肠出血性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(O157)特价优惠

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括肠出血性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(O157)特价优惠在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：肠出血性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(O157)特价优惠
规格：48次/盒
编号：SYA080
等级：科研试剂
品牌：百奥莱博
本试剂盒适用于增菌培养物、疑似病料及食品中大肠杆菌O157的检测，其检测结果仅供参考。

出血性大肠杆菌(EHEC O157)可引起人的出血性腹泻和肠炎的大肠埃希氏菌，引发人类、家畜以及野生禽兽不同形式的疾病。本方法为荧光PCR检测方法，反应在同一管内连续进行，操作简单，并有效防止了污染，能对样品中或预培养液中的大肠杆菌O157进行快速检测，具有特异性高、敏感性强和操作简便的特点。O157的探针报告基团为FAM，淬灭基团为None。

试剂盒组成：

 

组份	数量	规格
大肠杆菌O157荧光qPCR反应液(O157-qPCR MIX)	1管	720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
阳性对照(O157-PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃以下，有效期6个月。

使用方法：

一、样品采集：
➤食品样品：样品的采集与预培养按照《食品卫生微生物学检验大肠埃希氏菌O157：H7/NM检验 (GB/T 4789.36-2008) 要求进行。
➤粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
➤病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。

二、DNA提取：
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
➤液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
➤固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
➤粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
➤其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：建议采用相关标准方法进行前增菌，并按照液体培养物方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

三、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(O157-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	15µL	N×15µL

向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(O157-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

	1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

四、结果分析：
1．结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2．试验成立判定
➤阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(O157-PTC)：均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
3．结果判定
➤在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明O157核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明O157核酸阴性。
➤如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行O157 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明O157核酸阳性；否则判为样本阴性。

五、注意事项：
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

我公司的肠出血性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(O157)特价优惠，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
F030639 FITC标记山羊抗人IgG Fab抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG Fab*FITC
002003 无菌脱纤维牛血 100ml|500ml
ARB11773 人解脲脲原体抗体(UU-Ab)elisa检测说明书 Human ureaplasma urealyticum antibody,uu-ab ELISA KIT
ARB10317 人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)含量测试 Human neutrophil elastase,ne ELISA KIT
人纤溶酶 Sinapic acid 9001-90-5
BTN120312 末端脱氧核苷转移酶 Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)
BL0816 HRP标记羊抗鸡IgG抗体
DP209 琼脂糖凝胶回收试剂盒
BL1300 pUC18
ARB12182 大鼠白细胞介素18(IL-18)血清中含量检测 Rat interleukin18,IL-18 ELISA KIT
PY01-060  肌酐  5克  
1,4-双(5-*基-2-恶唑)* Carboxypeptidase A 1806-34-4
ARB11736 人登革热抗体(DF-Ab)Elisa分析 Human dengue fever antibody,df ELISA KIT
BL0964 正常人血清
ARB10576 人成骨生长肽(OGP)含量检测 Human osteogenic growth Peptide,ogp ELISA KIT
ARB11194 人组织因子途径抑制物(TFPI)Elisa定量检测 Human tissue factor pathway inhibitor,tfpi ELISA KIT
肠出血性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(O157)特价优惠关键词：SYA080,O157,肠出血性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博,肠出血性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(O157)

6892-68-8 二硫赤藓醇 DTE
KG202 GMO作物提取检测试剂盒
ARB12793 小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA代测服务 Mouse beta-endorphin receptor,β-epr ELISA KIT
ARB13254 小鼠游离脂肪酸(FFA)含量分析 Mouse free fatty acids,ffa ELISA KIT
23491-45-4 Bis Benzimide Hoechst NO33258 荧光染料
F020203 山羊抗小鼠IgG2a抗体 Goat Anti-Mouse IgG2a
BFD042 玉米赤霉烯酮快速检测试剂盒
F030816 BIOTIN标记兔抗人IgM抗体 Rabbit Anti-Human IgM*BIOTIN
ARB13949 猪胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)血清中含量检测 Porcine cholecystokinin,cck ELISA KIT
BL1273 *仿：异戊醇＝24：1
瓜尔豆胶 Sarcosine 9000-30-0
BTN120408 绿豆核酸酶 Mung Bean Nuclease
BTN80904 大提柱式真菌RNAOUT Maxi Column Fungal RNAOUT
BL0885 兔抗猪IgG免疫血清 0.5ml
肠出血性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(O157)特价优惠关键词：SYA080,O157,肠出血性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博,肠出血性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(O157)


·轮状病毒C型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA199
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·肠道病毒通用(EV-U)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA210
英文名称：EV-U PCR Detection Kit
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·小肠耶尔森菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA024
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Yersinia enterocolitica
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·玉米转基因Bt11单重荧光PCR检测试剂盒 
编号：SYA269
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Yersinia enterocolitica
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·副结核(paratuberculosis)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA503
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Yersinia enterocolitica
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·普氏立克次体/羌虫病立克次体双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA140
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Yersinia enterocolitica
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·嗜麦芽窄食单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA047
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Yersinia enterocolitica
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·副伤寒沙门杆菌单重荧光PCR检测试剂盒(有甲乙丙三型)
编号：SYA060
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Yersinia enterocolitica
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA114
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Yersinia enterocolitica
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对鼠疫杆菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对鼠疫杆菌进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
本试剂盒适用于检测全血等样品中的鼠疫杆菌(YP)，用于鼠疫杆菌(YP)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
YP反应液(YP-qPCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5ml/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
YP阳性对照(YP-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
取抗凝血下层血细胞50μL，加入100μL双蒸水吹匀。
6.2 RNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽液体，按以下说明进行DNA核酸的提取。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50μL核酸提取液，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5ml EP管，-20℃保存。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(YP-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 15 µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(YP-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(YP-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明鼠疫杆菌核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明鼠疫杆菌核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行鼠疫杆菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明鼠疫杆菌核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

北京百莱博科技有限公司专业生产细菌PCR检测试剂盒产品，欢迎来电咨询选购肠出血性大肠杆菌荧光PCR检测试剂盒(O157)特价优惠。