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常温运输
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一年
- 英文名:
Magnetic beads binding with streptavidin
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204
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应链霉亲和素磁珠说明书,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:链霉亲和素磁珠说明书
品牌:百奥莱博
编号:BTN130521
英文名:Magnetic beads binding with streptavidin
规格:2mL
本产品是由磁性纳米颗粒与高纯度的链霉亲和素共价偶联而成。这种微球能用于捕获生物素标记的底物,如抗原、抗体和核酸等。链霉亲和素(streptavidin)与生物素(biotin)的结合是最著名的非共价生物交互作用之一,因此,这也是亲和层析法所使用的一种强大工具。生物分子可以与生物素轻松融合,而层析基质上固定的链霉亲和素配体可以与之结合,而且这种链霉亲和素-生物素相互作用具有较低的非特异亲和性,捕获所需的底物能够直接应用于后续实验。本产品可广泛应用于免疫学检测、核酸纯化、核酸固相杂交检测、细胞分选等分子生物学实验。
产品特点:
1. 对于生物素化样品的捕获、漂洗及检测等流程操作更加简便。
2. 体系经过优化,更易于大规模、多样品、自动化操作。
3. 磁珠浓度:1%磁珠含量;
固相载体:超顺磁性硅基磁珠;
磁珠粒径:1μm;
pH耐受范围:2-9。
4. 载样量(每毫克磁珠):﹥3000pmol游离生物素;﹥450pmol生物素标记的单链寡核苷酸;﹥20μg生物素化IgG。
5.缓冲液:10mM PBS,0.1% BSA,0.05% sodiu*(代"m") azide,0.1% Tween20。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 取适量磁珠(推荐每次取30μL-50μL 磁珠混悬液,用户可根据样品种类及需求调整使用量)于干净离心管中,通过磁力架磁分离后弃上清。
注:磁珠使用前请使用上样缓冲液淋洗磁珠3-5次,以保证磁珠的使用效果。
2. 加入待反应样品,室温振荡反应10-30分钟后(反应时间根据生物素化分子的大小及空间结构的复杂性可适当延长),置于磁力架上进行磁分离,弃上清,并用上样缓冲液重复淋洗3次。
3. 链霉亲和素和生物素的结合非常迅速,且结合后不受pH,温度,有机溶剂和其他变性剂的影响。下表列出了常用链霉亲和素和生物素的解离办法及效率(基于游离生物素,与偶联复合物的生物素数据有明显差异),用户也可根据自己样品的需求自行设定洗脱方式。
4. 洗脱后的样品客户可根据需求采用适当方法检测。
洗脱条件参照表:
| 洗脱温度和时间 | 洗脱溶液 | 洗脱效率 |
| 90℃ for 10min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 96.8% |
| 90℃ for 5min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 96.4% |
| 90℃ for 2min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 96.8% |
| 65℃ for 5min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 96.4% |
| 65℃ for 2min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 97.9% |
| 37℃ for 10min | 10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺 | 41.9% |
| 90℃ for 10min | H2O | 7.3% |
| 90℃ for 10min | 10mM EDTA pH8.2 | 52.0% |
| 90℃ for 10min | 95%甲酰胺 | 35.9% |
| 90℃ for 10min | 30mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺 | 95.5% |
| 90℃ for 10min | 80mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺 | 97.3% |
| 90℃ for 10min | 140mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺 | 95.4% |
使用举例:
利用链霉亲和素磁珠从总RNA中提取mRNA的方法
1. 取0.1-1mg的总RNA样品加入到无菌、无RNase的1.5ml离心管中,加入无菌去离子水至终体积为500μl(注:总RNA 量可低至50μg,但是在该条件下所提取得到的mRNA 常规电泳检测不到,需要采用RT-PCR进行微量检测)。
2. 将上步样品管于65℃温浴10min。
3. 加入3μl 生物素化的Oligo(dT)和13μl的20×SSC溶液到总RNA样品中,温和混匀,室温放置至完全冷却,这一步需要约10min左右。
4.预处理链霉亲和素磁珠:将链霉亲和素磁珠充分混匀后,取适量磁珠于1.5mL无菌、无RNase的离心管内,放在磁力架上,待磁液分离后,移除上清。加1mL 0.5× SSC 洗涤磁珠,放在磁力架上磁液分离,移除上清,重复两次。加100μl 0.5× SSC重悬链霉亲和素磁珠。
5. 将第3 步制备的总RNA 混合溶液加入到上步制备的已经洗涤好且重悬的链霉亲和素磁珠溶液中。
6.室温放置10min,期间每隔1-2min 轻柔混匀以防磁珠出现沉降现象。采用磁力架分离磁珠,小心移除上清,过程中不要触碰到磁珠,该步上清在确定mRNA已经结合并洗脱后再弃掉。
7. 加300μl 0.1×SSC溶液温和吹打或是轻弹洗涤磁珠,然后置于磁力架上分离磁珠,磁液分离后小心移除上清,重复三次,最后一步洗涤后尽可能移除所有上清液。
8. 加入100μl 无RNase 去离子水(洗脱液),温和吹打或轻弹离心管使磁珠和洗脱液充分混匀。65℃水浴2分钟。
9. 置于磁力架上分离磁珠,将上清转移到一个新的无RNase的离心管内,不要触碰到磁珠(注:如果在转移过程中将磁珠悬起,可将样品管置回磁力架上重新吸取上清)。
10. 回收洗脱液中的mRNA。
链霉亲和素磁珠提取生物素化IgG
1.预处理链霉亲和素磁珠:链霉亲和素磁珠的保存需要加入BSA以保持其活性,故在使用链霉亲和素磁珠之前要彻底除去磁珠储存缓冲液中的BSA、叠氮*和Tween20。使用前需用PBS缓冲液于30分钟之内清洗3次以使磁珠达到最佳使用效果。
注:在使用前必须彻底重悬链霉亲和素磁珠以保证最佳使用效果和重复性。如果磁珠出现结块现象请勿再继续使用。
2. 将生物素化的IgG 溶解于PBS,IgG浓度大于2mg/mL 较利于筛选。
3. 取100μl预处理过的链霉亲和素磁珠充分震荡混匀,置于磁力架上分离磁珠,去除上清,该过程尽量不要触碰到磁珠团。
4. 取500μl PBS 重悬磁珠,放于磁力架上,磁液分离后,移除上清,重复洗两次。PBS 重悬磁珠,使磁珠恢复到最初的浓度10mg/mL。
5. 将第2 步制备的IgG 加到磁珠管内,室温震荡反应30min。保持磁珠处于悬浮状态,以达到好的结合效率。反应结束后,置于磁力架上,磁液分离后,用移液器小心将上清移至一干净离心管内。注:该步上清可以用来检测未结合到链霉亲和素磁珠上的IgG浓度。
6. 加入1mL PBS溶液重悬淋洗磁珠,置于磁力架上,磁液分离后,移除上清,重复淋洗两次。
7. 选择合适的洗脱方式洗脱IgG。
关于链霉亲和素磁珠说明书的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·TBE电泳液,10×
编号:BTN90313
英文名称:10×TBE Buffer
规格:250mL
TBE Buffer全名为Tris-Borate-EDTA buffer。它主要用于DNA的琼脂糖电泳和DNA和RNA的PAGE电泳。跟TAE相比,其特点是含硼*(代"酸"),可能会影响连接等后续酶反应。硅胶模回收时,回收率比TAE低。缓冲能力强于TAE,可反复使用几次。PAGE电泳最好使用1×,琼脂糖电泳可以使用0.5×。线性双链DNA的泳动速度慢于TAE。最好不要使用含甘油的上样品液,因为甘油可使硼*(代"酸")多次解离,改变pH。
储存条件:常温运输及保存、有效期一年。长时间放置可能会出现沉淀。
·四氮唑蓝(NBT)
编号:BTN100832
英文名称:10×TBE Buffer
规格:250mg
NBT即四氮唑蓝,分子式为C40H30N10O6Cl2,分子量为817.6,CAS号为298-83-*(代"9")。本产品为黄色粉末,在水中的溶解度为10mg/mL,可以稳定保存1-2周。常和BCIP配成混合液,是碱性磷酸酶底物之一。
储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期一年。
·剥离硅烷
编号:BTN80935
英文名称:Repeling Silane
规格:200mL
本产品为一定浓度的二*二甲基硅烷(Dichlorodimethylsilane),其分子式为C2H6Cl2Si,分子量为129.06 ,CAS号为75-78-*(代"5")。主要用于制备PAGE胶时,处理其中一块玻璃板,使附着的凝胶易于剥离。本产品最好跟亲和硅烷结合使用。但本产品不能用于硅化玻璃器皿。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
链霉亲和素磁珠说明书关键词:链霉亲和素磁珠,BTN130521,Magnetic beads binding with streptavidin
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链霉亲和素磁珠说明书关键词:链霉亲和素磁珠,BTN130521,Magnetic beads binding with streptavidin
·DNA marker(λDNA/EcoR I)
编号:BTN90602D
英文名称:DNA ladder(λDNA/EcoR I)
规格:50次
本系列产品为传统的酶切分子量标准,由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后,加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知,每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。
每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5uL。
使用效果:
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
·抗凝血酶Ⅲ(10mg/mL)
编号:BTN130534
英文名称:Antithrombin III Solution
规格:1mL
本产品为抗凝血酶Ⅲ水溶液,浓度为10mg/mL,pH=7.0-9.0。工作浓度为1 Inh.U/mL。抗凝血酶Ⅲ(抗纤维蛋白酶Ⅲ,ATⅢ,antithrombin Ⅲ)是一种维生素K依赖的单链糖蛋白,分子量是65000。属丝*酸蛋白酶抑制剂,可以抑制血液凝固过程中的所有丝*酸蛋白酶(凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα等等)的活性,也可以抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶等。
活力单位定义:一个抑制单位Inh.U是指,在肝素存在下,ATⅢ灭活一个单位的25℃,pH8.1的凝血酶。
储存条件:低温运输,4℃一周内稳定。
北京百莱博科技有限公司是RNA纯化产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购链霉亲和素磁珠说明书。
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