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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
猪细小病毒荧光PCR检测试剂盒优惠促销由老牌试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持,本产品用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多猪细小病毒荧光PCR检测试剂盒等病毒PCR检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。
名称:猪细小病毒荧光PCR检测试剂盒优惠促销
产地:国产|进口
编号:SYA778
等级:科研试剂
规格:48次/盒
品牌:百奥莱博
一、简介
本试剂盒用一对猪细小病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对猪细小病毒核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、原理
该试剂盒适用于检测带毒猪血液、分泌物、排泄物以及肾、肺、肝、脑、睾丸、淋巴结和胎盘等组织标本中猪细小病毒(PPV)DNA,用于猪细小病毒(PPV)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
荧光PCR反应液 1管 672μL/管
阴性对照 1管 50μL/管
阳性对照 1管 50μL/管
FD1试剂 1瓶 15mL/瓶
FD2试剂 1管 500μL/管
FD3试剂 1瓶 15mL/瓶
FD4试剂 1瓶 30mL/瓶
FD5试剂 2管 2mL/管
吸附柱及收集管 1包 48套/包
四、储存条件及有效期
荧光定量PCR试剂盒于-20℃以下保存,有效期为12个月;DNA提取试剂盒于常温保存,有效期为12个月。1.5mL离心管、移液器、吸头等请自备。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无DNA酶污染的离心管中备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.2 DNA提取
6.2.1 在上述样本中加入300μL FD1试剂和10μL FD2试剂,震荡混匀;
6.2.2 58℃孵育至完全裂解(样品不同而异,细菌、液体样本建议孵育15min,动物细胞、组织和粪便样本建议孵育15min-1h,样本裂解越完全,核酸提取效果越好);
6.2.3 12000 rpm离心5min,转移上清于一无菌离心管中;
6.2.4 在2.3的离心管中加入300ul FD3试剂,震荡混匀;
6.2.5 将全部溶液加入带膜吸附柱(收集管)中,12000 rpm离心1min,弃去流出液;
6.2.6 加入600ul的FD4试剂,12000 rpm离心1min,弃去流出液;
6.2.7 12000 rpm离心2min,去除残留液体;
6.2.8 将吸附柱放置于新的无核酸酶的1.5 mL离心管中,在膜中央加入20-50µL FD5试剂,室温静置1min,12000rpm离心1min,收集核酸溶液,-20℃保存,若长期保存需放置-80℃冰箱。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(PPV-qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性质控品(NTC)/阳性质控品(PPV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(PPV-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明猪细小病毒核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明猪细小病毒核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行猪细小病毒qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明猪细小病毒核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
我公司的猪细小病毒荧光PCR检测试剂盒优惠促销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
ARB11176 人单胺氧化酶A(MAOA)elisa检测 Human type a monoamine oxidase,mao-a,ELISA KIT
BTN110810 病毒沉淀剂 Virus Precipitation Reagent
F030428 胶体金标记兔抗猫IgG抗体 Rabbit Anti-Cat IgG*GOLD
ARB11235 人细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)酶联免疫定量检测 Human surface membrane immunoglobulin,smig ELISA KIT
ARB13749 毒蛇因子(CVF)定量分析 Cobra venom factor,cvf ELISA KIT
ARB11704 人雄激素结合蛋白(ABP)含量分析 Human androgen binding protein,abp ELISA KIT
2,4-二羟基二*甲酮 Amberlite XAD761 131-56-6
CYB168009 马血清 500ml/瓶
ARB10973 人免疫球蛋白G(IgG)ELISA代测服务 Human immunoglobulin g,IgG ELISA KIT
ARB10473 人白介素12(IL-12/P40)酶联免疫定量检测 Human interleukin 12,IL-12/p40 ELISA KIT
寡霉素 Azomethine-H monosodiu*(代"m") salt hydrate 1404-19-9
*酞 Rifampicin 87-41-2
2,2′-联*-双(3-乙基*并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐 DL-Aspartic acid 30931-67-0
BTN130413 肝素琼脂糖 Heparin Agarose
猪细小病毒荧光PCR检测试剂盒优惠促销关键词:猪细小病毒荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博,SYA778
·超广谱β-内酰胺酶(ESBL)肺炎克雷伯菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA050
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·玉米转基因GA21单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA282
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·副溶血性弧菌TDH/TLH/TOXR/TRH四重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA110
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·手足口病肠道病毒(EV71)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA211
英文名称:EV71 PCR Detection Kit
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·乙型流感病毒(IFVB-V1)分型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA196
英文名称:IFVB-V1 PCR Detection Kit
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肉毒杆菌F型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA022
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Botulinus Type F
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肺炎克雷伯菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA037
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for klebsiella pneumoniae
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感病毒H1亚型(AIV-H1)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA381
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for klebsiella pneumoniae
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对禽流感病毒H1亚型特异性引物,结合特异性荧光探针,用一步法荧光RT-PCR技术对禽流感病毒H1亚型RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中禽流感病毒H1亚型的探针报告基团为FAM。
二、用途:
本试剂盒适用于鼻咽提取物、鼻咽拭子、支气管肺泡灌洗液等临床样品中禽流感病毒H1亚型的特异性检测。适用于禽流感病毒H1亚型感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
H1荧光qRT-PCR反应液(H1-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照 (NTC) 1管 50μL/管
阳性对照 (H1-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的(货号:EAR002)RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(H1-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(H1-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(H1-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明H1核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明H1核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行H1 qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明H1核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
猪细小病毒荧光PCR检测试剂盒优惠促销关键词:猪细小病毒荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博,SYA778
·麻疹病毒/风疹病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA250
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·EB病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA144
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·鸡肠炎沙门氏菌(SPP.E)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA544
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·羊口蹄疫亚I型抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA666
等级:科研实验专用
规格:96次/盒
·猪伪狂犬野毒(wPRV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA573
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·勃氏考克氏体单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA134
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·鸭源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA292
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对鸭源性成分特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用荧光PCR技术对鸭源性成分DNA进行体外扩增检测。本试剂盒中鸭源性成分的探针报告基团为FAM。
二、用途
该试剂盒适合于各种饲料及其它样品中鸭源性成分的检测。
三、试剂盒组成(48T)
组成成分 数量 规格
鸭物种荧光qPCR反应液(Duck-qPCR MIX) 1管 720μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Duck-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Bio-Rad系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
样品的采集按照国家标准《饲料中牛羊源性成分的定性检测定性聚合酶链式反应(PCR)法》(GB/T 20190-2006)要求进行。
6.2 DNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Duck-qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Duck-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(Duck-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明鸭源性成分核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明鸭源性成分核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行鸭源性成分qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明鸭源性成分核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购猪细小病毒荧光PCR检测试剂盒优惠促销。
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