- ￥750
- 盖宁生物
- 上海
- GN1944
- 2025年12月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pET-43.1c(+)
- 库存：
现货
- 供应商：
上海盖宁生物
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
|---|---|
| 表达水平: | 高 |
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 7273 bp |
| 5' 测序引物及序列: | T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
| 3' 测序引物及序列: | ColiDOWN: 5'-TTCACTTCTGAGTTCGGCATG-3' |
| 载体标签: | C-HSV, N-His, C-His, N-Thrombin, N-Nus, N-EK |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 备注: |
C term His tag only; N term thrombin cleavage site; N term enterokinase cleavage site; a,b,c vary by MCS
|
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| 1944 | pET-43.1c(+) | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
The pET-43.1 series of vectors are designed for cloning and high-level expression of peptide sequences fused with the 491 aa Nus•Tag™ protein. Unique sites are shown on the circle map. Note that the sequence is numbered by the pBR322 convention, so the T7 expression region is reversed on the circle map. The cloning/ expression region of the coding strand transcribed by T7 RNA polymerase is shown below. The f1 origin is oriented so that infection with helper phage will produce virions containing single stranded DNA that corresponds to the coding strand. Therefore, single stranded sequencing should be performed using the ColiDOWN primer (cat. no. 70845-3). Vector encoded sequence can be completely removed when cloning into the PshA I or Sma I sites (as shown below) by cleaving the Nus•Tag fusion protein with enterokinase or thrombin, respectively.
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*发表【英文论文】请标注：From Shanghai Gaining Biotechnology Co., Ltd.
加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α（+）载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α（+）载体骨架连接基因片段1小时，载体末端和插入末端的比例为1：3（fmol）。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21（DE3）在冰上混合10分钟，并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
相关专题 1)噬菌体DE3溶源化的菌株如BL21(DE3)是最常用的表达菌株，噬菌体DE3是λ噬菌体的衍生株，构建好的表达载体可以直接转入表达菌株中，诱导蛋白的表达方式与lac启动子一样都是IPTG诱导。 2)表达菌株BL21(DE3)上带有lacI基因，T7 RNA 聚合酶编码基因以及lacUV5启动子，lacUV5启动子可以启动T7 RNA 聚合酶的表达; 3)表达质粒 如pET-28质粒
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