基因转染增强剂价格

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基因转染增强剂价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多基因转染增强剂等细胞及免疫学产品请联系我司咨询订购。

名称：基因转染增强剂价格
英文名：Hexadimethrine bromide
产地：国产|进口
规格：0.5mL
编号：BTN140621
聚凝胺Polybrene又名为*化己二甲铵、海美*铵，CAS号：28728-55-4。聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物，常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强转染效率。Polybrene 增强转染效率原理图如下：


产品特点：
1．Polybrene广泛应用于脂质体转染、逆转录病毒介导的基因转染及慢病毒介导的基因转染等实验，可以显著提高各种逆转录病毒、慢病毒及脂质体的转染效率。
2．Polybrene对某些细胞(如末端分化的神经元，DC细胞)毒性较大，初次应用建议先做毒性测试。
3．Polybrene还是一种有效的抗肝素剂(肝素拮抗剂)，常用来生产非特异性凝集的红细胞；还可用于蛋白测序，小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象；PVDF 膜上加入Polybrene能提高膜的亲和性。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

慢病毒感染举例：
1．第一天按实验需要将细胞铺板(比如24孔板)。细胞数以第2 天密度约50%为宜。37℃培养过夜。
2．第二天感染前，从-80℃冰箱取出病毒，冰浴融化，参考相关文献或者根据预实验得到的MOI 值用新鲜完全培养基将病毒稀释成所需浓度。
 注意：轻轻混匀，不要使用振荡器。
3．吸去细胞原有培养基，将按照MOI 稀释好的病毒液+培养基+ Polybrene(对于293细胞，终浓度6μg/mL)加入细胞中，轻轻摇匀。37℃培养过夜。
 注：病毒液-培养基-Polybrene 混合液，按如下操作制备混合液：
①添加完全培养基(60mm培养皿2mL，100mm培养皿3mL)，37℃预热；
②加入病毒轻轻混匀；
③加入Polybrene 至终浓度为2μg-12μg/mL。
轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。当MOI高于20时，建议客户添加Polybrene(终浓度2～12μg/mL，浓度因不同的细胞而异，具体的请参考相关文献)来提高病毒的感染效率。如果感染目的细胞是Jurkat，kasumi，NB4，H929，GBC-SD，MCF-7等，建议不要添加Polybrene；大部分原代细胞感染也不需要添加Polybrene，以上仅供参考。
4．感染48小时后，吸除含慢病毒的培养基，换为新鲜的培养基。
5．继续培养24～48小时后，根据需要收集细胞检测目的蛋白的表达。

质粒转染：
1．第一天按实验需要将细胞铺板(比如24孔板)。细胞数以第2 天密度约50%为宜。37℃培养过夜。
2．准备 DNA-培养基-Polybrene混合液。按如下操作制备混合液：
①添加完全培养基(60mm培养皿2mL，100mm培养皿3mL)，37℃预热；
②添加10ng～10μg质粒轻轻混匀；
③加入Polybrene 至终浓度为5μg-10μg/mL。
 轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。
3．去除培养基，在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液，在37℃孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h 轻柔混匀。
4．去除 DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution(15%DMSO in 1×HBSS)轻轻盖住细胞(60mm培养皿3mL，100mm培养皿4mL)。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s，使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。
5．立即去除DMSO shock solution，用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5mL培养液清洗，100mm培养皿每次用10mL培养液清洗。
6．加入完全培养基到细胞中，根据需要进行后续实验。
 稳定转化：去除生长培养基，按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
 瞬时表达：去除生长培养基，加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。

备注：Polybrene的使用浓度依据细胞种类，转染方法等影响，以下使用浓度仅作参考。
1．为提高腺病毒转染效率和LacZ转基因表达，使用6μg/mL Polybrene处理病毒载体后转入BHK-21细胞(MOI为100)，转染率提高到95%，没有用Polybrene处理的只有2.3%转染率。
2．在KSHV(Kaposi"s sarcoma-associated herpesvirus)纯化和转染实验中，浓缩的病毒与8μg/mL Polybrene加到BCBL-1细胞中37℃下孵育2h。
3．在逆转录病毒构建研究中，用v-rasHa 逆转录病毒转染角质细胞(Keratinocytes)后在含有4μg/mL Polybrene培养基中培养3天，病毒滴度为1×107 virus/mL，MOI 为1。
4．在shRNA编码的慢病毒载体的转染研究中，病毒上清中加入8μg/mL Polybrene，转染到HEK293细胞中。
5．在慢病毒shRNA转染研究中，将含有6μg/mL Polybrene的新鲜培养基加入到培养24h的RCC10细胞中，用慢病毒颗粒转染细胞。

更多有关基因转染增强剂价格的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·非酶多糖清除剂(RNA样品专用)
编号：BTN60204
英文名称：Non-enzymatic Polysaccharide Scavenger
规格：10mL
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有多糖(Polysaccharide，PS)污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前没有十分有效的方法去除这一污染。我公司开发的非酶法PS清除剂能够比较好的解决这一问题。

产品特点：
1.高效，能有效地去除总RNA中的PS污染,使RNA溶液不再粘稠。
2. 不含RNase污染，RNA分子完整性不会受到任何影响。
3.快速，全部操作在样品管中完成，只需要二十多分钟。
4. 稳定，本产品为非酶产品，可以常温运输和4℃长期保存。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将十分粘稠的总RNA样品用RNase-free水稀释到100-500μl左右，加入等体积的65℃预热10分钟后的PS Scavenger，振荡器上充分振荡1分钟。
2. 加入等体积的*仿，振荡器上充分振荡1分钟。
3. 12000～15000g离心2分钟，转移上清到一新的离心管中，交界处将有白膜样的多糖沉淀。
4. 加入0.1倍体积的3 M NaOAc(pH5.2)和两倍体积的无水乙醇，混匀后12000～15000g离心10-20分钟。小心弃上清。
5. 加入1mL 75%乙醇，振荡器上短暂振荡后12000～15000g离心2分钟，小心弃上清。
6. 短暂离心，用移液枪小心吸去残留液体后，加入适量RNase-free水或具有灭活残留RNase的液相RNase Scavenger。立即使用或-80℃保存。


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·超纯水
编号：BTN100935
英文名称：Ultrapure Water
规格：250mL
本品是指将水中的导电介质几乎全部去除，又将水中不离解的胶体物质、气体和有机物均去除至很低程度的水。可以用于各种分子生物学实验。

储存条件：常温运输和保存、有效期两年。

·EDTA溶液(RNase-Free)(0.5M,pH8.0)
编号：BTN60308
英文名称：Ultrapure Water
规格：250mL
本品是指将水中的导电介质几乎全部去除，又将水中不离解的胶体物质、气体和有机物均去除至很低程度的水。可以用于各种分子生物学实验。

储存条件：常温运输和保存、有效期两年。

·SuperTOPO-Kan平末端克隆试剂盒
编号：BTN160684-25K
英文名称：SuperTOPO Blunt Cloning Kit
规格：25次
本试剂盒是基于Topoisomerase能够在几秒钟之内高速连接DNA片段的原理开发的无背景克隆试剂盒，它使用了本公司通过定点突变改良的TOPO酶，连接效率比野生型更高。

产品特点：
1.高效快速，连接反应几乎在几秒钟内完成，连接率几乎达到100%。
2.适用于pfu、KOD等高保真聚合酶扩增的平末端片段的克隆。
3. 无杂带或引物二聚体的PCR扩增产物可以不经过纯化直接用于连接反应。
4. 零背景，无需IPTG-X-Gal蓝白斑筛选，故不需要IPTG-X-Gal培养基。
5. 本试剂盒按10μL标准反应体系，有25次和50次两种规格包装供选择。
6. 提供含Amp和Kan两种抗性的载体供选择(BTN160684-25A是含Amp抗性TOPO载体，BTN160684-25K是含Kan抗性TOPO载体)。

试剂盒组成：

 

成分	规格
SuperTOPO-Amp Blunt载体	25μl(BTN160684-25A)
SuperTOPO-Kan Blunt载体	25μl(BTN160684-25K)
连接缓冲液	25μl
M13F引物	50μl
M13R引物	50μl
超纯水	1ml
说明书	1份

注意：BTN160684-25A提供SuperTOPO-Amp Blunt载体，BTN160684-25K提供SuperTOPO-Kan Blunt载体。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. 如果是PCR 制备插入片段，所用引物不能磷酸化，使用pfu、KOD等产生平末端片段的高保真DNA聚合酶。为保证扩增产物的完整性，PCR循环结束后，再延伸5-10分钟，确保片段延伸完全。
2.电泳检测并相对定量PCR片段(跟DNA marker 比较)。根据插入片段长度和下表确定每次连接反应需要的最佳用量：

插入片段长度	最佳用量
100-1000bp	20-50 ng
1000-2000bp	50-100 ng
2000-5000bp	100-200 ng

3.在一个干净的塑料离心管中，室温下(不要放在冰上)设置如下连接反应体系：

成分	用量
纯化后的PCR产物	不超过8μl(详见注意事项)
SuperTOPO-Amp Blunt载体或 SuperTOPO-Kan Blunt载体	1μl
连接缓冲液	1μl
超纯水	补到10μL

注意：如果使用未经纯化的PCR产物，则需要加入量不能超过1μL，否则PCR 体系会干扰连接体系。
4. 轻柔吹打混匀后，短暂离心，常温(20-30℃)放置0-5分钟。如果在冬天室温低于20℃，建议使用25℃水浴或金属浴。注意：连接时间超过5分钟的话连接效率会降低。
5. 如果当天不转化，可以将离心管放-20℃保存。如果转化，则取5μL连接液加到50-100μL 刚刚融化的感受态细胞中，轻柔混匀。注意：本产品要求感受态细胞的转化效率不得低于5×10E7cfu/ug。
6. 如果片段长度小于2Kb，则不需要冰浴和热激，直接在离心管中加入500μL 不含抗菌素的SOC或LB培养基，然后取200μL涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μl左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-Amp)或Kan(对SuperTOPO-Kan)的培养皿上，37℃过夜培养。
7. 如果片段长度长于2Kb，则按常规转化方式，先冰浴2-30分钟，然后42℃热激30秒，冰上防放置2分钟，再在离心管中加入500μl 不含抗菌素的SOC或LB培养基，37℃ 250rpm培养60分钟，然后取200μL 涂盘。也可以先3000g离心2分钟后，弃掉大部分上清，只留约100μL左右，然后重悬细菌后全部涂盘在含Amp(对SuperTOPO-AmpBlunt载体)或Kan(对SuperTOPO-Kan Blunt载体)的培养皿上，37℃过夜培养。
8. 用M13F/M13R通用引物进行菌落PCR或直接测序来鉴定重组子。


基因转染增强剂价格关键词：28728-55-4,Hexadimethrine bromide,基因转染增强剂

F030436 胶体金标记山羊抗猪IgG抗体 Polyclonal Goat Anti-Pig IgG*GOLD
ARB11231 人细胞毒素(CTX)Elisa方法检测 Human cytotoxin,ctx ELISA KIT
没食子酸正丙酯 Acetoacetanilide 121-79-9
ARB10642 人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)代做ELISA实验 Human vascular endothelial cell growth factor d,vegf-d ELISA KIT
ARB10171 人T细胞特异性鸟苷三磷酸酶(Tgtp)尿液中含量检测 Human t-cell specific gtpase,tgtp ELISA KIT
ARB12078 大鼠内皮素1(ET-1)检测服务 Rat endothelin 1,et-1 ELISA KIT
BTN130872 SUMO 蛋白酶 SUMO Protease
ARB10174 人X-连锁迟发性脊椎骨骺发育不良(SEDL)elisa检测 Human x-linked spondyloepiphyseal dysplasia tarda,sedl ELISA KIT
PY02-352  假单胞菌琼脂基础培养/CN琼脂基础  250克  
002010 EDTA抗凝马血 100ml|500ml
BTN71002 凝固血液DNAOUT Blood Clot DNAOUT
SJ0235 DPBS
BTN3660 非冻型组织DNA保存液 Tissue DNALOCKER
ARB10782 人抗子宫内膜抗体(EMAb)代做ELISA实验 Human endometrium antibody,emab ELISA KIT
593-84-0 异硫"青"酸胍 Guanidine thiocyanate
KT202 HotStart Taq MasterMix
ARB13095 小鼠毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M1(M-AChRM1)ELISA检测服务 Mouse muscarinic acetylcholine receptor m1,m-achrm1 ELISA KIT
BTN91104 Denhardt溶液,50× Denhardt Solution,50×
F030839 BIOTIN标记山羊抗人IgG Fab抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG Fab*BIOTIN
BL0633 SP-琼脂糖凝胶HP SP Sepharose HP
PY02-288  MFC培养基  250克  
ARB13486 鸡促黄体激素(LH)elisa检测操作说明书 Chicken luteinizing hormone,lh ELISA KIT

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