BTN131096型生物素化的碱性磷酸酶批发

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百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN131096型生物素化的碱性磷酸酶批发，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：BTN131096型生物素化的碱性磷酸酶批发
英文名：Biotin-AP
品牌：百奥莱博
编号：BTN131096
产地：国产|进口
规格：1mg
本产品为生物素标记的碱性磷酸酶，其灵敏性高，推荐用于利用亲和素、链亲和素或中性亲和素蛋白的三明治技术。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性单位定义：一个单位定义为在25℃每分钟在特定缓冲体系中将1.0μmol的对硝基酚磷酸盐水解需要的蛋白量。反应缓冲液为：0.1M 甘*酸，1.0mM ZnCl2，1.0mM MgCl2，6mM PNPP，pH10.4。

关于BTN131096型生物素化的碱性磷酸酶批发的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·随机引物法DNA探针标记试剂盒
编号：BTN90603A
英文名称：Random Primer DNA Labeling Kit
规格：5次
本试剂盒是基于Feinberg和Vogelstein发明的随机引物标记法而开发出来的即用型DNA探针标记试剂盒，标记过程由双链DNA热变性、随机引物与单链DNA结合、在Klenow DNA聚合酶催化下，引物的延伸合成DNA探针并掺入标记的核苷酸三步组成，可用下面的示意图表示：

本产品对Feinberg和Vogelstein经典方法进行了改良。

产品特点：
1. 提供的标记反应液整合了除酶和模板外的所有成分，简化了反应加样步骤，提高了标记反应的可重复性。
2. 使用无外切活性的Klenow exo- DNA聚合酶，已标记DNA探针不会被酶降解。
3.快速，最快1小时即可完成标记反应。
4. 得到的DNA探针比活性高(如果是同位素，可以达到109cpm/μg DNA)，检测灵敏度高。
5. 所需模版DNA量少(只需要10ng以上即可)，DNA可以是各种形状(线状和环状)的、也可以是单链或双链的，长度在100bp以上均可。
6. 得到的探针长度在200-400nt之间，可以用于Southern杂交、Northern杂交、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等。
7. 提供三种标记选择，其中BTN90603A可用于各种同位素标记和其他任何非同位素标记，但需自备标记底物；BTN90603B和BTN90603C可分别用于生物素和地高*(代"辛")标记，不需自备标记底物。

试剂盒组成：

 

成分	规格
2×A型标记反应液(自备标记物型)	50μl(仅A型有)
2×B型标记反应液(生物素型)	50μl(仅B型有)
2×C型标记反应液(DIG型)	50μl(仅C型有)
dATP,2mM	10μL(仅A型有)
dTTP,2mM	10μL(仅A型有)
dGTP,2mM	10μL(仅A型有)
dCTP,2mM	10μL(仅A型有)
Klenow exo-聚合酶(2U/μL)	5μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在一干净的硅化的塑料离心管中加入下列成分：

成分	用量
模板DNA	50-150ng
2×标记反应液(ABC三种之一)	10μl
超纯水	补水到15μl

注意：非同位素标记物由于疏水性强，容易与常用的塑料离心管表面非特异性结合，所以一定要使用硅化的塑料离心管。模板DNA并非越多越好，因为模板会在杂交反应中跟标记的探针杂交，竞争性地抑制探针跟靶分子的杂交。
2. 沸水浴5-10分钟，或在PCR仪上100℃加热5-10分钟使DNA模版充分变性，立即放冰上待用。注意：如果PCR仪器不能设置到100℃，99℃加热5分钟也可。
3.高速离心数秒使所有液体集中在管底，根据试剂盒类型加入下列成份：

试剂盒类型	成分及用量
BTN90603A型	dATP、dGTP、dCTP各1μl(共3μL，浓度均为2mM) 自备的2mM dTTP/标记dUTP混合物(见注)1μL 1μl Klenow exo聚合酶
BTN90603B型	1μl Klenow exo聚合酶 4μl超纯水
BTN90603C型	1μl Klenow exo聚合酶 4μl超纯水

注：上表中的dTTP/标记dUTP混合物中dTTP和标记的dUTP的总浓度为2mM(在20μL体系中混合液的终浓度为0.1mM，dTTP与生物素或DIG标记的dUTP的比例最好为65:35)。由于空间阻碍，并非标记生物素或DIG标记的dUTP越多灵敏度越高，一般dTTP与标记dUTP的比例在65：35为最佳。但如果使用自备的其他标记核苷酸，如fluorescein、hydroxycoumarin、resorufin和aminoallyl标记的dUTP，则用户需要自己摸索其与dTTP之间的最佳比例，如果使用32P标记的dUTP，则比活最好为3000Ci/mmol，浓度为好为10uCi/μL，并且不需要加入dTTP。
4. 轻柔吹打混匀。如有液滴沾在管壁上，高速离心数秒使所有液体集中在管底。
5. 37℃保温1-20小时。标记效率跟模版量和保温时间相关，具体见下表：

模版DNA用量	1小时后探针合成量	20小时后探针合成量
10ng	80ng	900ng
30ng	150ng	1.35μg
100ng	350ng	1.65μg
300ng	750ng	2.2μg
1μg	1.3μg	2.6μg
3μg	1.6μng	2.6μg

6. 加1μl自备的0.5M EDTA(pH8.0)终止反应，立即放冰上待用或放-20℃保存一年。用前需要加热100℃ 5分钟使DNA探针变性成单链，然后直接加入到杂交反应液中即可。如果电泳检测，标记产物将是弥散状态。
 注意：本方法标记核苷酸掺入率极高，因此可以不经纯化直接使用。如果需要纯化，注意不要用酚抽提法纯化非同位素(生物素、DIG和其他等)标记的DNA探针，因为这些标记分子疏水性强，能使标记的DNA进入疏水的有机相而丢失，但可以用乙醇沉淀和Sephadex G50回收(可另购非同位素探针柱式纯化试剂盒)。对比活高的同位素探针，由于其极其不稳定，因此应该立即使用，不要长久放置。


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·生物素化蛋白L
编号：BTN131101
英文名称：Biotin-Protein L
规格：0.5mg
本产品为生物素标记的蛋白L，可以结合含有特别kappa轻链的所有种类的IgG(IgG,IgM,IgA,IgE和IgD)，与kappa轻链结合而不干扰抗原的结合。其还可以结合单链抗体可变区基因片段(ScFv)。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·Tma核酸内切酶III
编号：BTN130637
英文名称：Tma Endonuclease III
规格：500U
该酶为核酸内切酶III(Nth)的热稳定同源蛋白。既有N-糖基化酶活性也有AP-裂解酶活性。N-糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶位点。AP-裂解酶活性随后对该位点进行切割。Tma核酸内切酶III识别DNA上的无碱基位点、5,6二羟基胸腺嘧啶和胸腺嘧啶乙二醇。其反应示意图如
下：


产品用途：
1．碱性析出；
2．碱解旋。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指在10μl缓冲液体系中，65℃条件下，1小时内能够切割1pmol含一个AP位点的60bp寡核苷酸双链所需要的酶量。
AP位点的创建方法如下：37℃条件下，用1单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理10pmol含单一尿嘧啶碱基的60bp寡核苷酸双链2分钟。


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·AMPPD
编号：BTN131143
规格：100mg
AMPPD的CAS号是122341-56-4。常用做碱性磷酸酶的化学发光底物，其发光的速度取决于碱磷酶的浓度。当碱磷酶偶合到杂交的探针时，便可以通过此系统检测到杂交分子的存在量。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。避免长时间暴露于光线下，请勿冷冻。

·人基因组DNA(男性)
编号：BTN131031
英文名称：Human Genomic DNA(Male)
规格：100μg
本产品为人基因组DNA，来源于多位匿名的捐献者，其中BTN131031为男性基因组DNA；BTN131032为女性基因组DNA。利用脉冲电场凝胶电泳测量，90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。。

储存条件：低温运输、4℃保存、有效期一年。

·乙酰胆碱酯酶染色试剂盒(亚铁*化铜法)
编号：BTN160681
英文名称：Acetyl cholinesterase Staining Solution Kit
规格：2×50mL
本产品的染色原理是乙酰胆碱酯酶水解碘化乙酰硫代胆碱，释放乙酸和硫代胆碱。硫代胆碱中的硫*基(-SH)把铁化*还原为亚铁化*，后者与铜离子结合形成不溶性的红棕色至深棕色的亚铁*化铜沉淀在酶活性部位而显示出来。

胆碱酯酶属于特异性酯酶，可分为两大类。一类是乙酰胆碱酯酶又称为真性胆碱酯酶，能水解乙酰胆碱，起到生理的调节作用；另一类为胆碱酯酶，又称假性胆碱酯酶，能水解胆碱的酯而不能水解乙酰胆碱酯。AChE 主要存在于神经元的胞质内、神经与肌肉接头处即所谓运动终板处；PsChE 主要存在于血浆、胰腺、唾液腺内。

产品特点：
➤ 操作简单、酯酶的扩散较少。
➤可用于观察中枢神经和周围神经纤维等疾病情况下的改变。
➤ 有机农药中毒时可使该酶受到抑制，酶的活性下降而呈阴性反应。

试剂盒组成：

成分	规格
成分A1	25mg
溶液A2	5ml
溶液A3	35ml
溶液A4	5ml
溶液A5	5ml
溶液A6	1ml
溶液B	50ml
溶液C	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，4℃避光保存(其中溶液A2 需常温保存，溶液A6 需-20℃避光保存)，有效期半年。

使用方法：
1．冰冻切片，厚6μm，不固定或置于遇冷的10%甲醛*固定液中固定10分钟。
2．蒸馏水洗 3次，每次1分钟。
3．配制溶液A 混合液：临用前，取A2 加入A1中，使后者完全溶解，得到A12 混合液。取适量的溶液A12 混合液、溶液A3、A4、A5、A6，按1：7：1：1：0.2 比例充分混匀，即可得到溶液A混合液，6小时内使用。
 注：如果想显示AChE和ChE，即无需区分AChE和ChE，无需加入溶液A6。
4．切片加入到预温的配制好的溶液A混合液中，37℃避光孵育1～3小时(一般不超过6小时)，至切片呈淡棕色时取出。
5．蒸馏水冲洗，镜下观察如活性部位仍较淡，可于蒸馏水洗后再进行孵育，至反应合适为止。
6．流水冲洗 5分钟。
7．滴加溶液B 浅染细胞核3～5分钟。
8．流水冲洗 10分钟。
9．常规脱蜡透明，中性树胶封固。
10．染色结果：AChE酶活性部位为红棕至深棕色，细胞核为蓝色。

阴性对照(可选步骤)
取配置好的溶液A混合液，按溶液A混合液:溶液C=50:1比例充分混匀得到溶液AC混合液。取相同切片加入溶液AC混合液中，其余操作同上，染色结果呈阴性反应。

注意事项：
1．本染色液适用于冰冻切片，同时应减少切片在室温暴露的时间。
2．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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