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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)
- 库存:
555
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)(国产,进口)用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)(国产,进口)
规格:3ml
编号:WE0316
英文名:Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本试剂盒根据生物素与链霉亲和素具有很强亲和力的原理设计。 在兔源或鼠源的一抗与相应的靶抗原结合后,本试剂盒中的生物素化抗兔/鼠通用型二抗与一抗特异结合;二抗上标记的生物素与标记了过氧化物酶(HRP)的链霉亲和素结合,形成抗原~特异性一抗~生物素化的二抗~HRP标记的链霉亲和素复合物。HRP可以催化底物显色,从而推断待检抗原的存在及分布。该试剂盒使用的生物素化二抗、SA-HRP,均采用优化的标记和纯化技术,使得其染色有更高灵敏度和更低的背景,适合于检测福尔马林固定石蜡包埋组织切片,以及冰冻切片、细胞爬片、新鲜制备的血涂片等。兔/鼠通用型Streptavidin-HRP试剂盒适合与百奥莱博即用型或浓缩型抗体配套使用。
试剂盒组成:
| 组份 | 3ml |
| Solution A(Endogenous Peroxydase Enzymes Blocking Buffer,White Solution) | 3ml |
| Solution B(Normal Goat Serum For Blocking,White Solution) | 3ml |
| Solution C(Goat anti-Rabbit/Mouse IgG,Biotin,Ready to Use,Yellow Solution) | 3ml |
| Solution D(Streptavidin-HRP,Ready to Use,Red Solution) | 3ml |
| DAB-A(20×) | 250μl |
| DAB-B(1×) | 5ml |
注意事项:
1、以每张切片加入1滴(约50μl)计算,3ml可做60张切片, 18ml可做360张切片。
2、对于内源性生物素含量比较丰富的组织,使用本试剂盒时最好用内源性生物素阻断剂进行封闭。
3、DAB工作液现配现用,配制好的工作液2~8℃避光1小时内有效。
4、实验过程中避免组织片干燥,因此各步孵育时工作液用量必需充足,保证完全覆盖组织样本,且尽量在湿盒中进行孵育。
5、为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件及试剂用量。
6、DAB为可疑致癌物,使用时请采取必要的防护措施。
7、本产品仅用于科研,不能用于人体反应或人体治疗。
操作步骤:
1、常规处理欲检测的石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等样本。
1)组织切片或细胞爬片染色前处理:
a. 石蜡切片
脱蜡水化:60ºC烤片1小时,二甲*脱蜡二次,每次5分钟;再依次浸入梯度乙醇(无水乙醇-无水乙醇-95%-85%-75%乙醇)和蒸馏水中各5分钟水化。
b. 冰冻切片和细胞爬片
切片(或爬片)浸于0.01 M pH7.4 PBS洗涤3次×5分钟。然后用0.1%Triton X-100覆盖组织(或细胞)浸润15分钟,0.01 M pH7.4 PBS洗涤2次×5分钟。
2)石蜡切片的抗原修复:绝大大多数情况下,石蜡组织切片用柠檬酸缓冲液高压修复都是适合的。
修复工作液配制:1 L去离子水中加入10ml柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液, 100×)(Cat#:WE0318),混匀即可。
修复过程:修复液加入高压锅内,待修复切片浸于修复液中(必需没过组织),盖上压力锅盖,加热至均匀喷汽,从喷汽开始计时,1~2分钟后压力锅离开热源,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水淋洗后,再用PBS(0.01 M pH7.4)漂洗2次,每次3分钟。
2、滴加适量Solution A白色溶液,即内源性过氧化物酶封闭液室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
3、滴加适量Solution B白色溶液,即封闭用正常羊血清工作液,室温孵育10分钟,甩干。
4、滴加适量一抗工作液(商品化即用型抗体或适当比例稀释的浓缩抗体),按实验要求孵育,然后PBS充分淋洗。
5、滴加适量Solution C黄色溶液,即生物素标记羊抗兔/鼠二抗工作液,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
6、滴加适量Solution D红色溶液,即HRP标记的链霉亲和素,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
7、DAB显色工作液配制:根据需要量,将DAB-A和DAB-B以1:19的体积比混匀后即为DAB显色工作液。也可选择每毫升试剂B中滴加1滴(约50μl)试剂A,混匀即可。
8、显色:加适量的DAB显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上即可显色,显色时间一般为1-5分钟。显微镜下观察控制显色时间,当达到最佳显色效果后,自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明,封片后可长期保存。
储存条件:2~8℃
欲了解更多通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)(国产,进口)的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·酵母基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0181
英文名称:Yeast Genomic DNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于从酵母样品中提取高纯度的总DNA,本品无需使用*酚、*仿等有机溶剂抽提,可获得最大为50 kb的DNA,同时对100 bp的DNA片段也能有效的回收。本试剂盒采用优化的缓冲液体系使裂解液中的DNA高效结合在硅胶膜上,而其他污染物可流过膜,使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度的DNA。提取的DNA可直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer GTL | 15ml |
| Buffer GL | 15ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 蛋白酶K | 25 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
| Lyticase Working Buffer | 30ml |
| Lyticase | 300μl |
| Glass Beads | 2g |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 |
保存条件:Lyticase -20℃,其他组分室温(15~30℃)。
自备试剂:无水乙醇,β-巯基乙醇。
产品特点
1、适用于从酵母样品中分离纯化高纯度总DNA。
2、无需有机溶剂提取以及乙醇沉淀,彻底去除污染物及下游反应抑制物,快速提取高品质DNA。
3、Lyticase酶与玻璃珠共同作用,有效破除酵母细胞壁。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。对于有些细胞壁较厚以及在培养阶段会产生大量代谢物的酵母,建议在生长早期收集样品。
3、Lyticase Working Buffer在使用前请加入β-巯基乙醇,使其终浓度为0.1%。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GTL和Buffer GL于65℃水浴重新溶解。
6、如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GL前加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
操作步骤:
1、取1-5ml酵母培养物(最多不超过5×107个细胞,一般对于酿酒酵母OD600=1.0时,相当于1-2×107细胞/ml),12000rpm(~13400×g)离心1分钟,收集菌体沉淀,尽量吸弃上清。
注意:菌液较多时,可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中。
2、酵母细胞壁的去除:向菌体中加入600μl Lyticase Working Buffer(使用前检查是否加入β-巯基乙醇,使其终浓度为0.1%),并加入5μl Lyticase,充分混匀。30℃处理30分钟。4000rpm(~1,500×g)离心10分钟,弃上清,收集沉淀。
注意:以上为5×107酵母细胞Lyticase用量,根据酵母的菌株和酵母细胞数量的不同,所用的Lyticase的浓度和孵育时间应该进行适当调整。
3、向沉淀中加入200μl Buffer GTL,加入40 mg玻璃珠(Glass Beads),涡旋5分钟。
4、加入20μl 蛋白酶K 混匀。55℃振荡水浴至细胞完全裂解。若无振荡水浴箱,温育期间每20-30分钟颠倒混匀一次。(一般不超过1小时细胞即可完全裂解)。
注意:如需去除RNA,在上述步骤完成后加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置5-10分钟。
5、12000rpm离心5分钟,小心吸取上清至新离心管中。
6、加入200μl Buffer GL,充分混匀。70℃孵育10分钟,其间颠倒混匀数次,12000rpm离心5分钟,将上清移到一个新的离心管中。
注意:若孵育后溶液未变清亮,说明细胞裂解不彻底,可能导致提取DNA量少和提取的DNA不纯。
7、加入200μl无水乙醇,充分颠倒混匀,此时可能会出现絮状沉淀。短暂离心,使管壁和管盖上的液体集中到管底。
8、将步骤7所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
10、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤10。
11、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟以彻底晾干。
12、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤10;若洗脱体积小于200μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)(国产,进口)关键词:鼠兔源一抗,通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗),WE0316,Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)
·新型植物基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0174
英文名称:NewPurify Plant Genomic DNA Extraction Kit
规格:50次|200次
本试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统,适合从各种不同的植物新鲜或冻存组织中提取基因组DNA,并可最大限度地去除植物组织中的杂质。本试剂盒无需使用酚/*仿抽提,操作安全。提取的基因组DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠,适用于PCR、荧光定量PCR、分子标记、文库构建等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer LP1 | 25ml | 100ml |
| Buffer LP2 | 10ml | 40ml |
| Buffer LP3(浓缩液) | 21ml | 84ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 75ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| RNase A(10 mg/ml) | 300μl | 1.25ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
自备试剂:无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer LP3和Buffer GW2中加入无水乙醇。使用前请检查Buffer LP1和Buffer LP2是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer LP1和Buffer LP2于56℃水浴重新溶解。
操作步骤:
1、取植物新鲜组织100 mg左右或干重组织约20 mg,加入液氮充分研磨。
2、将研磨后的粉末收集到离心管(自备)中,加入400μl Buffer LP1和6μl RNase A(10 mg/ml),涡旋振荡1分钟,室温放置10分钟,使其充分裂解。
注意:
1)使用涡旋振荡或移液器吹打,充分裂解组织,组织裂解不完全会影响最终的DNA得率。
2)请勿在使用前将Buffer LP1与RNase A混合。
3、加入130μl Buffer LP2,混匀,涡旋震荡1分钟。
4、12000rpm(~~13400×g)离心5分钟,将上清移至新的离心管(自备)中。
5、加入1.5倍体积的Buffer LP3(使用前检查是否已加入无水乙醇),充分混匀(如500μl滤液加入750μl Buffer LP3)。
注意:加入Buffer LP3后应立即混匀,可能会产生沉淀但不影响后续实验。
6、将上步所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如吸附膜呈现绿色,向吸附柱中加入500μl无水乙醇,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、重复步骤7.
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱放到一个新离心管(自备)中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤10;若洗脱体积小于100μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少DNA的总产量。如果所得DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE进行洗脱。
4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)(国产,进口)关键词:鼠兔源一抗,通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗),WE0316,Rabbit & Mouse HRP Kit(DAB)
比布里希猩红 Eugenol 4196-99-0
3-叔丁基-4-羟基*甲醚 ABEI 121-00-6
ARB13479 鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)Elisa分析 Chicken tumor necrosis factor α,tnf-α ELISA KIT
CYB166022-D 兔抗牛IgG-GOLD
烯效唑 Proteinase K 83657-22-1
ARB12599 大鼠基质细胞衍生因子1A(SDF-1A/CXCL12)含量测试 Rat stromal cell derived factor 1a,sdf-1a ELISA KIT
N-乙酰-L-蛋*酸 N-(r-L-Glutamyl)-1-naphthylamide 65-82-7
BL1154 质粒小量提取试剂盒
ARB10917 人抗磷脂酰丝*酸抗体(APSA)elisa检测 Human anti-phosphatidyl serine antibody,apsa ELISA KIT
PY02-123 *化*蔗糖琼脂 250克
ARB13772 菜豆凝集素(PHA)检测服务 Phaseolus vulgaris agglutinin,pha ELISA KIT
F050309 小鼠IgG2b抗体 Mouse IgG2b
2′-脱氧肌苷-5′-三磷酸三*盐 TMEDA 95648-77-4
ARB13016 小鼠吡*(代"啶")交联物(PY)含量检测 Mouse pyridinium crosslink/pyrilinks,py ELISA KIT
我公司生产供应销*(代"售")的蛋白质研究正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)(国产,进口)。
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