柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml)销售

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柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml)销*(代"售")是高品质的DNA纯化产品，由北京百奥莱博供应，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml)等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。

名称：柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1～5ml)销*(代"售")
规格：50次
编号：WE0177
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
英文名：Blood Genomic DNA Midi Extraction Kit(1-5ml)
  本试剂盒适用于从新鲜或冷冻全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、血沉棕黄层、骨髓、无细胞体液等样本中提取总DNA，包括基因组DNA，线粒体DNA及病毒DNA。本品采用柱式提取方法，可以处理1-5ml的全血，可纯化获得大小为100bp到50kb的DNA，纯化的DNA产量高、质量好，最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染，可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot等实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次
Buffer RCL	3×260ml
Buffer GR	25ml
Buffer GL	25ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml
Buffer GE	15ml
蛋白酶K	50 mg
蛋白酶K 储存液	5ml
吸附柱DL及收集管	50套

保存条件：Buffer RCL 2～8℃，其他组分室温(15～30℃)

自备试剂：无水乙醇。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入5ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
3、本试剂盒最多可以提取1-5ml全血样品，如需提取大量血液样本请选用血液基因组非柱式提取试剂盒(#WE0176)。
4、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请置于56℃水浴重新溶解。
6、如下游实验对RNA污染较敏感，可加入4μl DNase Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225S。
7、试剂盒中的Buffer RCL浑浊后不能继续使用。

操作步骤：
1、向离心管(自备)中加入1-5ml血液样品，加入3倍体积的Buffer RCL轻轻涡旋或颠倒混匀。
2、3000 rpm(～900×g)离心10分钟，小心吸弃上清。
3、向沉淀中加入400μl Buffer GR，重悬沉淀。
注意：如果下游试验对RNA敏感，可加入4μl RNase A(100 mg/ml)溶液，震荡15秒，室温放置5分钟。
4、1-2ml血液样本提取时,向以上溶液中加入40μl 蛋白酶K ，混匀；2-5ml血液样本提取时,向以上溶液中加入100μl 蛋白酶K ，混匀。
5、加入400μl Buffer GL，颠倒混匀15次，剧烈涡旋震荡至少1分钟。
注意：不要直接将蛋白酶K 直接加入到Buffer GL中。
6、70℃孵育10分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：
1)如溶液未彻底清亮，补加适量蛋白酶K ，孵育。延长孵育时间至溶液完全清亮为止。
2)孵育10分钟DNA的产量已经达到最大，继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
7、加入400μl无水乙醇，颠倒混匀10次。短暂离心，使管壁和管盖上液体集中到管底。
8、将上步所得到的溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DL中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm(~～13400×g)离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如果提取样品是小鼠或猴子等血红素难以除去的种属的血液基因组，建议重复步骤9。
10、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤10。
11、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
12、将吸附柱置于一个新的离心管中，向吸附柱中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水，室温下放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度，可以将步骤12所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上，12000rpm离心1min；若洗脱体积小于200μl，可以增加DNA的终浓度，但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg，推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

储存条件：室温(15～30℃)。

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·口腔拭子DNA样本保存管
编号：WE0400
英文名称：Swab DNA Storage Tube
规格：200μl×20支
本产品采用医疗专用的聚*脂海绵为原材料，具有吸液性强、柔软洁净、发尘量低等优点。采样拭子头可折断，使用方便。采用的物料对微生物无毒害，能大量地增加样本的采集、释放量，增强样本送检期间的保存效果。能够常温保存口腔拭子DNA长达12个月，其获得的DNA可用来完成各种基因检测及分析实验，如qPCR、NGS、SNP分析。为运输和存储提供方便，并减低其成本。

使用方法：
1．取样前清洁双手，用清水漱口1-2次，去除口腔中的食物残渣，咽尽口腔中剩余的清水。
2．撕开采样棉签外包装。
3．将棉签伸进口腔内，在内侧颊粘膜处反复擦拭20次以上，至棉头已经被唾液充分浸润(应无食物残渣等异物粘附)。
4．打开样本采集管盖，将采样后的棉签放入样本采集管内，沿手柄上的折痕折断手柄。
5．随即盖上样本采集管，完成样品取样。



·RRX标记驴抗大鼠IgG(H+L)
编号：WE0369
英文名称：Donkey Anti-Rat IgG, Rhodamine Red-X Conjugated
规格：100μl
本产品为RRX标记的经抗原亲和纯化的驴抗体，特异识别大鼠IgG重链和轻链，检测灵敏度高，本底低。Rhodamine Red-X(RRX)是近年新开发的一种荧光素，被激发后产生较明亮的红色荧光。它比普通的荧光更加明亮，更加不容易淬灭，且背景更低。由于其发射波长介于Cy2(或FITC)和Cy5中间，且重叠较少，RRX可与Cy2和Cy5一起用于同一样本的多重标记检测。

免疫原：大鼠IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：Rhodamine Red-X，Amax=570; Emax=590
应用范围：对于大多数实验(1：50-200)

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