pTK-CLuc 载体 分子生物学试剂

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名称：pTK-CLuc 载体 分子生物学试剂
编号：SV1653
规格：20μg
产地：国产|进口
克隆载体:
pCLuc-Basic 2 载体不含启动子；pCLuc Mini-TK 2 载体含有一小段启动子片段，来源:于单纯疱疹病毒（HSV）胸苷激酶，位于 CLuc 编码序列上游。将启动子或增强子克隆进入两种载体的多克隆位点（MCS），便可进行启动子和增强子的活性测试。
pTK-CLuc 载体含有单纯疱疹病毒（HSV）胸苷激酶启动子，用于组成型表达 CLuc。在该载体的 CLuc 终止密码子和多聚腺苷酸信号之间包含一段 MCS。被克隆进入 3´ UTR 的序列将成为 CLuc mRNA 的一部分。RNAi 或 miRNA 靶位点等序列可插入 CLuc 的3´ 非翻译区，以评价 RNAi 或 miRNA 的靶序列。
另外，所有的载体（pSV40-GLuc 对照质粒除外）均携带有一个新霉素（Neomycin）抗性标记，用以产生稳定的转染细胞系。
对照质粒:
pCMV-CLuc 2 对照质粒携带有一个组成型的巨细胞病毒（CMV）启动子，可在许多类型的细胞中启动高水平的表达。pCMV-CLuc 2 可以在单独转染实验或与其它报告载体联合使用中作为阳性对照。pCMV-CLuc 2 对照质粒也携带有一个新霉素（Neomycin）抗性标记，用以产生稳定的转染细胞系。
pSV40-CLuc 对照质粒在猿猴病毒 40（SV40）启动子控制下组成型表达 CLuc。可以作为转染实验中的阳性对照。该质粒不携带选择标记。
浓度:
500 μg/ml。

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·AatII限制性内切酶
编号：SV0001
英文名称：AatII Restriction Endonuclease
规格：2500U|500U|250U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 50%*
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:80℃ 20 分钟。
浓度:
20,000units/ml
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
如果反应缓冲液在 25℃ 条件下，pH 值不在 7.5 至 8.0 范围内，酶活性会降低。
*在该缓冲液中可能出现星号活性。

·Cas9 核酸酶，S. pyogenes
编号：SV1188
英文名称：AatII Restriction Endonuclease
规格：250 pmol|500 pmol|50pmol
特性:
dsDNA 位点特异性切割
合成生物学
基因组编辑
概述:
Cas9 核酸酶，S. pyogenes，是 RNA 介导的核酸酶，可以催化双链 DNA 的特异位点切割。其在PAM（Protospacer Adjacent Motif）上 NGG 处，靶序列的 3 个碱基内进行切割。PAM 序列的 NGG 必须连在靶点之后，位于与 sgRNA 互补的 DNA 的对链上。
来源:
重组 E. coli 菌株，其克隆有来自 Streptococcus pyogenes 的 Cas9 基因。
反应条件:
1X Cas9 核酸酶反应缓冲液，37℃ 温育。
热失活:65℃ 温育 20分钟
质保声明:
Cas9 核酸酶，S. pyogenes 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
浓度:
1,000 nM（M0386S/L），20 μM (M0386M)。


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·Amylose 树脂 High Flow
编号：SV1430
规格：100ml|15ml
概述:
Amylose 树脂是一种亲和基质，由直链淀粉和琼脂糖构成，用来分离与麦芽糖结合蛋白融合的目的蛋白。Amylose 树脂 High Flow 是一种硬度增强了的微珠，更适合于全自动亲和层析系统。
结合容量:
Amylose 树脂和 Amylose 树脂 High Flow 每毫升柱床体积可结合 6-8 mg MBP5-paramyosin-ΔSal 融合蛋白。

·K. lactis GG799 感受态细胞
编号：SV1408
规格：5次
特性:
可克隆和表达对大肠杆菌有毒性的基因
可同时表达多个基因
无需昂贵的抗生素或甲醇
易操作的实验步骤，适用于无酵母表达经验者
有吸引力的商业授权
pKLAC2 载体限制性酶切图谱请参见 351 页，序列信息请联系我们咨询 查询。
概述:
K. lactis 蛋白表达试剂盒提供了一种在乳酸克鲁维酵母（Kluyveromyces lactis）中表达目的基因的简便方法。目的基因克隆到 pKLAC 系列整合载体中，既可表达胞内蛋白，亦可表达分泌型蛋白。与其它酵母和细菌表达系统相比，K. lactis 蛋白表达系统有着诸多优点。首先，乳酸克鲁维酵母具有高培养密度及整合多拷贝质粒的能力，使其可成功制备大量的高表达蛋白质；其次，pKLAC1 系列载体使用强 LAC4 启动子，该启动子经修饰，在大肠杆菌中无背景表达，因此，可用于对大肠杆菌有毒性的基因表达；再有，试剂盒提供高效转化的 K. lactis 感受态细胞，使得该系统适用于需要大量转化子的实验，比如利用 cDNA 文库进行表达克隆；另外，酵母转化子的筛选不需要昂贵的抗生素，培养基中也不需要甲醇；最后，K. lactis 细胞表达的蛋白质可以进行翻译后修饰，因而可成为细菌表达系统的有用替代。
pKLAC2 属于通用表达载体。利用这些载体既可使重组蛋白在细胞内表达，也能通过与 K. lactis α-factor 的融合实现分泌表达。pKLAC2 的多克隆位点与 我公司其它表达系统相兼容。
GG799 是 K. lactis 蛋白表达试剂盒中提供的基础菌株。其特点是细胞生长密度与异源蛋白表达效率极高，GG799 细胞未经遗传修饰。
K. lactis 蛋白表达试剂盒包括:
- pKLAC2 载体和 pKLAC1-malE 对照质粒
- SacII
- 整合测序引物套装
- K. lactis GG799 感受态细胞和转化试剂
- 酵母碳基础培养基与乙酰胺溶液

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