RecA蛋白优惠价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")RecA蛋白优惠价，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：RecA蛋白优惠价
编号：BTN130661
英文名：RecA Protein
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：200μg
RecA在基因重组中是不可缺少的，它参与DNA 修复和紫外线诱导的突变。RecA促进lexA抑制子、umuD蛋白和lambda抑制子的自裂解。切割LexA能使20多种基因不再受到抑制。体外研究证明，在ATP参与下，RecA促进单链DNA片断与同源双链DNA片断发生链置换。

产品特点：
1．电镜分析DNA结构；
2．D环突变；
3．用RecA蛋白包被的探针来进行文库筛选；
4．切割任意一个预先设计的位点；
5．RecA导全长cDNA克隆的亲合捕获。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

关于RecA蛋白优惠价的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒
编号：BTN80101
英文名称：One-tube virus RNA-DNA extraction kit
规格：50次
本试剂盒是整合一管式病毒DNA提取试剂盒和一管式病毒RNA提取试剂盒两产品而得，专门用于从血清(血浆)等液体样品中同时提取病毒DNA(如HBV DNA)和病毒RNA(如HCV RNA和HIV RNA)的产品。本产品灵敏度高，稳定性好，使用简单快捷，尤其适合于整合到临床PCR或RT-PCR 检测试剂盒中。

试剂盒特点：
1. 回收率高，可以达到90%以上，高于绝大部分基于离心柱的提取方法。可以跟QIAGEN的同类产品媲美。
2. 灵敏度高，通过PCR 检测到病毒DNA的最终灵敏度可以达到30 拷贝/mL样品，通过RT-PCR 检测到病毒RNA的最终灵敏度可以达到50 拷贝/mL样品。
3.一管式操作，减少了样品污染的可能。
4.一站式套装，除样品外客户不需要准备任何试剂，降低了实验误差。
5. 安全无毒，不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
6.处理量大，如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
7.与PCR、荧光PCR、RT-PCR、荧光RT-PCR等后续反应兼容。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	40ml
溶液C	50ml
溶液D	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，溶液A4℃保存，溶液B和溶液C室温保存，有效期一年。溶液B和溶液C具有挥发性，使用后需要将瓶盖拧紧。

使用方法：
1. 将0.1-0.2mL液体样品转移到1.5mL 旋盖离心管中。如果需要富集样品中的病毒，可以先将1.5mL液体样品转移到1.5mL 旋盖离心管中,然后4℃ 24,000 g离心60分钟，移弃1.3mL上清液后继续操作下一步的操作。
2. 加入0.6mL溶液A，盖上盖子后振荡3-5秒。
 注意:溶液A用前需37℃-65℃水浴融化并充分摇匀后方可使用。
3.室温静置10分钟。
4. 加入0.6mL溶液B，盖上盖子后振荡3-5秒。
5. 15000g室温离心15分钟。强烈建议在离心管管壁上用记号笔做简单标记以区别离心面和向心面。
6.小心移弃上清。注意不要触及管底的DNA和RNA沉淀。
7. 加入1.0mL溶液C，振荡数秒后15000g室温离心5分钟。注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
8. 移弃上清，注意不要触及管底的DNA和RNA沉淀。
9. 短暂离心数秒，注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
10.小心移弃残留上清(残留的溶液C会影响后续反应)。此时离心面的管壁上将有可见的膜状沉淀。
11. 加入100-200μl溶液D，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象。不要离心只取上清使用，因为不溶沉淀物中含有DNA和RNA，必须取混合液使用(哪怕很浑浊)。
12. 直接取适量样品用于PCR或RT-PCR，也可短期保存于-20℃或-80℃。

使用效果：
DNA病毒：

图注：用本产品和市场上某同类产品分别提取0.2mL HBV 阳性血浆(含1000拷贝/mL HBV)，DNA 溶于200μl溶液D中，取5μl进行荧光PCR(使用MJ Research的CHROMO4荧光PCR 仪)。红和绿线表示本产品，蓝线表示市场上某同类产品。
RNA病毒：

图注：用本产品和市场上某同类产品分别提取0.2mL HBV 阳性血浆(含1000拷贝/mL HBV)，DNA 溶于200μl溶液D中，取5μl进行荧光PCR(使用MJ Research的CHROMO4荧光PCR 仪)。红和绿线表示本产品，蓝线表示市场上某同类产品。
图注：用本产品和市场上进口Q公司同类产品分别提取0.2mL培养的B型流感病毒上清液(含1000 拷贝/mL 病毒)，RNA 溶于200μl溶液D中，取10μl进行荧光PCR(50μl 体系，使用MJ Research的CHROMO4荧光PCR 仪)。红线表示本产品，蓝线表示进口的Q公司同类产品。

疑难解答：
Q：样品中如果同时有RNA和DNA，DNA 会对RNA的RT-PCR 克隆产生干扰吗？
A：不会。病毒一般或者只含RNA，或者只含DNA，如果样品中正好同时含有DNA 病毒和RNA 病毒，但由于两者之间没有同源性，所以DNA 也不会干扰RNA的RT-PCR扩增。这跟组织细胞中提出的核酸样品不一样，因为后者的DNA和RNA是同源的，即任何RNA分子都有与之同源的DNA分子，所以如果同时存在，DNA 也会在RT-PCR时跟引物结合，产生扩增。干扰RT-PCR。


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·DNA甲基化修饰试剂盒
编号：BTN130301
英文名称：Embedded Bisulfite Modification Kit
规格：150次
亚硫*(代"酸")*盐修饰DNA时要求DNA必须在单链状态，反应还必须在低温进行，常规的修饰试剂盒由于是在液相进行，要在低温下让DNA不相互复性而保持单链状态非常棘手，所以常规修饰试剂盒的修饰效率一般都不高。此外，常规方法要切换反应液，有多次沉淀步骤，使得DNA的回收率一般都不超过50%。为克服这些缺点，本公司开发出了此升级产品。

产品特点：
1．用包埋的样品进行所有操作，免去所有沉淀和纯化步骤，极大简化了操作。
2．免去了DNA提取过程，所需实验材料比常规方法更少，最少几个细胞都可以，极大地节约了宝贵材料，尤其适用于珍稀材料。
3．包埋处理后，DNA在整个操作过程中都处于最适于修饰的单链状态，极大提高了修饰效率。
4．DNA包埋于包埋块中，切换反应液非常方便，而且DNA不会丢失，所以最终回收率都在90%以上。
5．适用于实体材料、悬浮细胞和纯化好的DNA样品。
6．本试剂盒足够制备150多个10μL包埋块(如果用纯化好的DNA)或25个10μL包埋块(如果用悬浮细胞)。

试剂盒组成：

成分	规格
包埋液	1.5ml
分子生物学级石蜡油	25ml
包埋块裂解液	12.5ml
蛋白酶K溶液(10mg/mL)	150μl
溶液A	30ml
溶液B成分一	2.3 g×5棕色瓶
溶液B成分二	110mg×5棕色管
TE缓冲液，pH8.0	125ml
说明书	1份

注: 包埋液用1.5mL旋盖离心管包装，溶液B成分一用5mL棕色瓶包装，溶液B成分二用1.5mL旋盖棕色管包装。

储存条件：低温运输、4℃保存、避免反复冻融，有效期一年。

使用方法：

一、准备试剂
1．在装有2.3g溶液B成分一干粉的瓶中加入3.9mL水和0.9mL溶液A，摇晃溶解得到4.8mL溶液B成分一。在装有110mg溶液B成分二干粉的离心管中加入1mL 50℃预热的超纯水，摇晃溶解，得到溶液B成分二。将0.6mL溶液B成分二加入到4.8mL溶液B成分一中，得到5.4mL溶液B，冰上放置待用。未用完的溶液B下次不得再使用。
2．每次实验前，将装有1.5mL包埋液离心管在沸水浴上放置数分钟直到变成溶液，然后放80℃待用。

二、对微量组织材料(如果材料足够，可先纯化DNA，再按第三方案进行)
1．用常规的胰酶消化法处理动物实体组织或培养细胞，得到浓度不超过60细胞/μL的单细胞PBS悬液。如果实验材料已经是单细胞悬浮液(如卵细胞)，则PBS洗涤后直接离心沉淀，再重悬在PBS中(浓度不超过60细胞/μL)。注：本试剂盒不含本步所需相关试剂。
2．在一个2mL离心管中加入3μL细胞悬液，再迅速滴加7μL在 80℃预热的包埋液。注：不需要吹打混匀以免混合液在抢头里面凝固。
3．加入500μL分子生物学级石蜡油，将离心管在沸冰浴中放置20分钟。
4．将离心管转移到冰上放置30分钟，低温下包埋液和细胞混合液将凝固成10μL的包埋块。
5．加入500μL包埋块裂解液和5μL Proteinase K溶液，37℃保温过夜。加入的溶液比重都比石蜡油大，将会自动沉降到石蜡油下层，不需离心。
6．吸弃包埋块之外的所有溶液(包括石蜡油)，用1mL TE缓冲液室温浸泡包埋块2次，每次15分钟。此步可去除残留包埋块裂解液。
7．酶切包埋块中的DNA：选定不识别PCR靶片段的内切酶(本试剂不提供该相关试剂)，再用100μL选定内切酶的1×缓冲室温液浸泡包埋块15分钟，吸弃缓冲液后再加入100μL选定内切酶的1×缓冲液和50U选定的内切酶，37℃保温2小时。
8．吸弃酶切反应液，再加入500μL新鲜配制的处理液A(配制方法：100μL溶液A+400μL超纯水)室温放置15分钟，重复此步一次。此时DNA将呈单链。
9．吸弃处理液A后，用1mL新鲜配制的处理液B(注：不是溶液B，配制方法：50μL溶液A+950μL超纯水)室温浸泡包埋块5分钟。
10．吸弃处理液B，加入750μL石蜡油，然后沸水浴20-30秒，使DNA单链彻底彼此分开。
11．奖离心管转移到冰上放置30分钟使包埋块重新凝固。
12．在离心管中加入1mL预冷的溶液B，溶液B将自动沉降到石蜡油下层。继续在冰上放置30分钟。此步用于修饰单链的DNA。
13．将离心管转移到50℃放置3.5小时。
14．吸弃溶液B，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
15．吸弃TE缓冲液，用500μL新鲜配制的处理液C(50μL溶液A+450μL超纯水)常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
16．吸弃处理液C，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块3次，每次10分钟.
17．吸弃TE缓冲液，所得包埋块可以在4℃保存数月待用，也可以用超纯水洗涤两次(每次15分钟)后直接用做100μL体系甲基化PCR的模板。

三、对纯化好的DNA
18．选用不识别PCR靶片段的合适内切酶酶切纯化的基因组DNA(本试剂不提供所需试剂)，总体积不超过20μL，基因组DNA不超过700 ng。
19．酶切结束后，沸水浴5-10分钟灭活内切酶并变性DNA。
20．冰上放置并短暂离心数秒后，再加入4μL溶液A，50℃保温15分钟。
21．迅速加入50μL在80℃预热的包埋液，用手指快速弹击管底混匀溶液并继续放80℃待用。不要吹打混匀以避免包埋液在移液枪头中凝固。
22．在一个新的2mL离心管中，加入1mL预冷的溶液B，再加上750μL石蜡油，并将离心管放冰上预冷。
23．迅速取80℃保温的混合液10μL，用在空中滴加的方式加到上步准备的预冷的离心管中，滴加的混合液遇冷将迅速在石蜡油中形成包埋块并自动沉入管底，得到1个包埋块。注意：不要将枪头浸入到预冷的溶液中，否则包埋液将迅速在枪头内凝固。如果包埋块没有沉到管底，可以用枪头将其拨到石蜡层下面的液相中。
24．再重复上步操作6次(步骤23)，共可以得到7个包埋块(约含100ng DNA)。
25．将离心管(含7个包埋块)继续放冰上30分钟进行修饰。
26．后续操作同第13-17步。


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