备试剂:超纯水、HRP标记物(抗体或探针)处理过的印迹膜。
使用方法:
1.从DAB溶解液中取5mL到一个10mL的棕色塑料瓶中(本试剂盒提供),将100mg DAB干粉全部加入,充分振荡混匀,所得溶液即是20×DAB浓缩液。此溶液如果一次不能用完,可以分装成小管在-20℃避光放置6个月。
2.按每cm2印迹膜需要0.1mL DAB显色液的比例计算所需显色液的量,并按下表配制DAB显色液(此处以配制10mL为例,用户如需要配制其他体积,可按比例增减各成分用量):
| 成分 | 用量 |
| DAB溶解液 | 9.4ml |
| 20×DAB浓缩液 | 0.5ml |
| 增强剂 | 0.1ml |
| H2O2 | 10μl |
注意:此溶液必须立即使用。
3.如果是印迹膜,则迅速将印迹膜转移到上步得到的DAB显色液中,室温避光静置。待印迹膜上出现满意的条带时(一般需要2-3分钟,最长不超过10分钟,具体跟靶分子浓度密切相关),迅速将印迹膜转移到盛有超纯水的托盘中摇晃,终止显色反应。数分钟后需要换水,共三次。用吸水纸吸干印迹膜上的水分,照相处理后避光干燥保存印迹膜。
4.如果是组织切片,则直接将DAB染色液滴加在切片上,室温避光放置10分钟,然后浸在超纯水中数次,空气中干燥后显微镜下检测或照相。
欲了解更多增强型DAB显色试剂盒优惠的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·水样病毒沉淀剂
编号:BTN101118
英文名称:Water Sample Virus Precipitation Reagent
规格:10次
·UTP溶液(100mM)
编号:BTN120626
英文名称:UTP Solution,100mM
规格:0.25mL
本产品纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于体外RNA转录合成。
UTP分子式为C9H12N2O15P3Na3,分子量是550.1,消光系数为10.0×103 M-1×cm-1(pH7.0),λmax为262nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·动物RNA提取试剂盒(柱式Trizol)
编号:BTN71201
英文名称:Animal RNA column extraction kit(Trizol)
规格:50次
本试剂盒是动物总RNA快速提取试剂动物RNA提取试剂盒(BTN3070)的柱式升级产品,可用于从各种动物组织(包括白细胞)快速提取总RNA。
试剂盒特点:
1. 操作更加简单快速,整个过程只需要不到十分钟(对一个样品而言)。
2. RNA 纯度更高,OD260/OD280一般在2.0左右。
3.一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
4.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
6. 性价比高于进口的柱式RNA提取产品。
试剂盒组成:
| 成分 | 50T |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 25ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA 洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
下面的操作步骤是针对在1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的,如果处理样品量大,请按比例增加各成份的用量并使用大的离心管和离心机。
1. 根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用:
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10 平方厘米细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106 悬浮细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL溶液A,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/ mL溶液A,否则十分容易产生DNA污染。
d)对RNAhold 保存组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜组织的处理。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL溶液A需0.2mL *仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000rpm室温离心3~5分钟。
4. 将上清液(约0.6-0.8mL的无色透明水相,有时水相比重大时,水相在下层,有机相即蓝相在上层,吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μl上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 加入等体积的溶液B,充分颠倒混匀。
6. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
7. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
9. 加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。
10.室温12000 rmp离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
11. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μL RNA 洗脱液。
12.室温12000 rmp离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA的电泳检测:本试剂盒提取的RNA 最好用甲醛变性胶电泳,如果在非变性的普通琼脂糖胶(in TAE或TBE buffer)上电泳,一定要使用RNA 专用上样液RNAload(操作详见RNAload 使用手册),千万不要使用常用的DNA上样液,因为DNA上样液没有经过去RNase处理,也不能将RNA变性,得到的带型将十分杂乱。
14. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
15. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
16. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:
Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,我们初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如RNAload)。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。
增强型DAB显色试剂盒优惠关键词:BTN81223,增强型DAB显色试剂盒,Enhanced DAB Chromogenic Kit
PY01-039 核黄素(VB2) 10克
9002-04-4 Thrombin 凝血酶
ARB11611 人脱氧核糖核酸酶I(DNAse-I)Elisa方法检测 Human deoxyribonuclease i,dnase-i ELISA KIT
ARB11177 人法尼基二磷酸法尼基转移酶1(FDFT1)ELISA代测服务 Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1,fdft1 ELISA KIT
003000 羊血浆
BOC-L-谷*酰胺 Apocynin 13726-85-7
ARB13166 小鼠热休克蛋白60(Hsp-60)血清中含量检测 Mouse heat shock protein 60,hsp-60 ELISA KIT
四盐*(代"酸")精胺 DL3000 DNA Marker 306-67-2
福尔马林色素清除液 500ml
对*基*磺酰胺 Metol 63-74-1
BTN131183 链激酶 Streptokinase
9000-70-8 明胶 Gelatin
ARB13128 小鼠促黄体激素(LH)Elisa分析 Mouse luteotropic hormone,lh ELISA KIT
植物磷酸化蛋白提取试剂盒 Plant Phosphorylated protein extraction kit 50T|100T
ARB10606 人血红素氧化酶1(HO-1)ELISA检测服务 Human heme oxygenase 1,ho-1 ELISA KIT
(不需DNA酶消化)"
BTN130534 抗凝血酶Ⅲ溶液 Antithrombin III Solution
CYB163040 羊抗小鼠IgG(全分子)-RBITC
硅*型吸附剂 Amoxicillin trihydrate 1343-88-0
增强型DAB显色试剂盒优惠关键词:BTN81223,增强型DAB显色试剂盒,Enhanced DAB Chromogenic Kit
·酸酚
编号:BTN100803
英文名称:Acidic Phenol
规格:100mL
本品是将重蒸馏用乙酸*酸性缓冲液充分饱和而得,pH在4-5之间,不会再吸收样品的水分,可以直接用于RNA提取。
储存条件:常温运输和保存、避光。有效期一年。
疑难解答:
Q:离心后为何酚相在下面?
A:*酚的比重是1.071,水饱和*酚的比重更低,只比纯水稍重。如果水溶液中有较高浓度的盐和其他成分(细胞裂解后也会释放出大量的如核酸,糖分等细胞成分),其比重很容易超过*酚,在此情况下离心,*酚将在下层,水相将在上层,取样时需要十分小心。如果要使*酚相在下层,可以使用比重更大的酚-*仿-异戊醇混合液。
·DNA磷酸化试剂盒
编号:BTN130813
英文名称:DNA Phosphorylation Kit
规格:20次
人工合成的PCR引物、linker和adaptor的5´端一般都是-OH基团而不是-PO4基团(除非额外付费要求在人工合成时加上-PO4基团),而任何DNA连接酶都不能将一个DNA分子5´端的-OH基团和另一个DNA分子3´端的-OH基团进行连接,因此通过人工合成的DNA片段和天然DNA 之间的连接效率一般都比天然DNA 彼此的连接效率低(天然DNA 4个端口均可连接,人工合成的DNA跟天然DNA 有2个端口可以连接,人工合成的DNA之间没有任何端口可以连接),尤其是在平末端连接时。本公司开发的DNA 磷酸化产品能将DNA分子5´端的-OH基团磷酸化。
产品特点:
1.可以快速把DNA的5´端的-OH基团变成-PO4基团,使人工合成的DNA(包括PCR产物)跟天然DNA一样有高的连接效率。
2. 既可以对单链DNA进行磷酸化处理,也可以对双链DNA片段同时磷酸化处理。
3.处理后的DNA可以直接用于连接反应、克隆等,不需要纯化。
4. 本产品足够20次DNA的磷酸化实验。
| 成分 | 规格 |
| 10×TPK缓冲液 | 50μl |
| ATP溶液(10mM) | 100μl |
| T4 多核苷酸激酶(10U/μL) | 20μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期为6个月。
使用方法:
一:双链DNA片段(5´端为-OH基团的)的磷酸化
注意:如果是PCR产物,一定要先胶回收,不能使用没经过纯化的PCR反应液,因为其中的残留PCR引物会耗掉大量的激酶,降低PCR产物的磷酸化效率。
1、在微量离心管中配制下列反应液(20μL):
| 成分 | 用量 |
| PCR胶回收片段 | 2μL(不超过10pmol) |
| 10×TPK缓冲液 | 2μl |
| ATP溶液(10mM) | 5μl |
| T4 多核苷酸激酶(10U/μL) | 1μl |
| 超纯水到 | 20μl |
2、37℃反应30分钟。
3、70℃热处理5分钟,灭活酶。
4、可直接用于后续克隆(加入量不要超过总体积的1/5)。
二:单链DNA片段的磷酸化
注:单链DNA 包括局部双链的DNA。引物,linker,adaptor,Oligo探针等均按此操作处理。
5、在微量离心管中配制下列反应液(20μL):
| 成分 | 用量 |
| 单链DNA片段 | 5-10 pmol |
| 10×TPK缓冲液 | 2μl |
| ATP溶液(10mM) | 1μl |
| T4 多核苷酸激酶(10U/μL) | 1μl |
| 超纯水到 | 20μl |
6、37℃反应30分钟。
7、70℃热处理5分钟,灭活激酶。
8、可直接用于后续克隆(加入量不要超过总体积的1/5)。如果使用浓度高,则可能需要乙醇沉淀法浓缩DNA。如果单链DNA的浓度低于5pmol,还需要在乙醇沉淀时加入核酸助沉剂。沉淀得到的DNA可溶解在适量的水中。
附:乙醇沉淀浓度DNA(本试剂盒不提供相关试剂,下列操作仅供参考:
1、在DNA溶液中加入0.1倍体积的3 M 乙酸*溶液(pH5.2)。
2、再加入2.5倍体积的无水乙醇和4uL 核酸助沉剂。
3、混匀后12000g 4℃离心10分钟,小心弃上清。
4、加入1mL 70%乙醇,短暂离心3分钟后小心弃上清。
5、短暂离心5秒,吸弃残留液体(约30-50μL)。
6、室温放置2分钟干燥后加入适量的超纯水溶解DNA,立即使用或放-20℃长期保存。
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风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验。6)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。7)滴加 Ⅰ 抗,室温1小时或者4℃过夜或者37℃1小时(4℃过夜后在37℃复温45分钟)。8)PBS洗三次每次2分钟。9)滴加生物素化二抗,20℃~37℃ 20 分钟。10)PBC 洗 3 次每次 2 分钟。11)滴加试剂SABC,20℃~37℃ 20 分钟。12)PBS 洗 4 次每次 5 分钟。13)DAB 显色:DAB 显色试剂盒或者自配显色剂显色(镜下掌握显色程度)。14)蒸馏水洗。苏木素复染 2 分钟、盐酸酒精分化。15)脱水、透明
免疫组化实验步骤 试剂: PV-9000 通用二步法试剂盒 (北京中杉金桥) ZLI-9018 DAB显色试剂盒 (北京中杉金桥) 脱蜡至水 二甲苯Ⅰ(8min) 二甲苯Ⅱ(8min) 无水乙醇和二甲苯1:1(5min) 无水乙醇(3min) 95%乙醇(3min) 85%乙醇(3min) 75%乙醇(3min) PBS洗3遍 二.抗原修复 抗原修复液柠檬酸钠 0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液(CB,ph6.0,1000ml)PH
抗人CD105单克隆抗体(NeoMarkers),兔抗人CD34、CD31多克隆抗体(Antibody Diagnostica Inc),兔抗人vW因子多克隆抗体(华美公司),抗兔及抗鼠ABC试剂盒、DAB显色试剂盒为华美公司产品,其他试剂均为国产分析纯以上级别。 3、方法: 植块法原代细胞培养: 细胞培养瓶的处理:选用50ml玻璃培养瓶,高压蒸汽灭菌,瓶底铺自制鼠尾胶(制作方法参见2),移入80℃烤箱烤干,临用前用消毒D-Hanks平衡盐缓冲液冲洗3次
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









