萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒现货价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒现货价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒现货价格
英文名：Firefly Luciferase Assay Kit
规格：100次
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
本试剂盒采用通用裂解缓冲液，能与其他类型的报告基因检测和蛋白含量检测兼容。本产品与海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒共同使用，可进行一体化的双荧光素酶检测。

报告基因检测是真核基因表达调控研究的常用方法。因为检测光量子的方法非常敏感，所以生物发光法是报告基因检测最常用的手段。荧光素酶(luciferase)催化底物荧光素的转化，发射出光子。萤火虫荧光素酶催化的发光反应，具有很好的浓度线性范围(7~8个数量级的线性范围)，酶的检测灵敏度达到10⁻²ºmol。原理如下：


试剂盒特点：
1．高度灵敏：可检测10⁻¹⁸～10⁻²ºmol荧光素酶。
2．线性范围宽：线性范围达到7~8个数量级。
3．快速简便：特别适合于高通量筛选。
4．兼容性好：与其它常用报告基因检测试剂兼容。
5．本产品可足够100次荧光素酶检测。

试剂盒组成：

 

成分	规格
5×Universal Lysis Buffer (通用裂解缓冲液)	20mL
Fassay Buffer	10mL
Fassay Substrate(底物)	0.5mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃或-80℃避光保存，有效期半年。

使用方法：

★裂解细胞：
1. 配制裂解液：临用前，取适量5×Universal Lysis Buffer(ULB)，用双蒸水稀释至1×ULB，混匀。1×ULB可在4℃存放数周。
2. 清洗细胞：倾去培养板/皿中的培养液，加入足量PBS ，轻轻洗涤细胞。完全倾去洗涤液。
3. 裂解细胞：按照下表中推荐的体积，在孔/皿中加入1×ULB ，混匀。培养板可在微型振荡器上震荡5-10分钟；培养皿可直接用细胞刮刀刮下细胞，将细胞悬液移入1.5mL离心管，在涡旋振荡器上充分混悬震荡30秒。裂解细胞悬液可直接用于发光测定，也可离心30秒，取上清液做发光测定。
表：不同孔/皿所需1×ULB体积

96孔板	48孔板	24孔板	12孔板	6孔板	35mm平皿	60mm平皿
50μL	80μL	150μL	250μL	500μL	500μL	1000μL

★配制发光反应液：
测定前，室温溶化Fassay Buffer和Fassay Substrate，混匀。按20/1比例用Fassay Buffer稀释Fassay Substrate，配制所需体积的Fassay Reagent(注意避光)。
★测定仪器的设置：
按仪器操作说明开启发光测定仪。手动操作型仪器，将测读时间设为10~20秒。自动操作型仪器，一般将测定延迟设为2秒，将测读时间设为10~20秒，Fassay Reagent的注入体积设定为100μL。
★手动发光测定：
取待测样品20μl加入测量管底部，取Fassay Reagent 100μL立即加入管底部，轻轻敲击管壁3~5次混匀，放入仪器中立即测定，记录发光值为Firefly luciferase的发光单位(RLU)。如用多孔板同时手动测定多个样品，则将各待测样品20μL分别加入连续的各孔底部，用多道加样器于各孔底加入Fassay Reagent 100μL，轻轻敲击板侧3~5次混匀，放入仪器中立即测定，记录发光值为Firefly luciferase的发光单位(RLU)。
★自动发光测定：
配制好的Fassay Reagent置于测定仪内并连接好对应管道。取待测样品20μL分别加入测定管/板孔底部，启动自动测量程序。记录Firefly luciferase的发光单位(RLU)。

注意事项：
1．Fassay Substrate(底物)溶液应密封、盖严存放，避免蒸发。Fassay Buffer和Fassay Substrate(底物)应避免反复冻熔，可分装成合适体积分次使用。
2．1×细胞裂解液一般在当天测定。如需隔日测定，应将样品于-20℃保存。长期保存应在-80℃。
3．用多孔板同时手动测定多个样品时，要尽量缩短样品间试剂加入的时间间隔。
4．本产品与海肾荧光素酶活性检测试剂盒联合使用，可进行一体化的双荧光素酶检测。

萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒现货价格极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·微量核酸沉淀剂
编号：BTN50903
英文名称：NA Precipitation Solution
规格：10mL
本产品是在经典的盐/醇核酸沉淀法基础上经过优化的即用型试剂，在沉淀浓缩核酸时替代常用的盐/醇(如乙酸*/乙醇)，在回收微量核酸时效率比经典的乙酸*/乙醇高30%以上。

产品特点：
1．高效，使用多种优化的成分替代经典的盐/醇(如乙酸*/乙醇)混合物，尤其适合于回收微量核酸(在1.5mL离心管中回收10ng以下的核酸效率比乙酸*/乙醇高30%以上)。
2．操作简单，按2：1的比例将本产品与待回收溶液混合即可，不需要任何额外处理步骤。
3．适用范围广，任何能用盐/醇(包括乙醇和异丙醇)沉淀回收的实验均可使用本产品。
4．不含DNase和RNase，不影响核酸的A260/280光吸收，不影响后续的反应过程(PCR和酶切等)。

储存条件：室温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 按2:1的比例将本产品与核酸溶液(PCR反应液、胶回收液等)混合。本产品取用前需要摇匀。
2.室温15000g离心10分钟(如果核酸含量在2 ng以下，建议离心30分钟)。
3. 弃上清后加75%乙醇1mL，振荡混匀。
4. 15000离心3～5分钟，弃上清。
5. 再短暂离心后小心吸弃上清，沉淀即为回收的核酸沉淀，可溶于TE或水中。


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·PCR法DNA探针地高*(代"辛")标记试剂盒
编号：BTN90604C
英文名称：PCR DNA Labeling Kit(Digoxin)
规格：5次
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR，最后得到的PCR产物将带有标记，可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下：


产品特点：
1.一站式，本试剂盒提供经过优化的试剂，不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针，足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针，也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP，90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记)，有效降低了空间阻碍，检测效果最佳。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。

试剂盒组成：

成分	规格
2×标记专用PCR Mix	500μl
dNTP，2mM each	50μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP	25μL(仅B有)
含DIG-11-dUTP的dNTP	25μL(仅C有)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：标记专用PCR Mix不含dNTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物，使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少，探针杂交信号强度减弱；过长则非特异杂交增加，背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵，所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记，而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率，即先制备非标记PCR产物，再以之为模板制备标记的PCR产物。
二：非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系：

成份	用量
2×标记专用PCR Mix	25μl
dNTP，2mM each	5μl
自备的探针引物一(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的探针引物二(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的模板DNA	1μg基因组DNA或1ng质粒DNA
超纯水	补到50μL

5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物，并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意：最好采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三：标记PCR反应(最好做一个不加标记的对照用于定量)
说明：在设置下面反应时，如果加一种引物，就得到单链标记的PCR产物；如果加两种引物，则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用，但杂交时变性的双链彼此还会复性，这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争，降低杂交效率，因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。

成份	样品	对照
2×标记专用PCR Mix	25μl	25μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP	5μl	不加
dNTP，2mM	不加	5μl
双链标记：探针引物一和引物二 单链标记：探针引物一或引物二	每种50 pmol 一种50 pmol	每种50 pmol 一种50 pmol
上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng)	10 ng	10 ng
超纯水	补到50μL	补到50μL

 注意：本试剂盒提供的dNTP混合物中，标记底物与非标记底物的比例已经进过优化，如果自备标记dUTP，其与dTTP的最佳比例需要优化，标记不同，比例不同。对DIG-11-dUTP，最佳比例1：3；对BrdUTP，最佳比例为1：1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR，但需要进行下列修改：一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物，探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构，效果反而更好)，所以可以增加循环数；二是延伸时间增加15秒，因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢；三是降低复性温度5-7℃，因为标记核苷酸参入到DNA后，新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量：取标记反应和对照反应的产物1-5μl，在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳，并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素，地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
 注意：如果扩增的是单链DNA探针，其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的，而单链DNA没有碱基对，只有一些局部区域折叠形成的有限双链区，因此能结合的EB很少)，因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度，可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化，直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化，请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。


萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒现货价格关键词：Firefly Luciferase Assay Kit,BTN130597,萤火虫荧光素酶活性检测试剂盒

维生素C检测试剂盒(磷钼酸微板法)   100T
3-磷酸甘油酸激酶 Silver iodide 9001-83-6
B0601 山羊血清(辐照灭菌)
1-(2-吡*(代"啶")偶氮)-2-*酚 Pyronin Y 85-85-8
SJ0084 Benzamidine HCl hydrate 苄脒盐*(代"酸")盐水合物
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植物RNA提取试剂 100ml
ARB10477 人白介素17(IL-17)酶联免疫定量检测 Human interleukin 17,IL-17 ELISA KIT
孔雀绿 Inorganic Pyrophosphatase 569-64-2
F040201 人类丙型肝炎病毒重组抗原 HCV
苹果酸脱*酶 Shikimic acid 9001-64-3
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PY02-004  虎红琼脂  250克  
ARB13398 羊阶段特异性表面抗原-1(SSEA-1)尿液中含量检测 Sheep ssea-1 ELISA KIT
1-*酚酞-甲*(代"酚")红指示剂   100ml
阿糖胸苷 Lipase(pocine pancreas) 605-23-2
51811-82-6 Giemsa stain    姬姆色素染料
HC0127 硝酸纤维素膜(NC)
ARB10982 人免疫球蛋白样转录体受体(ILTsR/LIR/CD85)Elisa分析 Human ig-like transcripts receptor,iltsr ELISA KIT

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