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-20℃
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半年
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907
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
禽传染性喉气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒特价优惠是高品质的病毒PCR检测试剂盒产品,由北京百奥莱博供应,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多禽传染性喉气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒等病毒PCR检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。
名称:禽传染性喉气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒特价优惠
编号:SYA773
等级:科研试剂
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
一、简介:
本试剂盒用一对禽传染性喉气管炎病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用一步法荧光RT-PCR技术对禽传染性喉气管炎病毒RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断
二、用途:
该试剂盒适合于检测气管渗出物、支气管和肺组织、肾脏或输卵管等标本中禽传染性喉气管炎病毒(AILT)RNA,用于禽传染性喉气管炎病毒(AILT)感染的辅助诊断及流行病学调查,其检测结果仅供参考
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
禽传染性喉气管炎荧光qRT-PCR反应液(AILT-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(AILT-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(AILT-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(AILT-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(AILT-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明AILT核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明AILT核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行AILT qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明AILT核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
关于禽传染性喉气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒特价优惠的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·人副流感病毒2型/4型双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA188
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对人副流感病毒2 型特异性引物,一对人副流感病毒4 型特异性引物,分别结合一条特异性荧光探针,用一步法双重荧光RT-PCR 技术对人副流感病毒2 型/4 型RNA 进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中人副流感病毒2 型的探针报告基团为FAM,人副流感病毒4 型的探针报告基团为VIC/HEX/JOE。
二、用途:
本试剂盒适用于各种咽拭子、鼻拭子样品等临床样品中人副流感病毒2型/4型的特异性检测。适用于人副流感病毒2型/4型感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
人副流感2型/4型反应液(PIV2/PIV4-qRT-PCR MIX) 1管 576μL/管
qRT 酶混合物(qRT Enzymes MIX) 1管 192μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
人副流感2 型/4 型阳性对照(PIV2/PIV4-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取4μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(PIV2/PIV4-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 12µL N×12µL
酶混合物 4µL N×4µL
总量 16µL N×16µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR 反应管中分别加入16μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PIV2/PIV4-PTC)4μL,10000rpm 瞬时离心10 秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 50℃ for 30 min
预变性 1循环 95℃ for 5 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 10 sec
55℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM和VIC(若仪器无VIC通道,可选择HEX或JOE通道)。其中FAM基团检测PIV2,VIC/HEX/JOE基团检测PIV4。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):FAM和VIC/HEX/JOE通道均无扩增。
(2) 阳性对照(PIV2/PIV4-PTC):FAM和VIC/HEX/JOE通道均有扩增。
以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效
8.3 结果判定
(1) FAM通道:Ct值≤35 PIV2核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明PIV2核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明PIV2核酸阳性;否则判为样本阴性。
(2) VIC/HEX/JOE通道:Ct值≤35 PIV4核酸为阳性;Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明PIV4核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间,为灰区,需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明PIV4核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA 酶。
(3) PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
禽传染性喉气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒特价优惠关键词:SYA773,百奥莱博,禽传染性喉气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒
BL1154 质粒小量提取试剂盒
ARB13894 猪传染性胸膜肺炎抗原(PCP-Ag)elisa检测
PY02-123 *化*蔗糖琼脂 250克
ARB14188 羊口蹄疫亚1型抗体(FMD1-Ab)检测服务
F050309 小鼠IgG2b抗体 Mouse IgG2b
569-64-2 孔雀石绿
BFD038 喹乙醇检测试剂盒
ARB14152 大鼠血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)血清中含量检测
PY01-067 α-淀粉酶(1:3700) 250克
ARB11679 人超敏C反应蛋白(hs-CRP)代做ELISA实验 Human high sensitivity c-reactive protein,hs-crp ELISA KIT
ARB13402 羊棘球蚴(echInococcIosIs)elisa检测
ARB11305 人促甲状腺素(TSH)含量分析 Human thyroid stimulating hormone,tsh ELISA KIT
A7218-17 豚鼠血清 100ml|500ml
BTN130426 丁基介质 Buty Medium
ARB14119 大鼠*卫蛋白(cAlproteIn)酶标法分析
ARB13455 鸡白痢抗体检测(PD)Elisa方法检测 chiken pullorum diseaes,pd ELISA KIT
9008-02-0 牛血红蛋白 Hemoglobin
ARB10849 人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)ELISA代测服务 Human anti-cell membrane dna antibody,cmdna ELISA KIT
ARB12163 大鼠白介素2可溶性受体(IL-2sR)检测服务 Rat soluble interleukin 2 recepter,IL-2sr ELISA KIT
禽传染性喉气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒特价优惠关键词:SYA773,百奥莱博,禽传染性喉气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒
·脊髓灰质炎病毒1/2/3分型三重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA219
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·札如病毒/星状病毒/腺病毒三重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA218
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA629
等级:科研实验专用
规格:192次/盒
·高致病性猪蓝耳病毒(hp-PRRSV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA560
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·偏肺病毒/腺病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA191
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·甲型流感病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA146
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪瘟病毒(CSFV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA393
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对猪瘟病毒特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用一步法荧光RT-PCR技术对猪瘟病毒RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中猪瘟病毒的探针报告基团为FAM。
二、用途:
本试剂盒适用于猪病料、鼻咽拭子、血液等样本中的猪瘟病毒(CSFV)特异性检测。适用于猪瘟病毒(CSFV)感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
猪瘟病毒荧光qRT-PCR反应液(CSFV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可按常规方法提取,也可采用商品化试剂盒提取病毒RNA。
6.2.1 取无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管,做好标识。
6.2.2 加入600μL裂解液,200μL样本,200μL*仿,混匀器上振荡5 s,4℃ 12000 rpm离心15 min。
6.2.3 吸取步骤6.2.2中的上清液转移至新的无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管中(避免吸出中间层),加入400 μL 异丙醇,颠倒混匀。
6.2.4 4℃ 12000 rpm离心15 min,弃上清;加入600 μL 75%乙醇。
6.2.5 4℃ 12000 rpm离心10 min,弃上清。打开离心管管盖,室温干燥5 min-10 min。
6.2.6 加入10μL 无核酸酶水,溶解管底的RNA,5000 rpm离心5 s,-20℃保存。若长期保存需放置-80℃冰箱。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(CSFV-qRT-PCRMIX)、酶混合物(EnzymesMIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加15μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(CSFV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(CSFV-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明CSFV核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明CSFV核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行CSFVqRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明CSFV核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验。 本科病毒分两个属:①哺乳动物腺病毒属:它们有共同的群特异性抗原,包括人腺病毒34个血清型和猿猴、牛、羊、猪、狗、鼠等哺乳类动物的腺病毒,其中狗的腺病毒具有明显的病原性,引起狗的传染性肝炎和喉气管炎;②禽腺病毒属:代表株是鸡胚致死孤儿病毒,它有14个血清型,具有共同的群特异性抗原。1976年,在荷兰从鸡中发现1种能凝集多种禽红细胞的腺病毒,定名为减蛋综合征病毒。 人腺病毒经呼吸道和粪口途径传播,按其血凝性分为4 个亚群:亚群Ⅰ中,特别是3、7型可引起急性呼吸道感染.3型引起
。因此,统一进场,统一清场,一个禽场只饲养一个品种、一个日龄的家禽是避免禽群发病的最有效措施之一。 四、优良品种的选育 1、无特定病原体(SPF)的繁育:被指定的无特异病原体主要包括无鸡新城疫病毒,禽流感病毒、禽传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒、禽脑脊髓炎病毒、马立克氏病病毒、传染性法氏囊病病毒、禽呼肠孤病毒,禽痘病毒、鸡白痢杆菌、禽多杀性巴氏杆菌、禽败血性霉形体等。因此,SPF的繁育是防止常见传染病有效方式。 2、抗病力强的品种选育:通过遗传杂交工程技术,选育抵抗力强的品种,或通过基因
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