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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Tricine-SDS-PAGE Gel Kit
- 库存:
582
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒现货价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒现货价格
规格:50次
英文名:Tricine-SDS-PAGE Gel Kit
编号:WE0279
产地:国产|进口
常规的Tris-SDS-PAGE电泳的只能分辨大分子蛋白,对于相对分子量小的,尤其是10 kD以下的蛋白分辨率极低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分离分子量在1-10 kD的蛋白及多肽,成为目前电泳法变性分离多肽的主要方法。本产品包括Tricine-SDS-PAGE凝胶制备所需全*(代"套")试剂,只需自备蒸馏水,即可制备高质量各种浓度的凝胶,方便、快捷,电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| 49.5%T 3%C | 30ml |
| 49.5%T 6%C | 100ml |
| Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer | 140ml |
| Glycerol | 30ml |
| APS | 0.5 g |
| TEMED | 750μl |
本产品所提供的APS(过硫*(代"酸")铵)为固体粉末,使用前加入纯水溶解即配制成10%APS溶液(0.5 g APS加5ml纯水),将溶液分装后置于-20℃保存,通常半年内有效。溶液在使用中可放置4℃保存两周。
注意事项:
1、本产品所提供的APS(过硫*(代"酸")铵)为固体粉末,使用前加入纯水溶解即配制成10%APS溶液(0.5 g APS加5ml纯水),10%APS配制后分装-20度保存。APS溶液不稳定,应尽量减少室温存放时间,每次取用后立即放回冰箱,以防失效;若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换,使用-20℃保存的10%APS。
2、在凝胶配制过程中,尤其是液体混匀步骤,应尽量避免气泡的产生。
3、在分离胶上层加纯水时要小心操作,加水时速度不能太快。
4、丙*(代"烯")酰胺具有神经毒性,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
5、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,凝胶浓度配方参考附表。
I 配制分离胶
1、将不同体积的纯水、49.5%T 6%C、Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer和Glycerol(甘油)加入到离心管中混合。
2、加入10%APS和TEMED,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3、在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液(对于1 mm mini-gel,分离胶溶液加约4ml),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4、静置,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
II 配制夹层胶
去除覆盖在分离胶上的水层,用滤纸将残留的水尽量吸去。
1、将不同体积的纯水、49.5%T 3%C和Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer加入到离心管中混合。
2、加入10%APS和TEMED,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3、将适量的夹层胶溶液迅速加至分离胶的上面(对于1 mm的mini-gel,夹层胶溶液加约1ml), 然后在夹层胶溶液上轻轻覆盖一层水层,使凝胶表面保持平整。
4、静置,待夹层胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
附表Tricine-SDS-PAGE凝胶配方表:
| 组份 | 分离胶(胶浓度/配制体积) | 夹层胶 (胶浓度/配制体积) |
浓缩胶 (胶浓度/配制体积) |
||
| 20%/4.5ml | 16.5%/4.5ml | 15.5%/4.5ml | 10%/2ml | 4%/2ml | |
| 49.5%T 3%C | - | - | - | 0.407ml | 0.16ml |
| 49.5%T 6%C | 1.82ml | 1.5ml | 1.395ml | - | - |
| 凝胶缓冲液 | 1.5ml | 1.5ml | 1.5ml | 0.667ml | 0.496ml |
| 甘油 | 0.48ml | 0.48ml | 0.48ml | - | - |
| ddH2O | 0.7ml | 1.02ml | 1.125ml | 0.926ml | 1.344ml |
| 10% AP | 40μl | 40μl | 40μl | 20μl | 20μl |
| TEMED | 5μl | 5μl | 5μl | 3μl | 3μl |
III 配制浓缩胶
去除覆盖在夹层胶上的水层,用滤纸将残留的水吸去。
1、将不同体积的纯水、49.5%T 3%C和Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer加入到离心管中混合。
2、加入10%APS和TEMED,立即涡旋混匀5-10秒,以使溶液充分混匀。
3、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
4、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
5、进行电泳操作。
IV 电泳
将电泳槽放入4℃或冰水浴中,外槽加入阳极缓冲液,内槽加入阴极缓冲液,30V预电泳10 min,将样品(已经过Tricine专用上样缓冲液处理)加入点样孔后30V电泳1小时,100V电泳至*酚蓝到达胶底部后停止电泳,进行后续的考马斯亮蓝染色或电转。
储存条件:2~8℃
关于Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒现货价格的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·抗GAPDH单克隆抗体
编号:WE0356
英文名称:Anti GAPDH Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱*酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个36kDa的亚基组成。除参与糖酵解外,有证据表明哺乳动物细胞中的GAPDH参与了多种胞内生化过程,包括膜融合(membrane fusion)、微管成束(microtubule bundling)、磷酸转移酶(phosphotransferase)激活、核内RNA出核、DNA复制与DNA修复等。GAPDH蛋白几乎在所有组织中都高水平表达,常用于Western Blot检测中校正系统的内参。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG
免疫原:纯化的GAPDH蛋白
应用范围:WB(1:500-5000)
应用种属:人、小鼠、大鼠、兔、猪,鸡、拟南芥
·DyLight594标记山羊抗人IgG(H+L)
编号:WE0358
英文名称:Goat Anti-Human IgG, DyLight 594 Conjugated
规格:100μl
本产品为DyLight 594标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体,特异识别人IgG,最大吸收光谱为591nm,最大发射光谱为616nm。使用本产品检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。DyLight 594是近年来新开发的一种荧光素,较普通的荧光素具有较高的荧光强度和耐光性,在pH4-9的范围内均具有较高的荧光信号,被激发后产生明亮的橙红色荧光。
免疫原:人IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:Amax=591; Emax=616
应用范围:对于大多数实验(1:100-800)
Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒现货价格关键词:Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒,Tricine-SDS-PAGE Gel Kit,WE0279
F030419 胶体金标记兔抗鸡IgY抗体 Rabbit Anti-Chicken IgY*GOLD
ARB10783 人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)Elisa方法检测 Human natural deoxyribonucleic acid antibody,n-dna-ab ELISA KIT
BL0963 封闭兔血清正常(原液) 10ml
J0204 兔抗牛酪蛋白抗血清 1ml/10ml
PY01-019A 猪胆酸 25克
ARB12005 大鼠S100蛋白(S-100)Elisa定量检测 Rat soluble protein-100,s-100 ELISA KIT
A4016-28 山羊血清 100ml|500ml
BL0951 胶体金标记羊抗人IgA(u链特异)抗体
DP316 微量样品基因组DNA提取试剂盒
丙*(代"酸")* APT 137-40-6
ARB12832 小鼠弓形虫循环抗原(TCA)ELISA代测服务
206752-36-5 Benzamidine 苄眯
ARB12920 小鼠白细胞介素4(IL-4)酶免分析 Mouse interleukin 4,IL-4 ELISA KIT
ARB10263 人丁型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA检测服务 Human hepatitis d virus igm,hdv igM ELISA KIT
ARB10096 人EB病毒IgA(EBv IgA)Elisa定量检测 Human epstein-barr virus iga,ebv iga ELISA KIT
ARB11992 大鼠NPC1L1 酶联免疫定量检测
ARB10211 人β内酰胺酶抑制剂(BLI)定量分析 Human β-lactamase inhibitors,bli ELISA KIT
F030229 HRP标记兔抗人Ig抗体 Rabbit Anti-Human Ig*HRP
BTN90903 无RNase的DNase溶液 RNase-Free DNase Solution
BL0872 羊抗猪IgG免疫血清
F030237 HRP标记山羊抗人IgG FC抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC
*化* PVPP 85017-82-9
Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒现货价格关键词:Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒,Tricine-SDS-PAGE Gel Kit,WE0279
PY08-046 肠道菌计数琼脂 9CM 10皿/盒,用于肠道菌计数和鉴别
ARB10575 人成纤维细胞生长因子23(FGF-23)含量测试
D-正亮*酸 DL-Trytophan 327-56-0
维生素E Lanthanum(III) sulfate hydrate 59-02-9
CYB163021 羊抗人纤维蛋白原-RBITC
间*二胺 3-Pyridinesulfonic acid 108-45-2
D-山梨糖 DTAB 3615-56-3
BL1313 2×Taq Plus PCR MasterMix(不含染料)
PY01-083 酸水解酪蛋白 250克|1公斤
ARB13555 兔子中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)Elisa定量检测 Rabbit neutrophil elastase,ne ELISA KIT
钨酸 10% Iron chelate 7783-03-1
ARB13697 兔补体蛋白3(C3)酶标法分析 Rabbit complement 3,c3 ELISA KIT
BL1191 醋酸洋红染色液
我公司正在优惠促销蛋白质研究等系列产品,期待您的咨询选购Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒现货价格。
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文献和实验电泳过程同样很重要啊。电转的时候其实只要预染marker只要转到膜上了,那么你的相应分子量的目的蛋白也就转过去了,所以这就是你摸索条件的指示带。3、电泳过程中有推荐TRICINE-SDS-PAGE胶来进行电泳,会更有利于小分子量蛋白的分离,研读了一些文献,这个效果应该还是很肯定的,但是鄙人没有做过这种电泳,所以给不了什么经验,我最终还是用普通SDS-PAGE胶做出来的,不过鉴于我的蛋白分子量是11KD,那么假如你是几KD甚至更小分子量的多肽,那么还是建议你用TRICINE-SDS-PAGE胶来电
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等等,当然最简单的就是煮沸蒸发水分浓缩了。另外跑胶的时候同时对照酵母胞内蛋白,以防没有分泌出来。SDS-PAGE的配置参见分子克隆,注意你的蛋白大小与胶的浓度的对应性,如果小到20kD以下,可以考虑用tricine胶,不过是个需要全盘重新准备的过程,要考虑清楚。如果选用的载体是带有信号肽的,虽说是分泌表达好纯化,但实际上毕赤酵母本身还是有本底表达的,而且有时候会造成假阳性,所以最后表达过程需要用Western blot或者Elasa,通常都是用WB,具体的细节可见Western Blotting前传:想
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