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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 供应商:
江蓝纯
- 规格:
20T/50T/100T
| 规格: | 20T | 产品价格: | ¥780.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥1380.0 |
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥2380.0 |
适用:测定哺乳动物组织、细胞caspase-4活性。
组成与储存:
1. 裂解缓冲液: 20 ml ,4 ºC
2. 反应缓冲液: 10 ml ,4 ºC
3. 2 mM Ac-LEVD-pNA底物: 0.5 ml,-20 ºC避光
4. 10 mM pNA标准品: 0.5 ml,-20 ºC避光
以上标出的量为100次检测,50次检测的试剂量减半。试剂常温运输。到达后按要求储存,1年内稳定。
所需仪器:
酶标仪与96孔酶标板;或可见光分光光度计配100μl容积的石英比色杯。
工作波长:大吸收波长405 nm,如不具备也可在400~450 nm范围内测定。
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文献和实验Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。1、Western blot 分析Procaspase-3的活化,以及活化
Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基(17KD)和两个小亚基(12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。但在细胞凋亡的晚期和死亡细胞,caspase-3的活性明显下降。1 Western blot 分析Procaspase-3的活化,以及活化
发光基团pNA游离出来,可通过酶标仪或分光光度计(λ=405nm 或400nm)测定其吸光值,通过测定吸光度来检测Caspase的活性。 二、自备试剂 PBS、蛋白定量试剂盒(Bradford法,选用) 三、实验操作指南 1.准备工作: A、 裂解液溶解后混匀,冰浴备用。 B、 裂解液工作液制备:每50 μL裂解液中加入0.5 μL DTT,冰浴备用。 2.样本处理: A、悬浮细胞 1) 诱导完成后的细胞,2000 rpm离心5 min,弃上清,收集细胞,PBS轻轻重悬细胞并计数
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