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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
His-tag Purification Resin
- 库存:
425
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应His-tag蛋白纯化树脂(镍柱)怎么卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应His-tag蛋白纯化树脂(镍柱)怎么卖,产品信息:
类别:蛋白质研究
英文名:His-tag Purification Resin
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| His-tag蛋白纯化树脂(镍柱) | YT616 | 10ml|100ml |
英文名:His-tag Purification Resin
编号:YT616
产地:国产|进口
规格:10ml|100ml
品牌:百奥莱博
本品是一种新型的可以兼容还原剂和螯合剂,并能简单、快速、高效并且高特异性地纯化His标签蛋白的纯化介质。
通常带有6个组*酸标签的重组蛋白(6xHis-tagged recombinant protein)或带有6个以上连续组*酸标签的重组蛋白,被称为His标签蛋白。蛋白样品溶液通过本品时,重组蛋白His标签上的组*酸残基能特异性地结合到本品中的镍离子上,其它蛋白则不能被结合。洗涤后,His标签重组蛋白可在非变性条件下被洗脱,从而被分离纯化。
本产品对His标签重组蛋白的亲和力强、选择性高、结合容量大,使用本产品可以获得高纯度的His标签重组蛋白,可用于简单、快速、高效地纯化细菌、哺乳动物细胞、昆虫及杆状病毒等多种表达系统中表达的His标签重组蛋白。纯化的蛋白可以用于结构和功能研究、抗体制备、蛋白与蛋白相互作用、蛋白与核酸相互作用等方面的研究。
本产品采用了一种高度交联的6%琼脂糖凝胶(Sepharose CL-6B)为基质,并使用了进一步优化的接臂和镍离子螯合技术,和目前市售的大多数Ni-NTA agarose或类似产品相比,非特异性蛋白结合显著降低,耐受压力强,镍离子螯合非常稳定。和同类产品相比,本产品由于镍离子基本不会流失,重复使用本纯化介质时不需要重新装载镍离子。
Ni-NTA agarose以及绝大多数类似的镍柱产品不能耐受蛋白样品中常见浓度的还原剂如二硫苏糖醇(DTT)、β-巯基乙醇等以及常见浓度的螯合剂如EDTA等,但本产品可以很好地耐受DTT等还原剂以及EDTA等螯合剂。本产品可耐受20mM DTT等还原剂,以及20mM EDTA等螯合剂。这为需要添加还原剂或螯合剂的蛋白样品的纯化提供了可能性。本产品不兼容8M尿素和6M盐*(代"酸")胍。对于包涵体蛋白的纯化,在采用8M尿素或6M盐*(代"酸")胍溶解蛋白的情况下,需要通过透析去除尿素和盐*(代"酸")胍后才能使用本产品进行His标签蛋白的纯化。
本产品已经螯合了镍离子,呈蓝色,凝胶的颗粒直径为45-165μm。可耐受的最大压力为0.025MPa,约合5.8psi。采用固定流速进行蛋白纯化时的推荐流速为0.5ml/min。
本产品可以高容量、高特异性地结合His标签蛋白。最大蛋白结合量为20-30mg蛋白/毫升凝胶。实际使用时的最大结合量取决于待纯化的His标签重组蛋白的分子量大小,分子量越大则最大结合容量越大,分子量越小则最大结合容量越小。对于分子量为50kD的蛋白,每毫升凝胶的实际最大纯化量约为6-10mg,对于分子量为100kD的蛋白,每毫升凝胶的实际最大纯化量约为12-20mg。但对于分子量相同的蛋白,也会因为蛋白本身特性的不同,结合的最大容量也会有所不同。
本产品储存在30%乙醇中,10ml总体积中5ml为凝胶,5ml为液体。使用时宜把凝胶充分重悬后再吸取。
本产品最多可纯化100-150mg带有His标签重组蛋白。对于分子量为50kD的带有His标签重组蛋白,一个包装的本产品实际最多可纯化约30-50mg蛋白。
注意事项:
1. 本产品使用过程中,缓冲试剂如Tris、HEPES、MOPS等的浓度不宜超过100mM,EDTA浓度不宜超过20mM,SDS和sarkosyl的浓度不宜超过0.3%,Triton、Tween、NP-40的浓度不宜超过2%,脱氧胆酸*、CHAPS的浓度不宜超过1%,组*酸浓度不宜超过20mM,*离子浓度不宜超过5mM,*离子和*离子浓度可以高达2M,甘油浓度可以高达50%。其它未提及试剂的兼容性可以参考上述试剂,但还有待实验验证。
2. 保存和纯化过程中应始终保持凝胶湿润。
3. 若离心不能完全除去蛋白样品中的不溶物,可以将样品溶液用0.45μm的滤膜过滤。
4. 蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作,并应始终放置在4℃或冰浴,以减缓蛋白降解。为有效抑制蛋白降解,可以在裂解液中添加适量的蛋白酶抑制剂混合物。
5. 若使用本说明书提供的条件无法达到理想的纯化效果,可尝试改变洗涤液和洗脱液中咪唑的浓度和(或)pH,以达到最优效果。
储存条件:4℃,有效期一年。
His-tag蛋白纯化树脂(镍柱)怎么卖专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:His-tag Purification Resin,镍柱,His-tag蛋白纯化树脂(镍柱),YT616
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| YT335 | 抑制剂激活剂 | Proteasome抑制剂(MG-132) |
| YT053 | 蛋白质研究 | 非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X) |
| YT262 | 凝胶迁移EMSA | STAT5凝胶迁移突变探针(10μM) |
| YT545 | 酶和辅酶 | 甲*(代"酸")脱*酶 |
| YT812 | 一抗 | 磷酸化IRS1(Ser302)抗体 |
| YT800 | 一抗 | 二甲基Histone H3(Lys4位点)抗体 |
| YT780 | 一抗 | GFP抗体 |
| YT319 | 抑制剂激活剂 | NF-κB抑制剂(BAY 11-7082) |
| YT607 | 酶和辅酶 | 谷胱甘肽合成酶2 |
| YT890 | 细胞凋亡与增殖 | DAPI溶液(5mg/ml) |
| YT099 | 免疫检测 | Cy3抗大鼠免疫荧光染色试剂盒 |
| YT217 | 凝胶迁移EMSA | β-Catenin/TCF凝胶迁移突变探针(10μM) |
| YT005 | 克隆与表达 | RNase A (10mg/ml)(不含DNase) |
| YT036 | 蛋白质研究 | 蛋白浓度测定试剂盒(增强型BCA法) |
| YT125 | 细胞凋亡与增殖 | 细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱*酶法) |
| YT385 | 核酸扩增(PCR) | dATP溶液(100mM) |
| YT589 | 酶和辅酶 | 无机焦磷酸酶 |
| YT404 | 工具酶 | DNA末端平滑试剂盒 |
| YT034 | 蛋白质研究 | 蛋白浓度测定试剂盒(Bradford法) |
| YT602 | 酶和辅酶 | 葡萄糖胺-2-差向异构酶 |
| YT705 | 一抗 | 小鼠抗CRISPR-Cas9抗体 |
| YT590 | 酶和辅酶 | 卤醇脱卤酶 |
| YT803 | 一抗 | Histone H4抗体 |
| YT219 | 凝胶迁移EMSA | CREB凝胶迁移探针(10μM) |
| YT050 | 蛋白质研究 | SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X) |
| YT542 | 酶和辅酶 | 甘露醇脱*酶 |
| YT832 | 一抗 | p35抗体 |
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文献和实验His-tag 时,常遇到的问题是寄主蛋白与填料的非特异性结合,在哺乳动物重组蛋白的纯化过程中,这样的情况更为明显。由于系统中有很多含有组氨酸(histidine)的残基的蛋白,这种蛋白结构与 his-tag 相似,容易与镍柱结合,因此导致目标蛋白纯度降低[13]。FLAG-tag 系统可在非变性条件下进行纯化,能得到高纯度、有活性的蛋白,但其缺点为纯化介质较为不稳定,且纯化成本高上许多[5]。另一常用的标签为 GST-tag,一个 26kDa 的蛋白,其特点是表达量高,具高度抗原性,常用来增加目标蛋白
.cn/bbs/thread/265310 镍柱纯化选择 http://www.dxy.cn/bbs/thread/370355 求HIS-TAG蛋白纯化手册,PROBAND挂NI的方法 http://www.dxy.cn/bbs/thread/224459 请问His纯化柱的Wash buffer怎么配 http://www.dxy.cn/bbs/thread/748199 HIS和GST融合表达的蛋白纯化时那个费用较少? http://www.dxy.cn/bbs
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