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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输及保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Stool DNA extraction kit
- 库存:
805
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应粪便DNA提取试剂盒现货供应,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:粪便DNA提取试剂盒现货供应
编号:BTN70601
英文名:Stool DNA extraction kit
产地:国产|进口
本试剂盒是专门用于从各种动物粪便中提取高质量的DNA的试剂。动物粪便中夹杂着许多脱落的肠道上皮细胞和肠道病原菌,因此通过PCR 对粪便DNA进行分析是诊断肠道遗传病(如大肠癌等)和传染病的重要材料,具有比常规的结肠镜检测和大便隐血实验更高的特异性和灵敏度。通过PCR 对粪便DNA进行分析还可以对濒危物种进行遗传分析。但粪便中成分复杂多变,常含有对PCR等后续反应有极大的抑制作用的不明成分,所以从粪便中提取高纯度的DNA十分棘手。
产品特点:
1. DNA 纯净,OD260/280一般都在1.8以上,得到的DNA样品原液或稀释液可以直接用于PCR等后续反应。
2. 每次微量提取可以处理100-300mg左右的样品,能得到5μg左右DNA,片段长度在30Kb左右。
3.可以同时提取到肠道上皮细胞和肠道病原菌的DNA。
4. 操作过程简单快速,只需要30分钟。
5.扩容性好,既可以在1.5mL离心管中微量提取,也可以在50mL离心管中进行大规模制备。
6. 试剂无毒无害,环保。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| 说明书 | 1份 |
注:溶液A和溶液B均为无色液体,溶液A 4℃保存时会产生沉淀,用前需要65℃溶化并混匀。
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
下面的操作步骤为1.5mL塑料离心管中进行的微量提取。如果样品用量增加,需要使用大的离心管,各提取试剂的用量也需要按比例增加。
1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,然后取0.5mL 加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。最好使用螺旋盖离心管。
2. 取0.1-0.3 g的新鲜或冷冻的动物粪便,加入到含预热溶液A的离心管中,震荡器上剧烈震荡5-10分钟。注意:一定要让管底的样品充分震荡起来。
3. 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
4. 13000-15000g室温离心3分钟,将上清转移到一新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒使之充分混匀,溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6. 将离心管冰浴至少5分钟。
7. 13000-15000g室温离心3分钟,转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
8. 加入0.2mL的*仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
9. 13000-15000g室温离心3分钟,小心转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
10. 重复第8 步和第9 步一次。
11. 将上清转移到新的1.5mL离心管时,不要超过0.5mL,否则没有空间加两倍体积的乙醇。如果有多余的可以弃之不用。
12. 加入2倍体积的乙醇(自备),上下颠倒30秒混匀,15000g离心5-10分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。注意:最好不要用异丙醇代替乙醇,否则不容易去除带色素的杂质。
13. 加入1mL 75%乙醇(自备),震荡数秒,13000-15000g室温离心3分钟,弃上清。
14. 重复上步清洗一次。注意:75%乙醇洗两次有助于去除PCR 抑制物。
15. 短暂离心,吸弃残留的75%乙醇(约50μL),室温晾干。注意:一定要去除残留的75%乙醇,否则会影响后续反应和电泳上样(样品会飘走)。
16. 加入30μl TE缓冲液溶解沉淀。注意:不知道样品DNA产率前最好不要加过多TE。如果DNA浓度高,可以再加TE 稀释。如果DNA 有颜色,可以使用柱式腐殖酸清除剂(BTN60801)纯化一次。
17. DNA 即可用于电泳、酶切和PCR等反应。最好用原液和稀释液对照做PCR,最好按PCR 终体积的1/10 加入随赠的PCR 抑制物清除剂(BTN60804)。
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粪便DNA提取试剂盒现货供应关键词:Stool DNA extraction kit,粪便DNA提取试剂盒,BTN70601
·Taq DNA连接酶
编号:BTN130621
英文名称:Taq DNA Ligase
规格:1000U
Taq DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成,使杂交到同一互补靶DNA链上的两条契合寡核苷酸链的5´-磷酸末端和3´-羟基末端通过磷酸二酯键连接。这个连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶DNA完全配对并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。在45℃~65℃范围内,Taq DNA连接酶均有活性。
产品特点:
1.耐热性好;
2.可在PCR和连接酶链式反应过程中掺入磷酸化寡核苷酸;
3.可用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测;
4.可通过 PCR扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位是指在50μL反应体系中,45℃反应条件下,15分钟能使50%的12bp粘性末端片段发生连接所需要的酶量。12bp粘性末端来自于BstEII消化1μg λDNA。
粪便DNA提取试剂盒现货供应关键词:Stool DNA extraction kit,粪便DNA提取试剂盒,BTN70601
·Denhardt溶液(同位素探针)
编号:BTN91104A
英文名称:Denhardt Solution
规格:250mL
本产品是最经典的、用于核酸膜杂交时降低膜对标记探针的非特异结合的试剂,早在Southern杂交出现前10年由Denhardt发明,该产品可用与Southern(含单拷贝基因)、Northern、非同位素杂交(B型规格),与硝酸纤维素膜、尼龙膜等各种常用的核酸杂交介质兼容。A和B分别适用于同位素和非同位素探针。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
·大肠杆菌OrigamiB(DE3)化学感受态细胞
编号:BTN120520
英文名称:E.coli OrigamiB(DE3) Chemical Competent Cell
规格:10*100μl
本产品是采用大肠杆菌Origami B(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达107。本感受态细胞具有卡那霉素和四环素抗性。
菌株基因型为:F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1 ahpC(DE3)gor522::Tn10trxB(KanR,TetR)。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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