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- 详细信息
- 技术资料
- 免疫原:
重组RFP标签
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 保质期:
二年
- 目录编号:
WE0339
- 级别:
单克隆
- 库存:
866
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 宿主:
小鼠
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
RFP
- 抗体英文名:
Anti RFP-Tag Mouse Monoclonal Antibody
- 抗体名:
抗RFP标签单克隆单克隆抗体
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖抗RFP标签单克隆抗体厂家在内的抗体抗原产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:抗RFP标签单克隆抗体厂家
品牌:百奥莱博
英文名:Anti RFP-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
编号:WE0339
产地:国产|进口
该抗体为高纯度的鼠单克隆抗体,与RFP结构域具有高亲和性,可灵敏特异地检测各种RFP编码载体表达的RFP-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG
免疫原:原核表达红色荧光蛋白
应用范围:
WB(1:200-2000)
IP(5μg/mglysate)
Histo/Cytochemistry(1:50-500)
除抗RFP标签单克隆抗体厂家外,我公司正在打折促销以下产品:
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10043-35-*(代"3") Boric Acid 硼*(代"酸")
DL-*甘*醇 Phenyl salicylate 7568-92-5
D-丝*酸 DL-Glutamic acid 312-84-5
抗RFP标签单克隆抗体厂家关键词:抗RFP标签单克隆抗体,RFP抗体,小鼠抗重组RFP标签,重组RFP标签抗体,WE0339
·动物组织/细胞RNA提取试剂盒(含DNase I)
编号:WE0198
英文名称:RNAtiqu Tissue&Cell RNA Extraction Kit(DNase I)
规格:50次
本试剂盒将高效的异硫*酸胍裂解技术与硅基质膜纯化技术相结合,可从动物细胞及组织中高效提取总RNA。起始样本一般最多30 mg组织或1x107细胞。本试剂盒还可回收未完全纯化的RNA、体外转录和酶促反应后得到的RNA。用本试剂盒可提取纯化分子量大于200碱基的高品质RNA,几乎无DNA残留。如果要进行对微量DNA非常敏感的RNA实验,残留的DNA可利用无RNase的DNase在柱上进行消化去除。提取的RNA可用于RT-PCR、 Nothern Blot、Dot Blot等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| DNase I | 1000 U |
| 10×Reaction Buffer | 1000μl |
| Buffer RL | 35ml |
| Buffer RW1 | 30ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 吸附柱RM及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
保存条件:DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存,其它组分室温(15~30℃)。
自备试剂:β-巯基乙醇、无水乙醇(新开封或提取RNA专用)。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2)配制溶液应使用无RNase的水。
3)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、提取的样品避免反复冻融,否则影响RNA提取的量和质量。
3、Buffer RL在使用前请加入β-巯基乙醇,1ml Buffer RL加10μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RL室温可保存1个月。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。
5、Buffer RL如果产生沉淀,可于56℃加热使其溶解后室温放置。
6、所有离心步骤均在室温下进行,且所有操作步骤动作要迅速。
操作步骤:
1、样品处理
① 组织:将组织在液氮中磨碎。每20-30 mg组织加600μl Buffer RL(使用前检查是否加入β-巯基乙醇),组织样本少于20 mg加350μl Buffer RL。样品体积不超过Buffer RL体积的十分之一。
② 单层培养细胞:将细胞在培养瓶中直接裂解或处理成细胞悬液,离心得到细胞沉淀,弃上清,每6-10cm2培养面积加入600μl Buffer RL,小于6cm2加入350μl Buffer RL,反复吹打几次,使其充分裂解。
③ 细胞悬液:12000rpm(~~13400×g)离心1分钟弃上清,得到细胞沉淀。每5×106-1×107细胞加入600μl Buffer RL,少于5×106细胞加入350μl Buffer RL,反复吹打几次,使其充分裂解。
注意:
① 尽量除尽细胞培养基,细胞培养基可能抑制细胞的裂解影响RNA产量。
② 尽量使细胞充分悬浮并充分裂解,否则影响RNA产量。
2、样品充分裂解后,室温放置5分钟,使蛋白核酸复合物完全分离。
3、12000rpm离心2-5min,取上清进行以下操作。
4、向步骤3中得到的溶液中加入1倍体积(600μl 或350μl)的70%乙醇(无RNase水配制),混匀。
注意:加入乙醇后可能会产生沉淀,不会影响后续实验。
5、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中,若一次不能将全部溶液加入吸附柱中,请分两次转入,12000rpm离心1分钟,弃废液。将吸附柱放回收集管中。
注意:吸附柱的最大载量为100μg,不要超载,否则会影响RNA的产量和纯度。
6、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1,12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、配制DNase I 混合液:取52μl RNase-Free Water,向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl),混匀, 配制成终体积为80μl的反应液。
8、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液,20-30℃孵育15分钟。
9、向吸附柱中加入200μl Buffer RW1,12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。
10、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
11、重复步骤10。
12、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干吸附柱中的无水乙醇。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
13、将吸附柱转入新的离心管中,向吸附膜中间位置加入30-50μl RNase-Free Water,室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-70℃保存RNA,防止降解。
注意:
① RNase-Free Wate体积不应小于30μl,体积过小影响回收率。
② 如果要提高RNA的产量,可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤13。
③ 如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤13。
储存条件:室温(15~30℃)。
抗RFP标签单克隆抗体厂家关键词:抗RFP标签单克隆抗体,RFP抗体,小鼠抗重组RFP标签,重组RFP标签抗体,WE0339
·RNA样本保存液
编号:WE0404
英文名称:RNAstore
规格:100ml|500ml
本产品是一种新型的RNA稳定试剂,可迅速渗入组织保护RNA。其迅速的保护作用确保了下游基因表达分析结果的准确性。该试剂保护后的样本可长期保存,即使是多次反复冻融RNA也不会降解。经保护的RNA在37℃下可保存2天,18-25℃下可保存7天,2~8℃下可保存4周,-20℃或-80℃条件下可长期保存。经该产品保存的组织可用于所有关于RNA的后续实验,包括总RNA的提取,micro RNA的提取,mRNA的提取等。
·Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒
编号:WE0328
英文名称:Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit
规格:50次
本试剂盒是一种采用Annexin-PE与7-AAD双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝*酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性,对PS有高度的亲和性。因此,该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的,也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的,而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。7-AAD是一种核酸染料,可进入死细胞内与DNA结合,能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色。7-ADD与PI有着相似的荧光特性,但其发射波谱较PI窄,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是PI的最佳替代品,因此通常将Annexin V-PE与ADD配合染色,以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| 4×Binding Buffer | 10ml |
| 7-AAD Viability Staining Solution | 500μl |
| Annexin V-PE | 250μl |
注意事项:
1、消化细胞时不能用含EDTA的胰酶。
2、本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。
3、需自备PBS和去离子水。
4、荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
5、请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤:
1、细胞样品的准备:
a.对于贴壁细胞:小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞,至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时,加入前面收集的细胞培养液,吹打下所有的贴壁细胞,并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50μl左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞,小心吸除上清。再次加入1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞。
b.对于悬浮细胞:1000×g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50微升左右的培养液,以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞,小心吸除上清,可以残留约50μl左右的PBS,以避免吸走细胞。再次加入1ml 4℃预冷的PBS,重悬细胞,再次离心沉淀细胞。
2、用去离子水按1:3稀释Binding Buffer(4ml Binding Buffer+12ml去离子水)。
3、用250μl Binding Buffer重新悬浮细胞,调节其浓度为1×106/ml。
4、取 100μl 的细胞悬液于 5ml 流式管中,加入 5μl Annexin V-PE 和 10μl 7-AAD 溶液。
5、混匀后于室温避光孵育 15 分钟。
6、在反应管中加400μl PBS,流式细胞仪(FACS)分析。
实验图例:
Jurkat细胞用顺铂诱导凋亡后用Annexin V-PE/7AAD双染流式分析图谱
储存条件:2~8℃,避光保存
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