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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
江蓝纯
- 规格:
0.2ml
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| A0303 | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 0.2ml | 203.00元 |
本辣根过氧化物酶标记Streptavidin(HRP-labeled Streptavidin)也称HRP-Streptavidin、Streptavidin-HRP或辣根过氧化物酶标记链霉亲和素,为进口分装,可以用于生物素(Biotin)标记的抗体、核酸、蛋白或其它生物素标记分子的检测。具体用途包括Western、ELISA、免疫组化或免疫细胞化学、原位杂交、Southern、Northern、EMSA等。
本HRP-Streptavidin用高纯度的Streptavidin和超纯的辣根过氧化物酶交联而成,确保产生低的本底和的灵敏度。本产品的浓度为1mg/ml。
Streptavidin的分子量为66kD,可以高度特异性地和生物素(Biotin)结合。Streptavidin和生物素的亲和常数为
Kd=10-15M。Streptavidin是一个4聚体蛋白,可以同时结合4个生物素分子。Streptavidin的中文名为链霉亲和素,从Streptomyces adidinii中纯化获得,和鸡蛋清来源的Avidin(亲和素)在空间结构以及与生物素的亲和力方面具有高度的相似性。和Avidin不同的是,Streptavidin是一种非糖基化蛋白,并且基本不带电荷。Avidin的pI=~10.5,在中性pH条件下呈碱性。由于Streptavidin和Avidin相比在中性条件下不带电荷,因此Streptavidin的非特异性结合比Avidin低很多,这样检测时的非特异性背景就低很多。因此目前在生物素检测时通常使用Streptavidin替代Avidin。
辣根过氧化物酶即horseradish peroxidase(HRP),可以在Western、EMSA、Southern或Northern等检测时催化ECL类试剂(如ECL、BeyoECL等)产生化学发光,可以在ELISA时催化TMB产生蓝色,也可以在免疫组化、免疫细胞化学或Western blot检测时催化DAB产生棕色沉淀。
本辣根过氧化物酶标记Streptavidin用于各种常规用途的推荐稀释比例参考下表,实际实验操作过程中需根据具体情况适当调节辣根过氧化物酶标记Streptavidin的稀释比例。对于Western,推荐的稀释范围为1:2000-10000。
| WB | IHC/IC/ISH | ELISA | Southern/Northern | EMSA |
| 1:2000-10000 | 1:200-500 | 1:2000-10000 | 1:2000-5000 | 1:2000-5000 |
WB, Western blot; IHC, Immunohistochemistry; IC, Immunocytochemistry; ISH, in situ hybridization.
本产品如果用于常规的Western检测,以每次检测需10毫升1:2000稀释的本产品计,可以检测40次。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| A0303 | 辣根过氧化物酶标记Streptavidin | 0.2ml |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
叠氮钠会抑制辣根过氧化物酶的活性,在含有辣根过氧化物酶的溶液中不可加入叠氮钠。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验1. 8 mg 辣根过氧化物酶放入1 ml玻璃瓶,加入1 ml双蒸水溶解,液体呈棕色。 2. 放入一个磁力搅拌子,电磁搅拌同时逐滴缓缓加入新配制的 NaIO4 0.2 ml,室温下继续搅拌40 min,液体呈现草绿色。 3. 将全部溶液用滴管装入反复用去离子水冲洗的透析袋中,4 oC 对1 mM pH 4.4的NaAc透析过夜,中间换液3-4次,每次300 ml,溶液最终呈浅棕色。 4.
差异。如以2,2’-联氮-双-[3-乙基苯并噻唑啉]-6-磺酸(ABTS)为氢供体,则只能保护20%的酶活性,而以邻联茴香胺(ODA)为氢供体时,酶活性的保护提高至90%。HRP之所以是迄今为止在ELISA中应用最为广泛的标记用酶,主要是因为其一方面易于提取,价格相对低廉;另一方面性质稳定,耐热及有机溶剂的作用,与抗原或抗体偶联后,活性很少受损失。
辣根过氧化物酶 horseradish peroxidase
缩写为FRP.为过氧化物酶之一种,含于辣根( horseradish)中。 1941年 F· Thcorell曾提取其结晶。将之吸入细胞或注入之后,以 3, 3′ -二氨基联苯( 3, 3′- diaminobenzidine)为底物进行作用时,在光学或电子显微镜下可以看到一定的标记。最早为 W. Straus( 1959)曾用以鉴别吞噬小体 Ph-agosome. K. Kristensson和 G. Olsson,( 1974)在对利用轴突内逆行运输的神经元、轴突分支的着染,并而用于
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