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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
APMSF Solution
- 库存:
267
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
APMSF溶液(10mg/mL)价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多APMSF溶液(10mg/mL)等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:APMSF溶液(10mg/mL)价格
品牌:百奥莱博
规格:1mL
产地:国产|进口
编号:BTN130535
本产品为浓度为10mg/mL的水溶液,其工作浓度为10-40μg/mL(10-20μM)。对脒*基甲磺酰*(4-Amidino Phenyl Methane Sulfonyl Fluoride,APMSF,p-APMSF)分子量为216.2,溶于水。可以特异性、不可逆抑制胰蛋白酶样丝*酸蛋白酶活性,如,胰蛋白酶、凝血酶、血浆酶等。毒性比PMSF低,不能抑制胰凝蛋白酶或乙酰胆碱酯酶。

储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期6个月。
更多有关APMSF溶液(10mg/mL)价格的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·PCR法DNA探针地高*(代"辛")标记试剂盒
编号:BTN90604C
英文名称:PCR DNA Labeling Kit(Digoxin)
规格:5次
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR,最后得到的PCR产物将带有标记,可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下:

产品特点:
1.一站式,本试剂盒提供经过优化的试剂,不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针,足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针,也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP,90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记),有效降低了空间阻碍,检测效果最佳。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 2×标记专用PCR Mix | 500μl |
| dNTP,2mM each | 50μl |
| 含Biotin-11-dUTP的dNTP | 25μL(仅B有) |
| 含DIG-11-dUTP的dNTP | 25μL(仅C有) |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
注:标记专用PCR Mix不含dNTP。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物,使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少,探针杂交信号强度减弱;过长则非特异杂交增加,背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵,所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记,而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率,即先制备非标记PCR产物,再以之为模板制备标记的PCR产物。
二:非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系:
| 成份 | 用量 |
| 2×标记专用PCR Mix | 25μl |
| dNTP,2mM each | 5μl |
| 自备的探针引物一(10pmol/μL) | 1μL(10μM) |
| 自备的探针引物二(10pmol/μL) | 1μL(10μM) |
| 自备的模板DNA | 1μg基因组DNA或1ng质粒DNA |
| 超纯水 | 补到50μL |
5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物,并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意:最好采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三:标记PCR反应(最好做一个不加标记的对照用于定量)
说明:在设置下面反应时,如果加一种引物,就得到单链标记的PCR产物;如果加两种引物,则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用,但杂交时变性的双链彼此还会复性,这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争,降低杂交效率,因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。
| 成份 | 样品 | 对照 |
| 2×标记专用PCR Mix | 25μl | 25μl |
| 含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP |
5μl | 不加 |
| dNTP,2mM | 不加 | 5μl |
| 双链标记:探针引物一和引物二 单链标记:探针引物一或引物二 |
每种50 pmol 一种50 pmol |
每种50 pmol 一种50 pmol |
| 上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng) |
10 ng | 10 ng |
| 超纯水 | 补到50μL | 补到50μL |
注意:本试剂盒提供的dNTP混合物中,标记底物与非标记底物的比例已经进过优化,如果自备标记dUTP,其与dTTP的最佳比例需要优化,标记不同,比例不同。对DIG-11-dUTP,最佳比例1:3;对BrdUTP,最佳比例为1:1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR,但需要进行下列修改:一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物,探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构,效果反而更好),所以可以增加循环数;二是延伸时间增加15秒,因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢;三是降低复性温度5-7℃,因为标记核苷酸参入到DNA后,新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量:取标记反应和对照反应的产物1-5μl,在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳,并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素,地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
注意:如果扩增的是单链DNA探针,其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的,而单链DNA没有碱基对,只有一些局部区域折叠形成的有限双链区,因此能结合的EB很少),因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度,可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化,直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化,请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。
APMSF溶液(10mg/mL)价格关键词:APMSF溶液,APMSF Solution,APMSF溶液(10mg/mL),BTN130535
·10%SDS溶液(不含RNase)
编号:BTN60702
英文名称:RNase-free SDS
规格:250mL
·双酶一管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)
编号:BTN91202
英文名称:Two-Enzyme One-Tube RT-PCR Kit
规格:50次
本产品是经过精心优化的、基于MMLV 逆转录酶和Taq DNA聚合酶的双酶一管式RT-PCR试剂盒,它含有除模版RNA和其专一性引物以外的所有RT-PCR试剂,包括MMLV 逆转录酶、Taq DNA聚合酶、RT-PCR缓冲液等,可以在同一反应管内完成RNA→cDNA→PCR反应(RT-PCR反应)。
产品特点:
1.一管式完成RT-PCR反应,避免样品交叉污染。
2. 即开即用,用户不需要单独准备RT-PCR所需的各种试剂。
3. 主要成分只有两个RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix,将加样步骤减少到最低,极大降低了加样误差,增加了可重复性。
4. 使用范围广,适用于从病毒RNA 到人RNA的各种RNA 模板。
5.高灵敏度,每个RT-PCR 体系最低可以检测200拷贝的RNA分子,可扩增的模版RNA的最长达2000nt。
6. 所得RT-PCR产物可以直接用于AT克隆。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 双酶一管式RT-PCR Buffer(2×) | 750μl |
| MMLV-Taq Mix | 100μl |
| RNase-free水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:所有离心管用前最好全部短暂离心几秒使管壁上溶液沉淀到管底。下面以一个30μL 体系的RT-PCR 为例,如果体积不同,各成分用量需要适当调节。
1.在一干净的无RNase的PCR管中,先加入下列成分:
| 成分 | 阴性对照 | 样品 |
| RNA模板(自备,分下面三种情况) | 无 | 见下 |
| 总RNA | 无 | 100-500ng |
| 或poly(A)mRNA | 无 | 10-500ng |
| 或体外转录得到的专一RNA | 无 | 0.01 pg-500ng |
| RNA特异性引物一(自备) | 终浓度300nM | 终浓度300nM |
| RNA特异性引物二(自备) | 终浓度300nM | 终浓度300nM |
| 探针(仅对Realtime RT-PCR) | 终浓度200nM | 终浓度200nM |
| RNase-free水 | 补到13μL | 补到13μL |
| 双酶一管式RT-PCR Buffer(2×) | 15μl | 15μl |
| MMLV-Taq Mix | 2μl | 2μl |
注:通常初次使用本试剂时,可用引物浓度300nM,探针浓度200nM进行实验,根据实验结果具体情况,在200~800nM 范围内调整引物浓度,在50~400nM 范围内调整探针浓度以达到最佳检测效果。引物、探针、待检样品的具体加量用户可以根据实际情况调整,同时增减DEPC 水用量,保证总反应体积不变即可。
2. 轻柔混合均匀后放入PCR 仪中进行RT-PCR。
3. 设定RT-PCR反应条件时,一般将RT的条件设定成42℃,30 钟,后接94℃变性5分钟,然后进入PCR循环(PCR参数将根据自备引物的Tm 值由用户自行决定注)、最后72℃,5分钟。对Realtime PCR,在复性步骤设置荧光检测,检测通道:FAM/HEX/VIC/ROX/CY5
4. RT-PCR结束后取5-10μL电泳检查。
注意事项:
1. 使用已校准的移液器,选用一次性PCR反应管、离心管、tip 头等进行样本处理及配液等操作,所有用具应不含DNA酶和RNA酶。
2.引物、探针设计过程中应尽可能避免发夹结构、二聚体等现象的发生,探针的位置尽可能靠近上游引物,PCR 目标片段最好小于200bp,尽可能在150bp以内。
3. 实验样品尽可能新鲜,提取过程应严防RNA酶污染及操作不当导致的RNA 降解。
4. 使用本产品时建议对RT-PCR扩增条件、引物浓度和样品用量进行调整,选择最适当的引物浓度、样品浓度和PCR扩增条件。
5. 本产品使用前应在室温充分融解,并用漩涡震荡器充分混匀。
6. 统一配液后分装以减少加样误差,每次实验应设置阴性对照。
7. 禁止标记PCR反应管,避免外源性荧光信号干扰。
8. PCR反应管中不能有气泡,否则会产生非特异的荧光信号。若有气泡,可先用手指将气泡弹破,然后再低速离心消除。
9. 实时荧光PCR 仪器连续进行实验时,最好间隔一小时以上再使用。
10. 实时荧光PCR 仪需经常校正和清洁载样板板孔。
11. 若使用Roch LightCyclerTM荧光PCR 仪,应将毛细管放在专门套管中,以便分装反应体系和加入待检样品。前述操作完毕应低速离心数秒再将毛细管垂直缓慢放入样品架,以免折断;若发生折断,应小心取出,用专用小毛刷擦拭干净后方可进行扩增。
12. 实验室应严格分区,避免PCR产物污染。
APMSF溶液(10mg/mL)价格关键词:APMSF溶液,APMSF Solution,APMSF溶液(10mg/mL),BTN130535
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文献和实验溶液 溶液是由两种或多种组分所组成的均匀体系。溶液对于科学研究、生命现象都具有重要意义。人的体液多是溶液,医疗用药亦多以溶液的形式或在体液内溶解后形成溶液而发挥其效应。可见溶液与医学的联系是极其密切的。所以,对于学习医学的人来说,了解有关溶液的物理和化学性质是非常必要的。 本章主要讨论有关溶液的概念、溶液的组成量度及渗透压。 第一节 溶解度 在一定条件(温度、压力)下,一定量的溶剂溶解溶质达饱和时,所含溶质的量称为溶解
/ml 羧苄青霉素 50mg/ml(溶于水) -20℃ 20μg/ml 60μg/ml 氯霉素 34mg/ml(溶于乙醇) -20℃ 25μg/ml 170μg/ml 卡那霉素 10mg/ml(溶于水) -20℃ 10μg/ml
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。 10mg
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