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- 北京
- WE0188-UWI
- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温(15～30℃)
- 保质期：
长期
- 英文名：
Blood Genomic DNA Batch Extraction Kit
- 库存：
228
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京现货血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称：北京现货血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)厂家
编号：WE0188
规格：4×96次
英文名：Blood Genomic DNA Batch Extraction Kit
产地：国产|进口
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻全血(带有抗凝血剂，如柠檬酸盐、EDTA或肝素等)、血浆、血清、血沉棕黄层、骨髓、无细胞体液等样本中的总DNA，包括基因组DNA，线粒体DNA及病毒DNA。本试剂盒广泛的应用于临床样品的检测，可以同时处理96个样品，采用96孔吸附板可以特异性吸附结合DNA，经过纯化的DNA产量高、质量好，最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染，可直接用于PCR、Real-Time PCR、酶切和Southern Blot等实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| Buffer RCL | 2×500ml |
| Buffer GR | 2×50ml |
| Buffer GL | 2×50ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 2×52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 2×50ml |
| Buffer GE | 60ml |
| 蛋白酶K | 90 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 2×5ml |
| 吸附板及收集板 | 4套 |
| 收集板 | 4块 |
| 封板膜 | 16张 |
保存条件：Buffer RCL 2～8℃，其他组分室温(15～30℃)。
自备试剂：无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入9ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、实验前配制Buffer GL与蛋白酶K 的混合溶液，每200μl Buffer GL中加入20μl蛋白酶K ，该溶液最好现用现配，在使用前配制时间最多不超过1小时。
6、使用排枪时注意不要打湿96孔板孔口，以防止离心过程中有液体溅出产生交叉污染。
操作步骤：
1、样本处理：
a. 将200μl样本加到收集板中。不足200μl的样本，加Buffer GR补足至200μl。
b. 样本超过200μl，且不超过600μl时，将血液样本加到收集板中，加入样本2倍体积
的Buffer RCL，吹打20次混匀，加盖新的封板膜，3600 rpm(～1200×g)离心10分钟。揭去封板膜，吸弃上清(可留下100μl液体以避免吸到细胞沉淀)。再加入样本2倍体积的Buffer RCL，吹打10-20次混匀，加盖新的封板膜，3600 rpm离心10分钟。揭去封板膜，吸弃上清，剩余约200μl液体。
注意：
1)在收集板上做好标记，以方便后续实验对样品的辨识。
2)如果样品为鸟类的血液，建议样品用量少于10μl。
2、配制Buffer GL与蛋白酶K 的混合溶液：按照200μl Buffer GL中加入20μl的蛋白酶K 的比例配制，混匀。
3、向每孔中加入220μl Buffer GL与蛋白酶K 的混合溶液，吹打20次，混匀。加盖新的封板膜，短暂离心，使管壁和管盖上的液体集中到管底。
4、56℃孵育10分钟。
注意：孵育10分钟DNA的产量已经达到最大，继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
5、揭去封板膜，加入200μl无水乙醇，吹打20次，混匀。短暂离心，使管壁和管盖上的液体集中到管底。
6、将步骤5所得溶液全部加入到已装入收集板的吸附板中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。3600 rpm离心5分钟。倒掉收集板中的废液，将吸附板重新放回收集板中。
7、向吸附板每孔加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇)，3600 rpm离心5分钟。倒掉收集板中的废液，将吸附板重新放回收集板中。
8、向吸附板每孔加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，3600 rpm离心5分钟。倒掉收集板中的废液，将吸附板重新放回收集板中。
9、3600 rpm离心10分钟，倒掉收集板中废液。将吸附板置于室温数分钟以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附板中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
10、将吸附板置于一个新收集板中，向吸附板每孔中间部位悬空加入80-200μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，3600 rpm离心10分钟，收集DNA溶液，加盖新的封板膜。-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件：室温(15～30℃)。
更多有关北京现货血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)厂家的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
·50×TAE
编号：WE0216
规格：500ml
本品为50×Tris-乙酸缓冲液，是常用的核酸电泳缓冲液。
·Taq酶抗体
编号：WE0121
英文名称：Taq Antibody
规格：500U|2500U
本品是抗Taq酶鼠单克隆抗体，适用于Hot Start PCR。Taq Antibody与Taq酶结合后能抑制DNA聚合酶活性，进而能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。Taq Antibody在PCR反应最初的DNA变性步骤中变性，DNA聚合酶活性恢复，达到热启动效果。因此无需对Taq酶抗体进行特殊失活处理。
产品特点;
1、在37℃，可抑制>95%的聚合酶活性。
2、可提高PCR反应的特异性和灵敏性，包括复杂的人基因组DNA或cDNA模板，低拷贝的模板，多重PCR等。
3、PCR反应速度快于普通化学修饰的聚合酶。
活性定义：Taq Antibody与Taq DNA Polymerase混合，25℃孵育15 min后，将在37℃，30 min条件下抑制97%以上的1 U的Taq DNA Polymerase活性的Taq Antibody量定义为1U。
使用方法：
将Taq DNA Polymerase和Taq Antibody等体积混合，20-25℃下放置15 min冰上待用。
注意：通过实验，我们建议Taq Antibody和 Taq DNA Polymerase混合的分子数之比为13:1较为合适，实际操作中由于引物、目的产物或Taq DNA Polymerase不同，可以摸索一系列的比例以得到最合适的结果。
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增300 bp的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 |
| 10×PCR Buffer | 5μl |
| dNTP Mix，10μM each | 1μl |
| Forward Primer，10μM | 1μl |
| Reverse Primer，10μM | 1μl |
| Template DNA | 4μl |
| Taq酶和抗体的混合液 | 0.36μl |
| ddH2O | up to 50μl |
2、PCR反应条件，可以按照各种PCR用DNA Polymerase的常规PCR反应条件进行PCR反应。
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2 min |
储存条件：-20℃，避免反复冻融。
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