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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温
- 库存:
37
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
500T/100T
| 规格: | 500T | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥450.0 |
中文名:Hoechst 33342/PI双染试剂盒
产品简介:
Solarbio生产的细胞凋亡荧光Hoechst 33342 /PI 双染试剂盒为您提供了一种经典而又快速简便的细胞凋亡与细胞坏死检测方法。 本试剂盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)双染的方法。细胞发生凋亡时,染色质会固缩。Hoechst33342可以穿透细胞膜,染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。碘化丙啶(PI)不能穿透细胞膜,对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性丧失,碘化丙啶(PI)可以染色坏死细胞。上述两种染料双染后,使用流式细胞仪或荧光显微镜检测时,正常细胞为弱红色荧光+弱蓝色荧光,凋亡细胞为弱红色荧光+强蓝色荧光,坏死细胞为强红色荧光+强蓝色荧光。
染色快速方便,两种染料的染色仅需20-30分钟,一步染色即可完成。 使用方便,使用流式细胞仪检测时,无需稀释等配制过程,也无需再准备其它任何溶液。 本试剂盒足够检测100个样品,每个样品的细胞数量可以为1×105-1×106。
产品内容:
100T 500T
细胞染色缓冲液 100ml 500ml
Hoechst染色液 0.5ml 2.5ml
PI染色液 0.5ml 2.5ml
说明书 1 份 1 份
使用说明:
1. 每个样品收集约10-100万细胞于1.5ml离心管内,离心弃上清。细胞沉淀用0.8-1ml细胞染色缓冲液重悬。
2. 加入5微升Hoechst染色液。
3. 加入5微升PI染色液。
4. 混匀,冰浴或4℃孵育20-30分钟。
5. 用流式细胞仪检测红色荧光和蓝色荧光。
6. 如果使用荧光显微镜检测,检测前离心沉淀细胞,用PBS洗涤一次,再涂片观察红色荧光和蓝色荧光。对于贴壁细胞使用荧光显微镜检测,可以不收集细胞,直接依次按照上述比例加入细胞染色缓冲液、Hoechst染色液和PI染色液冰浴或4℃染色20-30分钟。染色后PBS洗涤一次,再在荧光显微镜下观察。
注意事项:
需使用流式细胞仪进行红色和蓝色双荧光检测。也可使用荧光显微镜检测。 染色后宜尽快检测。
Hoechst 33342对人体有害,碘化丙啶(PI)对人体有刺激性,请注意适当防护。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Hoechst 33342/PI双染试剂盒试剂管理窍门:
一般按用途可以分为通用试剂、高纯试剂、分析试剂、仪器分析试剂、临床诊断试剂、生化试剂、无机离子显色剂试剂等,有四种常用规格:
1. 优级纯或一级品(GR 精密分析和科学研究工作)。
2. 分析纯或二级品(AR 重要分析和一般研究工作)。
3. 化学纯或三级品(CP 工矿及学校一般化学实验)。
4. 实验试剂(L.P.)。
Hoechst 33342/PI双染试剂盒实验小结:
简短的实验结果总结和解释,将有助于指导后续的研究,其内容包括主要结论、存在问题、改进方法和实验体会等。
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文献和实验1.悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml;帖壁生长的细胞用含有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化成单细胞悬液,离心,弃上清,用1ml全培养液重悬细胞,加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml,37℃孵育7~10min。 2.4℃ 500~1000r/min离心弃去染液。 3.加入1.0ml PI染液,4℃避光染色15min。 4.400目的筛网过滤1次。 5.流式细胞仪分析。
发现Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果。Hochest/PI双染 astra: 请问用hoechst33258可以和PI进行双染可以么?查了很多实验手册,都是单染,由于没有经验,所以能不能麻烦你提供双染的实验流程? midas: 当然可以。以下步骤供参考: 1、向细胞中加入用0.01MPBS溶解的Hoechst33342,终浓度为10μg/ml,37℃反应10min; 2、继续加入用0.01MPBS溶解的PI,使它的终浓度为10μg/ml,4℃反应20min; 3、直接
流式细胞仪检测细胞凋亡——Heochst 33342/PI双染色
地将Hoechst 33342排出到细胞外使之在细胞内积累增加等有关。既然Hoechst 33342进入凋亡细胞中比正常细胞更容易,而EB、PI或7-AAD等染料是不能进入细胞膜完整的活细胞中,即正常细胞和凋亡细胞在不经固定的情况下对这些染料是拒染,坏死细胞由于膜完整性在早期即已破损,可被这些染料染色。根据这些特性,用Hoechst 33342结合PI或EB等染料对凋亡细胞进行双染色,就可在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞区别开来。在双变量流式细胞仪的散点图上,这三群细胞表现分别为:正常细胞为低蓝色
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