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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输和-20℃保存、有效期一年。
- 保质期:
长期
- 英文名:
dGTP Solution(2.5mM)
- 库存:
374
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京dGTP溶液(2.5mM)现货供应由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多dGTP溶液(2.5mM)等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。
名称:北京dGTP溶液(2.5mM)现货供应
编号:BTN130914
产地:国产|进口
规格:2mL
英文名:dGTP Solution(2.5mM)
品牌:百奥莱博
dGTP分子式为C10H13N5O13P3Na3,分子量是507.2,消光系数为13.7×103 M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为253nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
想要了解更多关于北京dGTP溶液(2.5mM)现货供应的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·96孔板病毒RNA提取试剂盒(真空法)
编号:BTN131191
英文名称:Virus RNA extraction kit with 96-well plate(Vacuum method)
规格:1次
·96孔板血液DNA提取试剂盒(真空法)
编号:BTN131194
英文名称:96 Microwell Plate Blood DNA Extraction Kit
规格:1次
·CN/DAB底物套装
编号:BTN131113
英文名称:96 Microwell Plate Blood DNA Extraction Kit
规格:1套
结合DAB的高灵敏性和CN的易于拍照成像的特性。4-CN和DAB经常因为其各自独特的性能被混合在一起使用。本试剂盒具有极好的灵敏性,产生的深黑色沉淀易于拍照成像。CN/DAB底物在免疫印迹和斑点印迹应用中表现优秀。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期一年。
·T3体外转录试剂盒
编号:BTN91108
英文名称:T3 in vitro Transcription Kit
规格:50次
本试剂盒是基于沙门氏噬菌体T3 RNA聚合酶的RNA体外转录试剂盒,它利用含有T3启动子的模版DNA,以NTP为底物,从T3启动子下游开始合成与模板DNA中一条链互补的RNA,简单快速获得大量的RNA分子。
产品特点:
1. 即开即用,用户只需提供含T3启动子的DNA模板即可以进行体外转录实验,不需耍单独准备每一个成份。
2. 单溶液预配液,减少加样次数,避免了操作误差,增加了可重复性。
3. 模板DNA可以是线性化的质粒DNA,也可以是PCR扩增产物。
4.可以合成的RNA的最佳长度在20nt到5000nt之问。
5.产品配方经过精心优化,每μg DNA模板可以合成2-6μg RNA。
6. 得到的RNA可以用于RNA结构研究、核解生物化学、体外翻译、RNA-蛋白质相互作用、反义技术、SELEX技术和RNA干扰(RNAi)等实验。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 转录预配液(2×) | 0.5mL |
| 阳性对照DNA(1.3 Kb片段) | 20μL(10ng/μL) |
| T3 RNA聚合酶混合液 | 50μL |
| RNase-free水 | 1mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、制备DNA模板
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板,但是必须注意以下几点:
1)必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA,则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。
2)是需要转录的DNA序列的上游必须有T3启动子。如果模板是PCR产物,则可以在设计引物时将T3启动子序列(5´AATTAACCCTCACTAAAGG 3´)加上。如果是将DNA片段克隆到载体上,则需要选择有T3启动子的载体,并且克隆位点必须位于T3启动子下游。
3)是需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(如选择了Pst I来线性化质粒),则最好用T4 DNA聚合酶修平。
4)是必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A,因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染,所以在用作模板前,最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温,然后电泳检测RNA是否被降解,以此判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。
二、体外转录反应
1.在一个RNase-free的塑料离心管中,在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分:
| 成分 | 加入量 | 备注 |
| DNA模板 | xμl | 总量在50 ng-1μg(如果模板是PCR片段,建议用50ng左右;如果模板是质粒DNA,建议用1μg左右;如果用本产品提供的阳性对照,建议用4μL) |
| 转录预配液,2× | 10μl | 需室温时使用 |
| T3 RNA聚合酶混合液 | 1μl | 本成分还含其他促进剂,所以是混合物 |
| RNase-free水 | 补水到20μL |
注:此为20μL反应体系的用量,对其他体积的反应体系,各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针,则需要定做NTP分开而不是NTP预先混合的试剂盒。如果需要得到加帽RNA,则需要加入自备的加帽修饰核苷酸(本公司有各种加帽修饰核苷酸)。
2. 37℃保温1-2小时。注意:延长保温时间并不能提高产量。
3. 70℃加热10分钟灭活T3 RNA聚合酶。
4. 取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成 5-10μg的RNA。
5. 得到的RNA可以放-80℃保存。
若需进一步去除DNA模板,可参考下列操作步骤,但所用试剂需另行购买,本试剂盒不提供。
1.在体外转录结束后,在反应体系中加入3-5U自备的RNase-free DNase(BTN90903;3-5U/μL)。
2. 37℃保温15-30分钟。
3. 补水到100μL,
4. 用自备的等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5.在上清中加200μL自备的微量核酸沉淀剂(BTN50903;用前需要摇晃混匀),振荡后15000rpm离心3~5分钟,弃上清。
6. 加入1mL 75%乙醇,震荡10秒后15000rpm离心3~5分钟,弃上清。
7. 短暂离心数秒,用枪头吸弃上清。
8. 晾干半分钟,所得沉淀即去除DNA模板后的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。
疑难解答:
1、没有RNA产物。最常见原因是DNA模板有RNase污染,测试方法是用纯化的RNA跟模板DNA一起保温,再检测RNA是否降解。本试剂盒缓冲液和酶混合液中有RNase inhibitor,如果模板RNase污染严重,可能需要用户补加RNase inhibitor。
2、RNA产量低。最常见的原因是DNA模板序列。在转录序列的第一个和第二个碱基最好都是G,在前14个碱基内避免有U存在。
3、RNA长度比预期的短。可能是模板序列中有T3 RNA聚合酶的终止序列。可以改用SP6或T7体外转录试剂盒(启动子也必须改成SP6或T7启动子)。
4、RNA长度比预计的长。T3 RNA聚合酶跟Taq DNA聚合酶一样,有不依赖于模板的加尾功能,最多有一半的RNA可以带一个或两个碱基的尾巴。如果RNA长度比预计的长很多,使用的模板又是质粒DNA,则可能是质粒DNA线性化不彻底。
5、5´单磷酸还是三磷酸。如果使用GTP,则得到的RNA是三磷酸,体外转录时如果保温时间太长(如12小时),则有50%的三磷酸会变成单磷酸。如果在转录体系中加入GMP,则T3 RNA聚合酶将优先使用GMP,所得RNA产物中5´端是单磷酸的比例将大大增加。
北京dGTP溶液(2.5mM)现货供应关键词:BTN130914,2.5mM,dGTP溶液,dGTP溶液(2.5mM),dGTP Solution(2.5mM)
·dCTP溶液(2.5mM)
编号:BTN130915
英文名称:dCTP Solution(2.5mM)
规格:2mL
dCTP分子式为C9H13N3O13P3Na3,分子量是533.1,消光系数为9.1×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为271nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·96孔板病毒RNA提取试剂盒(离心法)
编号:BTN80922
英文名称:Virus RNA extraction kit with 96-well plate(Centrifugal method)
规格:1次|5次
dCTP分子式为C9H13N3O13P3Na3,分子量是533.1,消光系数为9.1×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为271nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·DNA marker(50-400bp)
编号:BTN111107
英文名称:DNA ladder(50-400bp)
规格:50次
本品由8条单一的、浓度已知的DNA片段组成,其大小分别是50、100、150、200、250、300、350、400bp,除250bp浓度为100ng/5μL外,其余片段的浓度均为为50ng/5μL,可用于琼脂糖电泳。由于含上样液,所以即开即用。由于每次上样总DNA含量已知,每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本产品电泳得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。每次加样量为5μl,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5uL。
使用效果:
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用2%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
北京dGTP溶液(2.5mM)现货供应关键词:BTN130914,2.5mM,dGTP溶液,dGTP溶液(2.5mM),dGTP Solution(2.5mM)
D-*甘*酸乙酯盐*(代"酸")盐 CAPSO sodiu*(代"m") salt 17609-48-2
ARB10522 人白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)含量测试 Human leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily b member 4,lilrb4 ELISA KIT
BTN130832 通用型MLPA试剂盒 Universal MLPA Kit
DL-半胱*酸盐*(代"酸")盐无水物 2-Methylindole 10318-18-0
莫能菌酸* CMS 22373-78-0
CYB164054 兔抗大鼠IgG(1:500~2000)-HRP
2-(4-叔丁基*(代"*"))-5-(4-联*(代"*")基)-1,3,4-噁唑 BMIMPF6 15082-28-7
ARB12267 大鼠多巴胺D1受体(D1R)代做ELISA实验 Rat dopamine d1 receptor,d1r ELISA KIT
ARB10608 人血红素氧合酶1(HO-1)检测服务 Human heme oxygenase 1,ho-1 ELISA KIT
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ARB12129 大鼠甲状旁腺素(PTH)elisa检测 Rat paRathormone ,pth ELISA KIT
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文献和实验一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法
组质粒中酶切回收所得目的基因OSsec27p,经煮沸变性10min后冰浴5min后按设计的顺序(见图2左侧)加到96孔板中。最后将玻片复印仪装入微孔板定位系统的相应位置,压下复印仪从96孔板中蘸取溶液。 点样:将玻片复印仪装入手动玻片定位系统,压下复印仪一次在尼龙膜上点下8个点,然后重新取样,调节手动玻片定位系统在同一张膜上垂直方向间隔4.5mm重复点样一次,两次点样共计16个点。同样的操作一共点3张膜,共6次重复48个点(见图2)。点样完成后将尼龙膜从玻片上取下,用紫外交联仪(CL-508.G
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