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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Soluble TMB Kit(20×)
- 库存:
683
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×)现货促销的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×)等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×)现货促销
规格:100ml
编号:WE0309
产地:国产|进口
英文名:Soluble TMB Kit(20×)
品牌:百奥莱博
TMB(3", 3", 5", 5", -四甲基联*(代"*")*(代"胺"))是辣根过氧化物酶(HRP)显色底物,是目前HRP系统ELISA实验的常用显色试剂。TMB显色底物工作液在HRP的催化下,形成蓝色的阳离子产物,在370 nm和652 nm处有主要吸收峰。加酸终止反应后,蓝色转变为黄色,可以在450 nm波长下测定。本试剂盒使用方便,灵敏度高,效果稳定,颜色产物为可溶性,适用于ELISA,不推荐用于IHC实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 100ml |
| 20×T MB-A | 5ml |
| 1×TMB-B | 2×50ml |
注意事项:
1、显色工作液应即用即配,放置超过10分钟会影响显色效果。
2、TMB颜色底物显色后,随着时间的延长,颜色会逐渐消退,因此显色并终止反应后应尽快读值,否则会影响检测的准确性。
3、以96孔酶标板每孔用量100μl显色工作液计算,5ml 20×TMB Kit 可完成1000孔样品的检测。
4、本产品仅限于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、TMB显色工作液配制:
根据实验需用量,将20×TMB-A和1×TMB-B以1:19的比例均匀混合,即配制成为TMB显色工作液。
2、显色:
1)经HRP标记物孵育并充分洗涤后,酶标板每孔中加100μl TMB显色工作液。
2)室温避光孵育25-30分钟,反应产物呈蓝色。
3)每孔加50μl 0.5M H2SO4 终止显色,此时蓝色产物变为亮黄色。
4)将酶标板置于酶标仪中,450 nm波长下读取数据。
储存条件:2~8℃
欲咨询购买TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×)现货促销,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·cDNA第一链合成试剂盒(去除基因组DNA)
编号:WE0133
英文名称:BalbScript gDNA Removal cDNA Synthesis Kit
规格:100次
本试剂盒是用于去除基因组DNA进行反转录的试剂盒。该试剂盒在42℃,2 min即可除去基因组DNA。同时由于反转录试剂中含有抑制gDNA Eraser的组分,经过 gDNA Eraser处理后的样品可以直接进行逆转录反应合成cDNA。本试剂盒配有新型高效反转录酶BalbScript,新颖突变位点大幅提升酶的转录活性,cDNA第一链合成的效率和产量更高,可利用pg级的总RNA或mRNA合成cDNA第一链。如逆转录产物cDNA用于下游荧光定量检测,可在42℃,15min完成逆转录反应。本试剂盒适用于第一链cDNA的合成和后续的RT-PCR、RT-qPCR、以及全长cDNA文库的构建等。
试剂盒组成:
| 组份 | 25次 | 100次 |
| gDNA Eraser | 12.5μl | 50μl |
| 10×gDNA Eraser Buffer | 30μl | 120μl |
| BalbScript,200 U/μl | 25μl | 100μl |
| 5×ScriptRT Buffer | 120μl | 500μl |
| Primer Mix | 30μl | 120μl |
| RNase-Free Water | 1ml | 2×1ml |
产品特点
1、快速去除基因组:含有去除基因组DNA 的gDNA Eraser,只需2min即可除去基因组DNA。
2、快速逆转录:15分钟即可获得荧光定量PCR模板cDNA第一链合成。
3、灵敏度高:可利用pg级总RNA或mRNA模板合成cDNA第一链。
4、高效的逆转录效率:新颖突变位点大幅提升酶活性能,获得更高产量的cDNA。
注意事项:
1、在操作过程中应避免RNase污染,防止RNA降解或实验中的交叉污染,建议操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套,使用专门的仪器和耗材。
2、逆转录体系配制在冰上进行操作,防止RNA发生降解。试剂盒的酶使用后尽快置于-20 ºC保存,并尽量避免反复冻融。
3、反应体系可倍比放大,10μl反应体系可最大使用1μg总RNA。
4、Primer Mix由Oligo(dT)和Random primer配制而成, 也可根据实验需要选用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer。
5、若起始RNA的量小于50ng,建议加入RNA酶抑制剂(RNasin)。本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号为WE0223。
6、对于二级结构复杂的RNA模板,建议在操作步骤之前,将模板RNA在65℃孵育5分钟立刻置于冰上,短暂离心后进行下一步操作。
操作步骤:
将模板RNA在冰上解冻;试剂盒组分在室温解冻后立刻置于冰上。使用前将每种溶液涡旋振荡混匀,并经短暂离心后使用。
一、去除基因组DNA反应
1、根据以下表格在冰上配制反应体系,总体积为10μl。为了保证反应液配制的准确性,先按反应数+2的量配制预混体系,然后再分装到每个反应管中,最后加入RNA样品。
| 试剂 | 10μl反应体系 |
| 10×gDNA Eraser Buffer | 1μl |
| gDNA Eraser | 0.5μl |
| RNA Template | 10 pg-1μg |
| RNase-Free Water | up to 10μl |
注意:如果总RNA量大于1μg,请按比例扩大反应体系。若起始RNA的量小于50ng,则建议加入RNA酶抑制剂(RNasin),该产品货号为WE0223。
2、涡旋震荡混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
3、42℃孵育2分钟(室温反应时,可以延长到30分钟)。
4、反应结束后,短暂离心,置于冰上冷却。
二、逆转录反应
1、根据以下表格在冰上配制反应体系,反应液配制请在冰上进行。为了保证反应液配置的准确性,先按数+2的量配制成预混溶液,然后再分装 10μl到每个反应管中,取配制的预混液10μl加入至已完成去基因组的步骤1反应管中。
| 试剂 | 20μl反应体系 |
| 步骤1反应液 | 10μl |
| BalbScript,200 U/μl | 1μl |
| Primer Mix | 1μl |
| 5×ScriptRT Buffer | 4μl |
| RNase-Free Water | 4μl |
注意:可根据实验需要可使用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer,建议20μl 反应体系Oligo-dT Primer 50pmol,或Gene Specific Primer 2 pmol。
2、混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
3、cDNA合成反应条件:
1)若下游进行荧光定量PCR检测,42℃孵育15分钟,85℃孵育5分钟。
2)若下游进行普通PCR检测,42℃孵育30-50分钟,85℃孵育5分钟。
注意:对于二级结构复杂或GC含量高的模板,可以提高逆转录温度至50℃,增强逆转录效率。
4、反应结束后,短暂离心后置于冰上,再进行后续PCR或荧光定量PCR,如果需要长时间保存,请置于-20℃。
注意:进行Real-time PCR反应时,逆转录产物的加量应不超过PCR反应总体积的1/10。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×)现货促销关键词:可溶型,20×,TMB底物显色试剂盒,Soluble TMB Kit(20×),TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×),WE0309
BTN130540 二*异香豆素溶液 Dichloroisocoumarin Solution
DP209 琼脂糖凝胶回收试剂盒
BL1300 pUC18
ARB12182 大鼠白细胞介素18(IL-18)血清中含量检测 Rat interleukin18,IL-18 ELISA KIT
PY02-220 改良磷酸盐缓冲液PSB 250克
HC0117 透析袋MD27 ( 截留量500)
ARB10357 人心肌锚蛋白重复域1(ANKRD1)含量测试 Human cardiac ankyrin repeat domain 1,ankrd1 ELISA KIT
CYB161027 大鼠IgG(冻干粉)
BTN81109 酵母化学感受态细胞制备试剂盒 Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit
PC2001 长片段PCR扩增试剂盒
HC0130 大张滤纸
ARB11205 人组织蛋白酶抗体(CAth Ab)尿液中含量检测 Human cathepsin antibodies,cath ab ELISA KIT
ARB13657 兔子髓磷脂碱性蛋白(MBP)酶联免疫定量检测 Rabbit myelin basic protein,mbp ELISA KIT
87-79-6 L-山梨糖 L-Sorbose
9005-64-5 Tween-20 吐温-20
ARB13600 兔子补体片断3A(C3A)免费代测 Rabbit complement fragment 3a,c3a ELISA KIT
SJ0273 Ficoll 400 聚蔗糖400
BTN130613 9°Nm DNA聚合酶 9°Nm DNA Polymerase
酒石酸铵 DL-Homocysteine thiolactone hydrochloride 3164-29-2
柠檬酸* Lithium oxalate 6080-58-6
ARB12803 小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)代做ELISA实验 Mouse β-glucuronidase,βgd ELISA KIT
TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×)现货促销关键词:可溶型,20×,TMB底物显色试剂盒,Soluble TMB Kit(20×),TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×),WE0309
·FITC标记兔抗山羊IgG(H+L)
编号:WE0385
英文名称:Rabbit Anti-Goat IgG, FITC Conjugated
规格:100μl
本产品为FITC标记的经亲和纯化的兔抗体,特异识别山羊IgG,检测灵敏度高,本底低,常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。
免疫原:山羊IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:FITC,Amax=492; Emax=520
应用范围:Immunofluorescence(1:25-100)
·组织蛋白抽提试剂盒
编号:WE0260
英文名称:Tissue Protein Extraction Kit
规格:25次|100次
本试剂盒应用于组织样本的总蛋白提取。提取蛋白之前可根据具体实验需要加入蛋白酶抑制剂、盐、还原剂、螯合剂等成分。使用该提取液提取的组织蛋白,可进行蛋白活性分析、免疫检测、蛋白纯化等下游操作,并可采用BCA、Bradford、Lowry法进行蛋白定量。试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物,可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。
试剂盒组成:
| 组份 | 25次 | 100次 |
| Tissue Protein Extraction Reagent | 25ml | 100ml |
| Protease Inhibitor Cocktail | 250μl | 1ml |
保存条件:Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:室温
注意事项:
1、本产品适用于提取心肌、骨骼肌、肾脏、前列腺、皮肤、结肠、肝脏等软组织。
2、为防止蛋白降解,所有的操作尽量在冰上进行。
3、使用本产品提取蛋白后,可采用BCA、Bradford、Lowry法进行蛋白定量。
4、为了获得实验最佳效果,请根据实验调整最佳使用量。
使用方法:
1、请在实验前取出Tissue Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、取适量Tissue Protein Extraction Reagent,抽提蛋白2-3分钟按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail,即1×工作液。
3、1 g组织加入10ml 1×工作液匀浆处理(抽提试剂的使用量可根据组织不同而调整)。若需要浓缩的蛋白提取物,可适当减少组织蛋白抽提试剂使用量。
4、冰上孵育20分钟(冰上放置时间可根据组织不同而调整)。
5、10000×g 离心15-20分钟。
6、转移上清至新管中,进行下一步的蛋白含量测定、纯化及分析。
储存条件:-20℃
我公司正在打折促销蛋白质研究全系列产品,恭候您的咨询选购TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×)现货促销。
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文献和实验10×标本稀释液 12ml 20 进口分装 C0373 HRP-Streptavidin工作液 12ml 50 进口分装 C0374 单组分TMB 底物液 12ml 20 进口
10×标本稀释液 12ml 20 进口分装 C0373 HRP-Streptavidin工作液 12ml 50 进口分装 C0374 单组分TMB 底物液 12ml 20 进口
。6)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。7)滴加 Ⅰ 抗,室温1小时或者4℃过夜或者37℃1小时(4℃过夜后在37℃复温45分钟)。8)PBS洗三次每次2分钟。9)滴加生物素化二抗,20℃~37℃ 20 分钟。10)PBC 洗 3 次每次 2 分钟。11)滴加试剂SABC,20℃~37℃ 20 分钟。12)PBS 洗 4 次每次 5 分钟。13)DAB 显色:DAB 显色试剂盒或者自配显色剂显色(镜下掌握显色程度)。14)蒸馏水洗。苏木素复染 2 分钟、盐酸酒精分化。15)脱水、透明
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