
细胞 周质腔 裂解液 天津兰瑞生物
- ¥180
- 兰瑞生物
- 天津
- LRD010
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
1年
- 供应商:
天津兰瑞生物技术有限公司
- 规格:
100ml
细胞周直腔裂解液A 5ml 1瓶
细胞周直腔裂解液B 5μL 1瓶
二、储存条件
该试剂置于室温(2-8℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于-20℃。
三、操作步骤
使用前,先明确所需裂解液的量,按照溶液A/溶液B=1000/1的比例混合,混合后立即使用。(例如:试验需裂解液5mL,分别吸取溶液A 5mL、溶液B 5μL,混合均匀后立即使用。)
基因工程菌经诱导培养后离心收集菌体,尽量将诱导培养基弃掉,菌体储存于-80℃,反复冻融2-3次后,加入诱导培养基体积1/20的预混好的本裂解液,充分重悬,冰上100rpm振荡1h,8000rpm 15-20min,收集上清即为目的蛋白,4℃保存。
四、注意事项
1、冰上振荡时尽量保证液体充分撞击管壁
2、离心时间根据菌体浓度而定。
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- 内容
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文献和实验师赠王老吉 在提取血中DNA时,细胞裂解液是指?平常的细胞裂解液,还是白细胞或者红细胞的裂解液? liushan8_9 白细胞或者红细胞的细胞膜应该是一样的吧。 yyf87255300 在提取外周血DNA时,成熟的红细胞内没有核,所以裂解的外周血的白细胞,我们实验室用的裂解液是三蒸水 zjubell 师赠王老吉 wrote:
/ml 牛胰蛋白酶抑制剂 ( aprotinin ),1μg/ml亮抑蛋白酶肽 ( leupeptin )裂解液缓冲液:10mM Tris-HCl(pH7.4),0.15M NaCl,5mM EDTA(pH8.0),1%Triton×100;使用前加5mM DTT,0.1mM PMSF异丙醇和5mM ε-氨基己酸。2. 裂解液的制备A. 制备细胞裂解液:①收集胰蛋白酶消化的细胞并离心,用PBS清洗。②用100μl RIPA缓冲液冰浴溶解沉淀10min(每500000个细胞20μl RIPA缓冲
洗涤细胞表面,以洗去瓶中残留的培养基,倒掉PBS ,重复以上操作2-3遍。在最后一次洗涤中尽可能吸干残留的PBS,尽量在冰上操作。 2、 向培养瓶中加入冷的RIPA 裂解缓冲液 (每75cm2 培养瓶加1ml). 然后用细胞刮子沿着瓶壁开始刮细胞,如果所需要刮的同种细胞有多瓶,则将第一瓶刮下的细胞液吸出转入下一瓶中继续刮 (由于处理后的细胞裂解液较粘稠,所以宜用直径大点的吸液管吸取)。 3、 吸出刮好的细胞裂解液置于14ml 离心管中 (置于冰上),然后重复
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