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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括牛口蹄疫亚I型抗体ELISA检测试剂盒哪里卖在内的动物疫病ELISA检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:牛口蹄疫亚I型抗体ELISA检测试剂盒哪里卖
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:192次/盒|480次/盒
等级:科研试剂
除牛口蹄疫亚I型抗体ELISA检测试剂盒哪里卖外,我公司正在打折促销以下产品:
·冠状病毒(NL63)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA182
英文名称:NL63 PCR Detection Kit
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·新冠状病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA192
英文名称:NL63 PCR Detection Kit
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感通用型/新城疫病毒(AIV-M和NDV)通用型双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA378
英文名称:NL63 PCR Detection Kit
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·产单核李斯特菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA112
英文名称:NL63 PCR Detection Kit
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感病毒(AIV-M)通用型单重荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)
编号:SYA320
英文名称:NL63 PCR Detection Kit
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
禽流感病毒实时荧光qRT-PCR检测试剂是按照美国农业部(USDA)的国际检测标准和我国《禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 19438.1-2004)而制备的商业化检测试剂盒。本试剂盒为中的探针报告基团为6-FAM,淬灭基团为MGB。本方法可定性检测所有亚型禽流感病毒。
二、用途:
本试剂盒适用于检测各种禽类喉咽棉拭子、泄殖腔棉拭子、各种组织样品、尿囊液及细胞培养液等。可用于禽流感病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
荧光qRT-PCR反应液(AIV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1 管 50μL/管
阳性对照(AIV-PTC) 1 管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-18℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照国家标准《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T 18936-2003 )和《禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 19438.1-2004 )进行样品的采集。
6.2 样品RNA提取
可按常规方法提取,也可采用商品化试剂盒提取病毒RNA。
(1) 取灭菌的1.5 mL Eppendorf离心管,做好标识。
(2) 每管加入600 µL裂解液,分别加入被检样本200 µL,再加入200 µL*仿,混匀器上振荡混匀5 s,于4℃ 12000 r 离心15 min。
(3) 取无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管,加入-20℃预冷400µL异丙醇,吸取步骤(2)各管中的上清液转移至相应的管中,避免吸出中间层,颠倒混匀。
(4) 于4℃ 12000 r离心15 min,弃上清,倒置于吸水纸上,沾干液体;加入600µL 75%预冷乙醇,洗涤。
(5) 于4℃ 12000 r离心10 min,弃上清,倒置于吸水纸上,沾干液体。
(6) 10000 r离心10 s,用微量加样器将其吸干,室温干燥5 min~10 min。
(7) 加入10µL 无核酸降解酶的水,溶解管底的RNA,5000 r离心5 s,冰上保存备用。若需长期保存须放置-70℃ 冰箱。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(AIV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000r离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(AIV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 real time RT-PCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 5 min
预变性 1循环 94℃ for 30 sec
PCR扩增(PCR amplification ) 40循环 94℃ for 5 sec
60℃ for 30 sec
在60℃延伸时收集荧光信号 。报告基团:设置为FAM。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(AIV -PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明AIV核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明AIV核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行AIV qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明AIV核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
牛口蹄疫亚I型抗体ELISA检测试剂盒哪里卖关键词:百奥莱博,SYA662,牛口蹄疫亚I型抗体ELISA检测试剂盒
·嗜水气单胞菌/类致贺邻单胞菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA098
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·非洲猪瘟病毒(ASFV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA421
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对非洲猪瘟病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对非洲猪瘟的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染动物的病原学诊断。
二、用途:
本试剂盒适用于动物病料、鼻咽拭子、血液等样本中非洲猪瘟病毒的特异检测。适用于非洲猪瘟病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。最低检测限:500copies/mL,稳定性:批内及批间差异系数≤3% 。
三、试剂盒组成:(48T)
小盒(扩增试剂盒)
组份 | 数量 | 规格 |
非洲猪瘟病毒荧光qPCR反应液(ASFV-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
阳性对照(ASFV-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
组份 | 规格 | 数量 |
FD1试剂 | 15mL/瓶 | 1瓶 |
FD2试剂 | 500μL/管 | 1管 |
FD3试剂 | 15mL/瓶 | 1瓶 |
FD4试剂 | 30mL/瓶 | 1瓶 |
FD5试剂 | 2mL/管 | 2管 |
吸附柱及收集管 | 48套/包 | 1包 |
试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
ASFV反应液 | 14µL | N×14µL |
酶混合液 | 1µL | N×1µL |
总量 | 15µL | N×15µL |
1循环 | 50℃ for 2 min | |
预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
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