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20%PVP K30溶液(不含RNase)北京价格

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  • ¥180 - 2300
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN60605-QVD
  • 2025年07月15日
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      RNase-free PVP K30

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      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")20%PVP K30溶液(不含RNase)北京价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:20%PVP K30溶液(不含RNase)北京价格
    英文名:RNase-free PVP K30
    编号:BTN60605
    规格:250mL
    品牌:百奥莱博
    产地:国产|进口

    想要了解更多关于20%PVP K30溶液(不含RNase)北京价格的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
    *啶酮酸 Enzyme Stabilizer DPD 389-08-2
    α-*乙酸* Boc-D-Asp-OH 15165-79-4
    PY02-140  TTC琼脂基础  250克  
    葡聚糖凝胶LH-60 VBT
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    BL1212 抗酸染色液(试剂盒)
    ARB13555 兔子中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)含量测试 Rabbit neutrophil elastase,ne ELISA KIT
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    SJ0738 大鼠中性粒细胞分离液
    100bp DNA Ladder Ⅰ Uracil 1-β-D-arabinofuranoside
    BTN100936 人甲基化/非甲基化DNA标准品 Human Methylated/Non-methylated DNA Standard
    N-乙酰-L-缬*酸 TOPS sodiu*(代"m") salt 96-81-1
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    20%PVP K30溶液(不含RNase)北京价格关键词:20%PVP K30溶液(不含RNase),BTN60605,RNase-free PVP K30


    ·M13噬菌体单链基因组DNA提取试剂盒
    编号:BTN130952
    英文名称:M13 phage single chain genomic DNA extraction kit
    规格:50次

    ·随机引物法DNA探针标记试剂盒
    编号:BTN90603A
    英文名称:Random Primer DNA Labeling Kit
    规格:5次
    本试剂盒是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即用型DNA探针标记试剂盒,标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结合、在Klenow DNA聚合酶催化下,引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸三步组成,可用下面的示意图表示:
    随机引物法DNA探针标记试剂盒
    本产品对Feinberg和Vogelstein经典方法进行了改良。

    产品特点:
    1. 提供的标记反应液整合了除酶和模板外的所有成分,简化了反应加样步骤,提高了标记反应的可重复性。
    2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶,已标记DNA探针不会被酶降解。
    3.快速,最快1小时即可完成标记反应。
    4. 得到的DNA探针比活性高(如果是同位素,可以达到109cpm/μg DNA),检测灵敏度高。
    5. 所需模版DNA量少(只需要10ng以上即可),DNA可以是各种形状(线状和环状)的、也可以是单链或双链的,长度在100bp以上均可。
    6. 得到的探针长度在200-400nt之间,可以用于Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
    7. 提供三种标记选择,其中BTN90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标记,但需自备标记底物;BTN90603B和BTN90603C可分别用于生物素和地高*(代"辛")标记,不需自备标记底物。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    2×A型标记反应液(自备标记物型) 50μl(仅A型有)
    2×B型标记反应液(生物素型) 50μl(仅B型有)
    2×C型标记反应液(DIG型) 50μl(仅C型有)
    dATP,2mM 10μL(仅A型有)
    dTTP,2mM 10μL(仅A型有)
    dGTP,2mM 10μL(仅A型有)
    dCTP,2mM 10μL(仅A型有)
    Klenow exo-聚合酶(2U/μL) 5μl
    超纯水 1ml
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1.在一干净的硅化的塑料离心管中加入下列成分:
    成分 用量
    模板DNA 50-150ng
    2×标记反应液(ABC三种之一) 10μl
    超纯水 补水到15μl

    注意:非同位素标记物由于疏水性强,容易与常用的塑料离心管表面非特异性结合,所以一定要使用硅化的塑料离心管。模板DNA并非越多越好,因为模板会在杂交反应中跟标记的探针杂交,竞争性地抑制探针跟靶分子的杂交。
    2. 沸水浴5-10分钟,或在PCR仪上100℃加热5-10分钟使DNA模版充分变性,立即放冰上待用。注意:如果PCR仪器不能设置到100℃,99℃加热5分钟也可。
    3.高速离心数秒使所有液体集中在管底,根据试剂盒类型加入下列成份:
    试剂盒类型 成分及用量
    BTN90603A型 dATP、dGTP、dCTP各1μl(共3μL,浓度均为2mM)
    自备的2mM dTTP/标记dUTP混合物(见注)1μL
    1μl Klenow exo聚合酶
    BTN90603B型 1μl Klenow exo聚合酶
    4μl超纯水
    BTN90603C型 1μl Klenow exo聚合酶
    4μl超纯水

    注:上表中的dTTP/标记dUTP混合物中dTTP和标记的dUTP的总浓度为2mM(在20μL体系中混合液的终浓度为0.1mM,dTTP与生物素或DIG标记的dUTP的比例最好为65:35)。由于空间阻碍,并非标记生物素或DIG标记的dUTP越多灵敏度越高,一般dTTP与标记dUTP的比例在65:35为最佳。但如果使用自备的其他标记核苷酸,如fluorescein、hydroxycoumarin、resorufin和aminoallyl标记的dUTP,则用户需要自己摸索其与dTTP之间的最佳比例,如果使用32P标记的dUTP,则比活最好为3000Ci/mmol,浓度为好为10uCi/μL,并且不需要加入dTTP。
    4. 轻柔吹打混匀。如有液滴沾在管壁上,高速离心数秒使所有液体集中在管底。
    5. 37℃保温1-20小时。标记效率跟模版量和保温时间相关,具体见下表:
    模版DNA用量 1小时后探针合成量 20小时后探针合成量
    10ng 80ng 900ng
    30ng 150ng 1.35μg
    100ng 350ng 1.65μg
    300ng 750ng 2.2μg
    1μg 1.3μg 2.6μg
    3μg 1.6μng 2.6μg

    6. 加1μl自备的0.5M EDTA(pH8.0)终止反应,立即放冰上待用或放-20℃保存一年。用前需要加热100℃ 5分钟使DNA探针变性成单链,然后直接加入到杂交反应液中即可。如果电泳检测,标记产物将是弥散状态。
     注意:本方法标记核苷酸掺入率极高,因此可以不经纯化直接使用。如果需要纯化,注意不要用酚抽提法纯化非同位素(生物素、DIG和其他等)标记的DNA探针,因为这些标记分子疏水性强,能使标记的DNA进入疏水的有机相而丢失,但可以用乙醇沉淀和Sephadex G50回收(可另购非同位素探针柱式纯化试剂盒)。对比活高的同位素探针,由于其极其不稳定,因此应该立即使用,不要长久放置。


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