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- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
1个月
- 英文名:
Acetate Kinase (Crude Enzyme)
- 库存:
567
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括9027-42-3型乙酸激酶怎么卖在内的一系列生化试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:9027-42-3型乙酸激酶怎么卖
规格:100ml|1L
编号:YT572
品牌:百奥莱博
英文名:Acetate Kinase (Crude Enzyme)
产地:国产|进口
本酶为大肠杆菌表达的乙酸激酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,用于催化乙酸生成乙酰磷酸。
CAS:9027-42-3
外观:半透明黄色溶液
酶促反应:ATP + acetate = ADP + acetyl phosphate
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
9027-42-3型乙酸激酶怎么卖极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·Cy3抗山羊免疫荧光染色试剂盒
编号:YT101
英文名称:Immunol Fluorence Staining Kit with Cy3-Labeled Donkey Anti-Goat IgG
规格:>300次
本试剂盒含有Cy3标记的驴抗山羊IgG(H+L)抗体,可以用于检测山羊来源的相应一抗,观察到的颜色为非常鲜艳的红色。Cy3是近年新开发的一种红色荧光探针。它比绝大部分其它的红色荧光探针更加明亮,更加不容易淬灭,而且背景更低。Cy3的吸收峰550nm、发射峰570nm。本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液,可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月,并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液,可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片,至少可以检测300个样品。
试剂盒组份:
抗山羊Cy3————————————0.03ml
免疫荧光染色二抗稀释液—————50ml
抗荧光淬灭封片液————————15ml
注意事项:
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光,特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭,染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存,但存放时间通常不宜超过一周,随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
4. 免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱,可以适当提高一抗的浓度;如果荧光还是比较弱,可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
·基因定点突变试剂盒
编号:YT027
英文名称:Site-directed Gene Mutagenesis Kit
规格:10次
本试剂盒可以用于点突变,多个邻近密码子的突变,单个或多个邻近密码子的缺失(deletion)或插入(insertion)。
本试剂盒是一个利用目前最新的基因点突变技术设计而成的试剂盒。只需通过基于PCR的突变质粒的合成,和基于Dpn I的模板质粒的消化,转化培养以及后续的酶切或测序鉴定,即可得到预期的突变质粒(参考图1)。累计操作时间不足2小时即可完成基因的定点突变。

参考上图,使用本试剂盒时需要先设计长度通常为30个碱基以上的互补的两个引物,在引物中含有预期的突变位点。然后以待突变的质粒为模板,用这两个引物进行PCR扩增反应。这样可以产生含有预期的突变位点的双链质粒,但这个双链质粒中有两个nick位点。待突变的质粒通常来源于大肠杆菌等细菌,在细菌中会被甲基化修饰,而在体外通过PCR扩增得到的质粒不会被甲基化。这样用甲基化酶Dpn I处理,可以消化掉待突变的质粒模板,而使通过PCR扩增出来的含有突变位点的质粒被选择性地保留下来。这样把Dpn I处理过的产物转化细菌后,质粒中有两个nick位点可以被大肠杆菌修复,得到的克隆就会含有预期的突变质粒了。
本试剂盒提供了DH5α甘油菌,可用于感受态细菌的制备。
试剂盒组份:
| Pfu DNA Polymerase | 10μl |
| Reaction Buffer(10X) | 100μl |
| dNTP Mix(2.5mM each) | 50μl |
| Dpn I | 10μl |
| DH5α 甘油菌 | 200μl |
| Nuclease-Free Water | 1ml |
储存条件:-20℃,有效期一年。
使用说明:
1. 引物设计:
用于特定基因突变的引物需要单独设计,请参考如下一些基本原则进行设计:
(1) 共需设计两条互补的引物。可以先集中设计一条,然后就可以得到互补的另一条引物。
(2) 引物的长度通常为25-45个碱基。
(3) 引物中突变位点任何一侧都必需满足 4X(GC碱基数)+2X(AT碱基数) ≥45。但引物也不宜过长,否则通常会形成非常稳定的二级结构。通常把突变位点两侧的碱基数控制在15个左右,且使两侧按照上述计算得到的数值相近。
例如引物为agtcaggccaattcgaagcagtcgaattgccaag,其中蓝色的aag为突变位点,则
左侧:4X(GC碱基数)+2X(AT碱基数)=4X8+2X7=46≥45
右侧:4X(GC碱基数)+2X(AT碱基数)=4X8+2X8=48≥45
(4) 在可能的情况下,尽量把引物的GC含量控制在40%-60%。
(5) 在可能的情况下,尽量使引物不要产生非常稳定的二级结构和引物二聚体。二级结构和二聚体可以通过一些软件进行分析。
(6) 最好使用经过PAGE纯化的引物或更高纯度的引物。
2. 引物的配制:
如果合成得到的一个引物A的量是20nmol,另外一个互补引物B的量是19nmol。在引物A中加入200微升水,配制成浓度为100µM,在引物B中加入190微升水也配制成浓度为100µM。吸取20微升100µM引物A和20微升100µM引物B到一新的离心管中,再加入160微升水,混匀后即可得到可以直接用于基因定点突变反应的引物(10µM each)。
3. 待突变模板质粒的选择:
选择GC含量在40-55%的待突变模板质粒,并且每一个50bp左右的局部GC含量最好也不超过70%。如果GC含量过高,请先把目的基因克隆到其它合适的载体上,再进行基因定点突变反应。另外目的基因GC含量最好也在40-55%的范围,并且每一个50bp左右的局部GC含量最好也不超过70%。如果目的基因GC含量过高,而突变位点不在高GC含量区域,可以先把该基因的不含高GC含量的一个区域克隆出来,进行定点突变,然后再把突变后的片断克隆回原基因中。如果必需使用高GC含量的质粒模板,或者有局部高GC含量的质粒模板,请另外使用专门用于高GC含量模板的PCR反应试剂。
必需使用从dam+的大肠杆菌(这类菌中质粒可以被甲基化)中抽提得到的质粒用于基因定点突变。常用的大部分大肠杆菌都是dam+的,包括DH5α、JM109等。
4. 基因定点突变反应:
(1) 如下设置基因定点突变反应体系:
Nuclease-Free Water———>?µl
Reaction Buffer (10X)——>5µl
引物 (10µM each)————>2µl
dNTP Mix (2.5mM each)——>4µl
待突变模板质粒(0.5µg)——>?µl
总体积——————————>49µl
按照上面的顺序依次加入各种试剂。在上述反应体系中,根据待突变模板质粒的量,计算出需加入的Nuclease-Free Water的量,使总体积为49微升。适当混匀后,加入 1 ul Pfu DNA Polymerase,混匀。如果用的PCR仪没有热盖,在反应体系上加入一滴矿物油(mineral oil)以防止蒸发。
(2) 按照如下参数设置PCR仪:
| 步骤 | 循环数 | 温度 | 时间 | 说明 |
| 1 | 1 | 95℃ | 1分钟 | 最初变性 |
| 2 | 18 | 95℃ | 40秒 | 变性 |
| 60℃ | 1分钟 | 退火 | ||
| 68℃ | 1分钟/kb | 延伸 | ||
| 3 | 1 | 72℃ | 10分钟 | 延伸、补全 |
| 4 | 1 | 4℃ | 长时间保持 | 暂时存放 |
说明:上面表格中1分钟/kb表示,如果待突变的质粒为6kb,那么68℃的延伸时间为6分钟。
5. Dpn I消化:
PCR反应后,直接在PCR反应体系中加入1微升Dpn I,混匀后37℃孵育1小时。37℃孵育可以在PCR仪上进行,也可以在水浴锅中进行。Dpn I消化完毕后可以直接用于转化,或者-20℃保存备用。
6. 转化、挑克隆鉴定:
感受态细菌的转化效率必需至少在107以上,否则很难得到克隆。根据所使用的感受态细菌,加入尽量多的经过Dpn I消化后的突变产物用于转化。通常每100微升感受态细菌中可以加入5-10微升经过Dpn I消化后的突变产物。按照所使用的感受态细菌的操作方法进行操作,在涂板前通过离心浓缩的办法,把所有被转化后的细菌,全部涂布到含有适当抗生素的平板上,培养过夜。通常会得到50个以下的克隆。如果发现克隆有上千个,那么肯定是有什么地方出了问题。
对于得到的克隆,可以先挑克隆小抽酶切鉴定。以确认得到的质粒的大小和质粒中插入片断的大小与预期结果是否相符。
取3-5个酶切鉴定正确的克隆去测序,以最终确认得到的克隆是否是预期的突变克隆。通常大约每2个克隆中会得到一个预期的突变克隆。但有时也可能会因为随机因素,会测序了3-5个克隆才得到一个预期的突变克隆。
9027-42-3型乙酸激酶怎么卖关键词:Acetate Kinase (Crude Enzyme),乙酸激酶,9027-42-3
乙酸激酶是我们热销产品之一,品牌代理,品质保证,专业性强,实验全程无忧。我公司已为中国市场提供数万种高端试剂,我们有能力提供毫克级,克级,甚至公斤级。试剂产品相关信息齐全,欢迎来电咨询、选购。
·生物素标记p53凝胶迁移探针(0.2μM)
编号:YT240
英文名称:Biotin-labeled p53 Probe For EMSA
规格:200μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的并经生物素(Biotin)标记的p53 consensus oligonucleotide。这个生物素标记的双链寡核苷酸含有公认的p53结合位点,可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的生物素标记探针可以进行约200-400个样品的EMSA检测。
p53 consensus oligo的序列如下:
5"-TAC AGA ACA TGT CTA AGC ATG CTG GGG ACT-3"
3"-ATG TCT TGT ACA GAT TCG TAC GAC CCC TGA-5"
本生物素标记EMSA探针已经过纯化,可以直接用于EMSA结合反应。本生物素标记EMSA探针可以和百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)配套使用。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于基于生物素标记的EMSA检测的详细操作可以参考百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
·FITC抗人免疫荧光染色试剂盒
编号:YT100
英文名称:Immunol Fluorence Staining Kit with FITC-Labeled Goat Anti-Human IgG
规格:>300次
本试剂盒含有FITC标记的山羊抗人IgG(H+L)抗体,可以用于检测人来源的相应一抗,观察到的颜色为非常鲜艳的绿色。FITC是一种常用的绿色荧光探针。FITC的吸收峰492nm、发射峰520nm。 本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液,可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月,并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液,可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片,至少可以检测300个样品。
试剂盒组份:
抗人FITC————————————0.03ml
免疫荧光染色二抗稀释液—————50ml
抗荧光淬灭封片液————————15ml
注意事项:
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光,特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭,染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存,但存放时间通常不宜超过一周,随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
4. 免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱,可以适当提高一抗的浓度;如果荧光还是比较弱,可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
储存条件:-20℃,有效期一年。
9027-42-3型乙酸激酶怎么卖关键词:Acetate Kinase (Crude Enzyme),乙酸激酶,9027-42-3
我公司生化试剂产品种类丰富,涵盖溶剂、培养基、*基酸及其衍生物、组织学试剂、电泳试剂、核苷酸及其衍生物、糖类、纯化试剂、分子生物学用试剂、抗生素、生物缓冲试剂、染色剂、乙酸激酶等。我公司作为一家以客户为中心的生产厂家和全球分销商,生产经营品种齐全的高质量化学品,实验室耗品和器材。在百奥莱博,质量是我们第一关注的要点。欢迎咨询选购!
F040319 豚鼠IgG抗原 Guinea Pig IgG
dTTP(100mM)(超纯)
ARB10408 人可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)酶联免疫定量检测 Human soluble advanced glycation end product receptor (sRaGE) ELISA KIT
ARB10585 人伤寒抗原(St-Ag)含量测试 Human salmonella typhi antigen,st-ag ELISA KIT
阿利新蓝染色液-A液(pH1.0) 100ml
N-硝基-L-精*酸甲酯 Gallocyanine 51298-62-5
M0102 酶(HRP)标记物保存稀释液
DP420 微量样本RNA提取试剂盒
茜素络合指示剂 Erioglaucine disodiu*(代"m") salt 3952-78-1
F020216 兔抗猪IgG抗体 Rabbit Anti-Pig IgG
PY02-238 李氏菌选择性培养基基础(MMA) 250克
E0605 脱纤维裂解马血(无菌) 100ml/500ml
NF-218 抗C反应蛋白(CRP)血清
9087-70-1 蛋白酶抑制剂(抑肽酶) Aprotinin
嗜酸性粒细胞稀释液(计数液) 100ml
ARB10831 人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA代测服务 Human anti-filaggrin antibody,afa ELISA KIT
BOC-D-高*丙*酸 Procyanidin 82732-07-8
BTN121105 茜素红S染色试剂盒 Alizarin Red S Staining Kit
低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)检测试剂盒(Sol微板法) 100T
BTN131140 双脱氧dNTP溶液,10mM ddNTP Solution
我公司客户遍布大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。公司供应的乙酸激酶获得一致好评。其立足于生命科学领域,全力打造高品质生物科技产品链和技术服务链,也具备丰富的管理经验,同时我们建立了集技术支持、售后服务等多方位的服务体系。我们有激情、有理想,更有责任感,是您科研道路上值得信赖的伙伴。
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