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RNase A(100mg/ml)
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962
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北京百奥莱博科技有限公司
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北京百奥莱博专业生产供应RNase A溶液(100mg/ml)厂家,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:RNase A溶液(100mg/ml)厂家
规格:1ml
英文名:RNase A(100mg/ml)
产地:国产|进口
编号:WE0225
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RNase A溶液(100mg/ml)厂家关键词:RNase A(100mg/ml),RNase A溶液,RNase A溶液(100mg/ml),WE0225
·抗HA标签多克隆抗体
编号:WE0350
英文名称:Anti HA-Tag Rabbit Ployclonal Antibody
规格:20μl|100μl
该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的HA标签,而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的HA-Tag融合蛋白。
抗体类型:兔多克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-20000)
·抗V5标签多克隆抗体
编号:WE0344
英文名称:Anti V5 Rabbit Polyclonal Antibody
规格:20μl|100μl
V5标签是从猿病毒5(SV5)副粘病毒P蛋白和V蛋白中分离得到的由14个*基酸残基组成的多肽(GKPIPNPLLGLDST)。该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的V5标签,不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的V5-Tag融合蛋白。
抗体类型:亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-10000)
·抗Flag标签单克隆抗体
编号:WE0337
英文名称:Anti Flag-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
该抗体高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的Flag标签(DYKDDDDK),而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的Flag-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽(DYKDDDDK)
应用范围:
WB(1:500-5000)
IP(1:50-200)
IF/ICC、ELISA(需摸索最佳稀释度)
·30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶液(29:1)
编号:WE0291
英文名称:30% Acr-Bis(29:1)
规格:2×250ml
30%Acr-Bis(29:1)即30%的聚丙*(代"烯")酰胺-N,N"-亚甲双丙*(代"烯")酰胺(Acrylamide-N,N"-Methylene*(代"b")isacrylamide)的水溶液,其中Acrylamide与-N,N"-Methylene*(代"b")isacrylamide 的比例为29:1。本产品常用于配制各种浓度的变性及非变性聚丙*(代"烯")酰胺(PAGE)凝胶,进行常规的蛋白或核酸电泳实验,使用方便。
操作步骤:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。
I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可), 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
| SDS-PAGE 分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6%胶 | 50-150 kD |
| 8%胶 | 30-90 kD |
| 10%胶 | 20-80 kD |
| 12%胶 | 12-60 kD |
| 15%胶 | 10-40 kD |
附表2. 配制SDS-PAGE分离胶
| 分离胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
| 纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×) |
10%APS | TEMED | ||
| 6% | 5ml | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
| 10ml | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
| 15ml | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
| 20ml | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 | |
| 8% | 5ml | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
| 10ml | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
| 15ml | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
| 20ml | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 | |
| 10% | 5ml | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 12% | 5ml | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 15% | 5ml | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
附表3. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶
| 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
| 纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×) |
10%APS | TEMED | |
| 2ml | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
| 4ml | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
| 6ml | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
| 8ml | 4.56 | 1.36 | 2 | 0.08 | 0.008 |
储存条件:2~8℃
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works perfectly for molecular biology applications but it can not be used for the cells, it simply kills them. comment 2 ). The protocol below allows to obtain RNAse A that is free of Dnase. Dissolve RNAse A at a concentration of 10 mg/ml
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. Store in aliquots at -20oC RNaseA 2 mg / ml of Sigma R5250 X-A in 10 mM Tris pH 7.5, 15 mM NaCl. Store small aliquots at -20oC RNase T1 100 mg / ml Sigma R1003 in 50% glycerol and 10 mM NaPO4 pH 6.5. Store small aliquots at -20oC. 10 x RNase digestion
Ribonuclease A (RNase A), DNase-free
guanidinium thiocyanate plus 0.1 M 2mercaptoethanol and heavy metal ions.Inactivated by phenol/chloroform extraction.Note The working concentration for RNase A is 1-100 µg/ml depending on the application. The enzyme is active under a wide range of reaction
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