北京现货细菌基因组DNA提取试剂盒折扣价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货细菌基因组DNA提取试剂盒折扣价，产品信息：

类别：DNA纯化

英文名：Bacteria Genomic DNA Extraction Kit

产品名	产品编号	包装规格
细菌基因组DNA提取试剂盒	WE0178	50次

品牌：百奥莱博

英文名：Bacteria Genomic DNA Extraction Kit

编号：WE0178

产地：国产|进口

  本试剂盒适用于从革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌中提取高纯度总DNA，也适用于真菌等样本。本试剂盒每次可处理106-108个细胞，获得多至20μg总DNA。纯化过程中不需*酚或*仿等有毒溶剂，无需乙醇沉淀，一小时内即可获得高纯度DNA。本试剂盒采用优化的缓冲体系使裂解液中的DNA高效特异的结合到硅基质离心吸附柱上，而其他污染物可流过膜，PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤被有效去除，最后使用低盐缓冲液或水洗脱，即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。

 

试剂盒组成：

 

组份	50次
Buffer GTL	15ml
Buffer GL	15ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml
Buffer GE	15ml
蛋白酶K	25 mg
蛋白酶K 储存液	1.25ml
吸附柱DM及收集管	50套

 

产品特点：

1、适用于从革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌等样品中分离纯化基因组DNA。

2、无需使用有机溶剂，彻底去除污染物以及下游反应抑制物，快速提取高品质DNA。

 

自备试剂：无水乙醇；提取革兰氏阳性菌需自备Enzymatic Lysis Buffer。

Enzymatic Lysis Buffer配制方法：20 mM Tris，pH8.0；2 mM Na2-EDTA，pH8.0；1.2% Triton X-100。121℃灭菌处理20分钟，加入适量的Lysozyme(溶菌酶)其终浓度为20mg/ml。详细配制方法可登录百奥莱博网站，搜索WE0178S产品查询。

 

实验前准备及重要注意事项/strong>：

1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。

2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。

3、如果提取次生代谢产物大量积累或细胞壁厚的细菌培养物的基因组，建议在对数生长期早期收集样品。

4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。

5、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀出现，请将Buffer GL和Buffer GTL于56℃水浴重新溶解。

6、如果下游实验对RNA污染比较敏感，可以在加入Buffer GL前加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225S。

7、如果提取样品为革兰氏阳性菌，需客户自行配制Enzymatic Lysis Buffer处理菌体，其中需使用浓度为20 mg/ml的Lysozyme(溶菌酶)，Lysozyme本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0214S。

 

操作步骤：

 

一、革兰氏阴性菌基因组DNA的提取：

1、取细菌培养物1-5ml(106-108个细胞，最多不超过2×109个细胞)置于离心管(自备)中，12000rpm(~～13400×g)离心1分钟，尽量吸净上清。

2、向沉淀中加入180μl Buffer GTL，振荡使菌体重悬。

3、加入20μl 蛋白酶K ，涡旋混匀，56℃孵育，直至溶液变清亮，孵育过程中每隔一段时间颠倒或震荡离心管使样本分散。

注意：如需去除RNA，可在上述步骤完成后，加入4μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号：WE0225S)，震荡混匀，室温放置5-10分钟。

4、加入200μl Buffer GL，涡旋震荡充分混匀。加200μl无水乙醇，涡旋震荡充分混匀。短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。

注意：

1)如果多个样品一起操作，Buffer GL和无水乙醇可以等比例混匀后一起加入，震荡混匀。

2)加入Buffer GL和无水乙醇后可能会产生白色沉淀，不会影响后续实验。

5、将步骤4所得溶液(包括形成的沉淀)全部加入到已装入收集管的吸附柱中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱放回收集管中。

6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。

7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。

注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤7。

8、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。

注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。

9、将吸附柱置于一个新的离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。

注意：

1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。

2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。

3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。

4)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤9所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤9；若洗脱体积小于200μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μlBuffer GE或灭菌水洗脱。

5)保存在水中的DNA会受到酸性水解作用影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

 

二、革兰氏阳性菌基因组DNA的提取：

1、取细菌培养物1-5ml(106-108个细胞，最多不超过2×109个细胞)置于离心管(自备)中，12000rpm(～13400×g)离心1分钟，尽量吸净上清。

2、加入180μl Enzymatic Lysis Buffer(自备)使菌体重悬。Enzymatic Lysis Buffer配制方法见说明书前部分自备试剂。

3、37℃孵育30分钟。

4、加入20μl 蛋白酶K 涡旋震荡，充分混匀。加入200μl Buffer GL，涡旋震荡混匀。

注意：不要把蛋白酶K 直接加到Buffer GL中。

5、56℃孵育30分钟。

注意：

1)如果需要，95℃孵育15分钟可以使病原体失活，但是95℃孵育会造成一些DNA的降解。

2)如需去除RNA，可在上述步骤完成后，加入4μl浓度为100 mg/ml的RNase A溶液(货号：WE0225S)，震荡混匀，室温放置5-10分钟。

6、加入200μl无水乙醇，涡旋震荡充分混匀。

注意：加入无水乙醇后可能会产生白色沉淀，不会影响后续实验。

7、将步骤6所得溶液(包括形成的沉淀)全部加入到已装入收集管的吸附柱，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

9、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤9。

10、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟彻底晾干。

注意：这一步目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。

11、将吸附柱置于一个新离心管(自备)中，向吸附柱中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。

注意：

1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。

2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。

3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。

4)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤11所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，重复步骤11；若洗脱体积小于200μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。

5)保存在水中的DNA会受到酸性水解作用影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

 

储存条件：室温(15～30℃)。

北京现货细菌基因组DNA提取试剂盒折扣价专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：细菌基因组DNA提取试剂盒,Bacteria Genomic DNA Extraction Kit,WE0178

我公司始终坚持“创新，品质，服务，节约，敬业，感恩”的理念。吸收新创意，严把质量关口，全方位的服务跟踪，坚持做出高品质产品。本着“追求、员工、技术、精神、利益”的宗旨。现拥有一批精干的管理人员和一支高素质的专业技术队伍。我们以质量为生命、时间为信誉、价格为竞争力的经营信念，立足于国内外市场。目前已在全国各大院系，和研究单位均有销*(代"售")，也得到了客户的认可。百奥莱博生产的细菌基因组DNA提取试剂盒等试剂进入飞速发展期，为了更好的服务客户，公司长期储备海量库存，以此助推中国科技的快速发展，更好的造福人类！

更多有关北京现货细菌基因组DNA提取试剂盒折扣价的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

编号	类别	名称
WE0106	核酸扩增(PCR)	2×BAmp MasterMix(含染料)
WE0196	RNA纯化	固定组织RNA提取试剂盒
WE0207	DNA纯化	磁珠法唾液DNA提取试剂盒
WE0340	一抗	抗VSV-G标签单克隆抗体
WE0291	蛋白质研究	30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶液(29:1)
WE0191	RNA纯化	TRIzon试剂(总RNA提取)
WE0378	二抗	罗丹明标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
WE0332	一抗	抗c-Myc标签单克隆抗体
WE0246	核酸电泳和回收	2kb DNA Marker
WE0362	FITC标记抗体	FITC标记山羊抗人IgG(H+L)
WE0235	基因结构和功能	双链DNA荧光定量试剂盒
WE0265	蛋白质研究	细胞核/浆蛋白抽提试剂盒
WE0274	蛋白质研究	蛋白标准溶液BSA
WE0238	工具酶	T4 DNA聚合酶
WE0231	基因结构和功能	DNA文库定量试剂盒(Illumina平台)
WE0385	FITC标记抗体	FITC标记兔抗山羊IgG(H+L)
WE0345	一抗	抗GST标签多克隆抗体
WE0359	FITC标记抗体	FITC标记兔抗人IgG(H+L)
WE0173	DNA纯化	植物基因组DNA提取试剂盒
WE0290	蛋白质研究	G250蛋白快速染色试剂
WE0101	核酸扩增(PCR)	Taq DNA Polymerase
WE0157	核酸扩增(PCR)	miRNA cDNA第一链合成试剂盒
WE0347	一抗	抗GFP标签多克隆抗体

 

我公司强烈推荐DNA纯化系列产品，热情期待您的咨询选购北京现货细菌基因组DNA提取试剂盒折扣价。