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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
2年
- 库存:
大量
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 规格:
250 ml
甲醛-明胶包被液
产品名称: 甲醛-明胶包被液
产品及特点: 可用于包被玻片
成分及包装: 塑料瓶内包装,纸盒外包装,无使用手册。
运输及保存: 常温运输和保存,有效期2年。
甲醛-明胶包被液实验步骤1. 石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分钟(3×3’)。
2. 取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液,加入微波盒中,微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档微波处理10分钟,取出微波盒流水自然泠却,从缓冲液中取出玻片,先用蒸馏水冲洗两次,之后用PBS冲洗2×3’。(注:不是所有的抗体都需要微波修复的,视具体情况而定)
3. 每张切片加1滴3%H2O2,室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3×3’。
4. 除去PBS液,每张切片加1滴相应的第一抗体(相应稀释倍数),室温下孵育2小时。
5. PBS冲洗3×5’。除去PBS液,每张切片加1滴聚合物增强剂,室温下孵育20分钟。PBS冲洗3×3’。
6. 除去PBS液,每张切片加1滴酶标抗鼠/兔聚合物,室温下孵育30分钟。PBS冲洗3×5’。
7. 除去PBS液,每张切片加1滴新鲜配制的DAB液(二氨基联苯胺),显微镜下观察5分钟。
8. 苏木素复染,0.1%HCl分化,自来水冲洗,蓝化,切片经梯度酒精脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封固,晾干后观察。
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其他
一、甲醛-明胶包被液特点
1. 在切片加上一抗后,第二抗体标记多聚螯合物酶(HRP)的复合物与一抗结合,在多聚螯合物上有大量的HRP分子,使抗原信号有显著的放大,其敏感性较SABC、SP法高。
2. 由于多聚物在体内不存在,又不使用生物素,从而避免了由于生物素引起的非特异性背景染色,背景比SABC、SP法清晰。
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文献和实验RNA的完整性可以通过琼脂糖变性电泳分析检测,而含量则通过紫外分光光度计确定。常见的变性电泳有甲醛变性电泳,戊二醛变性电泳等。甲醛变性电泳检测RNA完整性一、材料、试剂和仪器1 材料: 植物总RNA 5-10μg2 试剂:1)加样运载缓冲液(Loading buffer),50% 甘油,1mmol/L EDTA (pH 8.0),0.25%溴酚蓝,25%二甲苯氰FF2)10×TAE Buffer3)5×甲醛凝胶电泳缓冲液:,0.1mol/L MOPs (pH7.0),40mmol/L乙酸
即水饱和的溴酚蓝液。在15ml灭菌离心管中,依次加入以下各种成分:4.0ml 10 × FA buffer3.1ml 甲酰胺2.0ml 100%的甘油720ul 37%的甲醛80ul0.5M的 EDTA (PH 8.0)16ul 水饱和的溴酚蓝100ul DEPC水混匀,分装,-20℃保存,常用放4℃保存。5、1×甲醛变性胶电泳缓冲液(1×running buffer):20 ml 10×FA gel buffer,4.0 ml 37%的甲醛,176 ml水,放入电泳槽中使用,一般在3次电泳结束后需
浸泡固定2~24h。另外,该固定剂较为温和,适于组织标本的较长期保存。2、4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠试剂:A液:多聚甲醛40g蒸馏水 400mlB液:Na2HPO4•2H2O16.88g蒸馏水 300mlC液:NaOH 3.86g蒸馏水 200m配制方法:A液最好在500ml的三角烧瓶中配制(方法同前),至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。注意,在溶解多聚甲醛时,要尽量避免吸入气体或溅入眼内。B液和C液配制好后,将B液倒入C液中,混合后再加入A液,以1n NaOH或1N HCl 将pH调至
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