铜绿假单胞菌荧光PCR检测试剂盒厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博生产销*(代"售")的铜绿假单胞菌荧光PCR检测试剂盒厂家，是高品质的细菌PCR检测试剂盒产品，欢迎的您垂询订购。

名称：铜绿假单胞菌荧光PCR检测试剂盒厂家
等级：科研试剂
品牌：百奥莱博
英文名：Fluorescent PCR detection kit for Pseudomonas aeruginosa
规格：48次/盒
产地：国产|进口
一、简介：
本试剂盒用一对铜绿假单胞菌特异性引物，对铜绿假单胞菌DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测水样粪便、疑似污染物的水、食物等样本中的铜绿假单胞菌(PA)，用于铜绿假单胞菌(PA)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
铜绿假单胞菌PCR反应液(PA-PCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(PA-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、PCR仪器适用范围
ABI系列，Roche系列等PCR检测仪等。

六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
6.1.1 如使用原始样本进行检测，样本(菌落、菌苔等)应新鲜采集并使用灭菌生理盐水悬浮原始样本。
6.1.2 如需在增菌后进行PCR检测，则应使用选择性增菌液对原始样本进行增菌。
6.1.3 应避免样本间交叉污染。
6.1.4 样本采集后应及时检测，也可保存于-20±5℃待检，长期保存应置于-70℃一下，样本应尽量避免反复冻融。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
6.2.1液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.2.2固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.4 其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：建议采用相关标准方法进行前增菌，并按照6.2.1方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(PA-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PA-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(PA-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明PA核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明PA核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行PA qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明PA核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


我公司的铜绿假单胞菌荧光PCR检测试剂盒厂家，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·禽流感病毒(AIV-M)通用型单重荧光PCR检测试剂盒（定性/定量）
编号：SYA320
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒
一、简介：
禽流感病毒实时荧光qRT-PCR检测试剂是按照美国农业部(USDA)的国际检测标准和我国《禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 19438.1-2004)而制备的商业化检测试剂盒。本试剂盒为中的探针报告基团为6-FAM，淬灭基团为MGB。本方法可定性检测所有亚型禽流感病毒。

二、用途：
本试剂盒适用于检测各种禽类喉咽棉拭子、泄殖腔棉拭子、各种组织样品、尿囊液及细胞培养液等。可用于禽流感病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
荧光qRT-PCR反应液(AIV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1 管 50μL/管
阳性对照(AIV-PTC) 1 管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-18℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照国家标准《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T 18936-2003 )和《禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 19438.1-2004 )进行样品的采集。
6.2 样品RNA提取
可按常规方法提取，也可采用商品化试剂盒提取病毒RNA。
（1） 取灭菌的1.5 mL Eppendorf离心管，做好标识。
（2） 每管加入600 µL裂解液，分别加入被检样本200 µL，再加入200 µL*仿，混匀器上振荡混匀5 s，于4℃ 12000 r 离心15 min。
（3） 取无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管，加入-20℃预冷400µL异丙醇，吸取步骤(2)各管中的上清液转移至相应的管中，避免吸出中间层，颠倒混匀。
（4） 于4℃ 12000 r离心15 min，弃上清，倒置于吸水纸上，沾干液体；加入600µL 75％预冷乙醇，洗涤。
（5） 于4℃ 12000 r离心10 min，弃上清，倒置于吸水纸上，沾干液体。
（6） 10000 r离心10 s，用微量加样器将其吸干，室温干燥5 min～10 min。
（7） 加入10µL 无核酸降解酶的水，溶解管底的RNA，5000 r离心5 s，冰上保存备用。若需长期保存须放置-70℃ 冰箱。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(AIV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000r离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(AIV-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 real time RT-PCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 5 min
预变性 1循环 94℃ for 30 sec
PCR扩增(PCR amplification ) 40循环 94℃ for 5 sec
60℃ for 30 sec
在60℃延伸时收集荧光信号 。报告基团：设置为FAM。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(AIV -PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明AIV核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明AIV核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行AIV qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明AIV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



铜绿假单胞菌荧光PCR检测试剂盒厂家关键词：Fluorescent PCR detection kit for Pseudomonas aeru,SYA036,铜绿假单胞菌荧光PCR检测试剂盒

琼脂糖凝胶CL-4B Lumbokinase capsules 61970-08-9
BL0881 兔抗大鼠IgG免疫血清 0.5ml
四正丁基*化铵 4-Methoxybenzoic acid 1112-67-0
A5512-32 鸡血清 100ml|500ml
L-*甘*酸甲酯盐*(代"酸")盐 Bismuthous oxide 15028-39-4
NF-247 冻干羊抗人C3C血清
多酚氧化酶(菌菇) DAPI 2594228
ARB11986 大鼠HMG-CoA还原酶(HMGR)含量分析 
D0202 脱纤维山羊血(无菌 袋装) 500ml/1000ml/2000ml
RNase&DNase清除剂 Triton x-405
碘乙酸* Dithizone 305-53-3
ARB10316 人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA检测服务 Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin,ngal ELISA KIT
ARB11100 人金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP-3)elisa检测操作说明书 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 3,timp-3 ELISA KIT
ARB13042 小鼠补体蛋白4(C4)Elisa定量检测 Mouse complement 4,c4 ELISA KIT
偶氮脒类引发剂V30 2-Ketobutyric acid 10288-28-5
F020101 兔抗人血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-HSA
ARB11513 人胸腺白血病抗原(TLA)含量检测 Human thymus-leukemia antigen,tla ELISA KIT
ARB12682 大鼠端粒酶(TE)检测服务 Rat telomerase,te ELISA KIT
丁二酸 4′-Hydroxypropiophenone 110-15-6
9001-12-1 CollagenaseⅣ  胶原酶Ⅳ
ARB10471 人白介素10(IL-10)ELISA代测服务 Human interleukin 10,IL-10 ELISA KIT
ARB10100 人E*粘着蛋白/上皮性*黏附蛋白(E-CAd)elisa检测操作说明书 Human e-cadherin,e-cad ELISA KIT
铜绿假单胞菌荧光PCR检测试剂盒厂家关键词：Fluorescent PCR detection kit for Pseudomonas aeru,SYA036,铜绿假单胞菌荧光PCR检测试剂盒


·霍乱弧菌毒素共调菌毛亚单位基因(tcpA)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA076
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·肉毒杆菌AB型双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA017
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Botulinus Type A/B
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
本试剂盒适用于检测粪便、水、血液等样本肉毒杆菌(BL) A/B型DNA，用于肉毒杆菌(BL) A/B型感染的辅助诊断。其检测结果仅供参考。
【原理】
本试剂盒用一对肉毒杆菌(BL)A/B型特异性引物和一条特异性荧光探针，经过裂解提取DNA，后者在Taq DNA聚合酶作用下，配以FQ-Buffer(内含Mg2+、Tris-HCl等)、四种核苷酸单体（dNTPs）等成分，通过PCR-荧光探针体外扩增法对肉毒杆菌(BL) A/B型DNA进行体外扩增，从而达到快速检测肉毒杆菌(BL) A/B型之目的。
【组成】
名称 数量 规格
核酸提取液 1管 2ml/管
Taq 酶系 1管 50μl/管
BL-A/B-qPCR MIX 1管 1000ml/管
BL-A/B -阳性质控品 1管 50μl/管
阴性质控品 1管 250μl/管
【储存条件】-20℃保存，避免反复冻融。
【试剂规格及有效期】48T/盒，有效期6个月。
【适用仪器】
双通道及以上PCR仪器。
【标本采集和保存与运输】
1. 人或动物：
采集新鲜粪便，取黏液脓血部位标本，密闭送检。
2．血液：
采集新鲜抗凝血(非肝素抗凝)，密闭送检。
【使用方法】
1． DNA提取
1.1 粪便：挑取米粒大小粪便(尽可能取黏液脓血部分)，于放置有0.5ml生理盐水的离心管中，振荡混匀，13000rpm离心2分钟。弃上清，沉淀中直接加入100μl DNA提取液充分混匀，沸水浴10min，13000rpm离心5min取上清4μl做PCR反应。
1.2 水标本：取水样3ml，13000rpm离心2min；弃上清，沉淀中直接加入100μl DNA提取液充分混匀，沸水浴10min，13000rpm离心5min取上清4μl做PCR反应。
1.3 血液标本：取2ml抗凝血，静置待自然分层，吸取上层（血浆层）及中层（Buffy coat层），13000rpm离心2分钟。弃上清，沉淀中直接加入100μl DNA提取液充分混匀，沸水浴10min，13000rpm离心5min取上清4μl做PCR反应。
2．PCR扩增
从试剂盒中取出BL-A/B-qPCR MIX、Taq酶系，室温融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N（N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照），每个测试反应体系配制如下表：
试剂 BL-A/B-qPCR MIX Taq酶系
用量 20μl 1μl
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入21μl，向每管中加入处理后样品或BL-阳性质控品和阴性质控品4μl，10000rpm瞬时离心10秒。将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内，推荐循环条件:94℃→2分钟，后94℃ 30秒→55℃ 45秒，40个循环。
荧光通道选择：检测选择FAM通道和HEX/VIC/JOE通道。如果使用ABI系列仪器，请务必在passive reference和quencher处均选择“NONE”。
3. 结果分析判定
FAM通道：Ct值≤35肉毒杆菌A型为阳性；Ct 值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。重复试验之后，如果Ct 值仍然在37-40个循环之间，判断肉毒杆菌A型为阳性，没有荧光值增长肉毒杆菌A型为阴性。
HEX/VIC/JOE通道：Ct值≤35肉毒杆菌B型为阳性；Ct值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。重复试验之后，如果Ct值仍然在37-40个循环之间，判断肉毒杆菌B型为阳性，没有荧光值增长肉毒杆菌B型为阴性。
【质控标准】
阴性质控品：FAM和HEX/VIC/JOE通道全部阴性。
BL-阳性质控品：FAM和HEX/VIC/JOE通道的Ct值均应小于30.0。
以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
【注意事项】
初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

北京百莱博科技有限公司专业生产细菌PCR检测试剂盒产品，欢迎来电咨询选购铜绿假单胞菌荧光PCR检测试剂盒厂家。