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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
BCIP/NBT Kit(40×)
- 库存:
816
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)优惠,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)优惠
英文名:BCIP/NBT Kit(40×)
规格:40ml
编号:WE0324
产地:国产|进口
BCIP是碱性磷酸酶最佳的底物组合之一。在碱性磷酸酶催化下,BCIP会被水解而产生强反应性的产物,该产物与NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色化合物。该试剂盒可用于AP系统的IHC 和Western Blot 实验的酶促显色。在AP催化下,在组织切片或印迹膜上结合了AP偶联物的地方产生深蓝色沉淀,可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。
试剂盒组成:
| 组份 | 40ml |
| 40×BCIP | 1ml |
| 40×NBT | 1ml |
| BCIP/NBT Buffer | 40ml |
注意事项:
1、工作液应现配现用,配制好的工作液1小时内有效。
2、工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织片或印迹膜。
3、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件。
4、NBT有毒,使用时请采取必要的防护措施。
5、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、BCIP/NBT显色工作液配制:根据需要量,将40×BCIP、40×NBT和BCIP/NBT Buffer以1:1:38的体积比混匀后,即为BCIP/NBT显色工作液。
2、显色:
1)印迹膜显色:将配制好的工作液滴加在印迹膜上(或将印迹膜倾入到BCIP/NBT显色工作液中),室温避光孵育3-10分钟。显色完毕后,将膜浸入水中,终止反应。
2)组织切片或细胞爬片显色:滴加适量的BCIP/NBT显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上,室温避光孵育3-10分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。
储存条件:2~8℃
BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)优惠正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·抗GFP标签单克隆抗体
编号:WE0346
英文名称:Anti GFP-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
GFP或其突变体EGFP与目的蛋白融合表达常用于检测目的蛋白的表达和分布。该抗体特异识别GFP以及EGFP、YFP、EYFP、CFP 等一些突变体。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:500-2000)、ELISA(1:200-20000)
·高纯游离DNA中量提取试剂盒(负压法)
编号:WE0189
英文名称:CWhipro Circulating Nucleic Acid Midi Extraction Kit
规格:10次|50次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、羊水、尿液等无细胞体液中提取游离DNA。本试剂盒采用可以特异性结合核酸的吸附柱和独特的缓冲液系统,样品裂解后,游离DNA在高盐条件下与硅胶膜结合,在低盐、高pH值时游离DNA从硅胶膜上洗脱下来。本试剂盒使用负压法,同时配备延伸管,可处理多达5ml样本,纯化的DNA产量高、质量好,最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠,可直接用于PCR、荧光定量PCR和二代测序等分子生物学实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 10次 | 50次 |
| Buffer CL | 45ml | 220ml |
| Buffer CB(浓缩液) | 60ml | 300ml |
| Buffer GTL | 15ml | 60ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 3ml | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 3ml | 15ml |
| Buffer EBL | 2ml | 10ml |
| 蛋白酶K | 100 mg | 3×180 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 5ml | 30ml |
| 吸附柱DG及收集管 | 10套 | 50套 |
| 延伸管(20ml) | 10个 | 50个 |
| 连接管 | 10个 | 50个 |
| 离心管(L-1.5 m l) | 10个 | 50个 |
保存条件:吸附柱DG置于2~8℃,其他组分室温(15~30℃)
产品特点:
1、适合大体积样本:试剂盒使用负压法,配备延伸管,配套使用负压装置可将样品处理量提高至5ml。
2、提取得率高:使用高效微量吸附柱结合目的片段,有效提升核酸的回收率,洗脱体积可在10-150μl之间灵活变化,可浓缩低浓度核酸。
3、纯度高:经纯化和浓缩的游离DNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可即用于下游各种应用,包括PCR、荧光定量PCR、二代测序等。
自备试剂:无水乙醇、异丙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向每管蛋白酶K *(代"粉")末中加入指定用量(10次加5ml/50次每瓶加9ml)的蛋白酶K 储存液,使其完全溶解后-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。其它组分可以在干燥、室温(15~30℃)环境下稳定保存一年。如需保存更长时间,可置于2~8℃。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致DNA提取量下降。
3、本试剂盒最多可以从5ml血清血浆、4ml尿液中提取cfDNA。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer CB中加入异丙醇,混合均匀,并在试剂瓶标签上做好标记。
5、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇,混合均匀,并在试剂瓶标签上做好标记。
6、使用前请检查Buffer CL、Buffer CB是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer CL、Buffer CB于56℃水浴孵育重新溶解,混匀后使用。
7、实验开始前将水浴锅预热至60℃。
8、可将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃。
9、负压装置。
操作步骤(血清、血浆样本1-5ml):
1、样品处理:向离心管(自备)中加入1ml血清/血浆样本,若样本不足1ml,加入PBS溶液补至1ml体积。
注意:当样品量超过1ml时,请等比例增加蛋白酶K 、Buffer CL和Buffer CB试剂用量,具体
2、向以上溶液中加入100μl 蛋白酶K ,混匀。
3、加入800μl Buffer CL,剧烈震荡至少30秒。
4、60℃孵育30分钟,其间颠倒混匀数次。
5、加入1800μl Buffer CB(使用前检查是否加入异丙醇),颠倒混匀10次或剧烈震荡15-30秒。
6、冰浴5分钟。
7、正确连接负压装置,将连接管插到负压装置的插口上。
8、将吸附柱插入到连接管上。
9、将延伸管插入开盖的吸附柱中。
注意: 确保连接管、吸附柱和延伸管连接稳固,防止发生漏液。
10、将冰浴后的混合溶液全部加入延伸管中,开启并调节负压至-900~-800 mbar,缓慢吸走管中溶液。待溶液完全吸走,关闭负压开关,当压力恢复至0 mbar时,小心移去延伸管。
11、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 开启并调节负压至-900~-800 mbar,待溶液完全吸走,关闭负压开关。
12、向吸附柱中加入750μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇),开启并调节负压至-900~-800 mbar,待溶液完全吸走,关闭负压开关。
13、向吸附柱中加入750μl无水乙醇,开启并调节负压至-800~-900 mbar,待溶液完全吸走,关闭负压开关。
14、当压力恢复至0 mbar时,将吸附柱取下,置于新的收集管中,12000rpm离心3分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应。
15、将吸附柱置于新的1.5ml离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入20-150μl Buffer EBL,室温放置3分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
附表1:不同血清/血浆样本量推荐加入试剂量
| 加入物 | 加入量(ml) | ||||
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 蛋白酶K | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
| Buffer CL | 0.8 | 1.6 | 2.4 | 3.2 | 4 |
| Buffer CB | 1.8 | 3.6 | 5.4 | 7.2 | 9 |
储存条件:室温(15~30℃)。
BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)优惠关键词:BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒,WB IHC,BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC),BCIP/NBT Kit(40×),WE0324
·2×Taq MasterMix(含染料)
编号:WE0102
英文名称:2×Taq MasterMix(With Dye)
规格:1ml|5ml|25ml
Taq MasterMix是由Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。预配好的PCR混合液可根据使用量的多少调节扩增产物的特异性和得率,使操作更加简单快捷,并可最大限度地减少人为误差和污染。独创的MasterMix配方使扩增产物得率高,重复性强,稳定性好。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。主要适用于PCR法扩增DNA、DNA序列测定等实验。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml | 25ml |
| 2×Taq MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml | 5×5ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml | 5×5ml |
注意:2×Taq MasterMix含有Taq DNA Polymerase, 3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×Taq MasterMix(With Dye) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)优惠关键词:BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒,WB IHC,BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC),BCIP/NBT Kit(40×),WE0324
PY02-216 肉浸液肉汤培养基 250克
9004-67-5 Methyl Cellulose 甲基纤维素
BL0770 (14.4-97.4)低分子量蛋白marker
BTN131055 TCEP盐*(代"酸")膦 TCEP?HCl
Taq酶 Sodium molybdate dihydrate 9012-90-2
L-天冬*酸二甲酯盐*(代"酸")盐 DL-Ornithine HCL 32213-95-9
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ARB10499 人白血病抑制因子受体(LIFR)含量测试 Human leukemia inhibitory factor receptor,lifr ELISA KIT
CYB161008 兔IgG(冻干粉)
核糖核酸酶(牛胰) SLS 9001-99-4
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BTN101113 柱式软体动物RNAOUT Column Mollusk RNAOUT
F020222 山羊抗人IgGxIgMxIgA抗体 Goat Anti-Human IgGxIgMxIgA
ARB12224 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢA(GP-ⅡbⅢA/CD41+CD61)含量测试 Rat platelet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,gp-ⅡbⅢa ELISA KIT
四庚基*化铵 FCA 4368-51-8
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ARB10936 人低分子肝素(LMWH)elisa检测 Human low molecular weight heparin,lmwh ELISA KIT
BL1316 2×Pfu PCR MasterMix(不含染料)
我公司正在打折促销蛋白质研究全系列产品,恭候您的咨询选购BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC)优惠。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验一般 沉淀颜色 紫色 蓝紫色 蓝紫色 棕红色 用途 AP显色 AP或者葡糖氧化酶 WB、原位杂交和免疫组化 AP和免疫组化 四种常用AP显色方法的比较 上表列举了常用的AP显色方法比较,包括BCIP(5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐)、NBT(四唑硝基蓝)和INT(硝基四紫唑),以及它们之间的组合使用。其中,BCIP/NBT是碱性磷酸酶的最佳底物组合之一,具有灵敏度最高、显色锐利、成像性能好等特点,是最常
、5mmol/L MgCl2)管内,充分混匀;再加入B液40μl,轻轻混合即可。最好用前新鲜配制。 NBT即四唑氮蓝(Nitro-Blue-Tetrazolium),MW=818,为深蓝色无定形微溶物质。BCIP即5-溴-4-氯-3-吲哚- 磷酸盐(5-bromo-4-chloro-3-indolyl-phosphate)。当二者存在时,在碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AP)作用下,NBT被还原形成显微镜下可见的蓝色或紫色沉淀。 四、粘附剂 在免疫细胞化学工作中,由于标本
货号 品名 规格 价格 备注 C1601 BCIP/NBT显色试剂盒 - 深蓝色 50ml 240 Sigma原料,单一组分 C1603 单组分pNPP 显色液 - 黄色
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










