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辣根过氧化物酶标记Streptavidin

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  • 江蓝纯
  • A0303
  • 2025年07月12日
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      江蓝纯

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      0.2ml

    产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
    A0303 辣根过氧化物酶标记Streptavidin 0.2ml 203.00元

          本辣根过氧化物酶标记Streptavidin(HRP-labeled Streptavidin)也称HRP-Streptavidin、Streptavidin-HRP或辣根过氧化物酶标记链霉亲和素,为进口分装,可以用于生物素(Biotin)标记的抗体、核酸、蛋白或其它生物素标记分子的检测。具体用途包括Western、ELISA、免疫组化或免疫细胞化学、原位杂交、Southern、Northern、EMSA等。
          本HRP-Streptavidin用高纯度的Streptavidin和超纯的辣根过氧化物酶交联而成,确保产生低的本底和的灵敏度。本产品的浓度为1mg/ml。
          Streptavidin的分子量为66kD,可以高度特异性地和生物素(Biotin)结合。Streptavidin和生物素的亲和常数为
    Kd=10-15M。Streptavidin是一个4聚体蛋白,可以同时结合4个生物素分子。Streptavidin的中文名为链霉亲和素,从Streptomyces adidinii中纯化获得,和鸡蛋清来源的Avidin(亲和素)在空间结构以及与生物素的亲和力方面具有高度的相似性。和Avidin不同的是,Streptavidin是一种非糖基化蛋白,并且基本不带电荷。Avidin的pI=~10.5,在中性pH条件下呈碱性。由于Streptavidin和Avidin相比在中性条件下不带电荷,因此Streptavidin的非特异性结合比Avidin低很多,这样检测时的非特异性背景就低很多。因此目前在生物素检测时通常使用Streptavidin替代Avidin。
          辣根过氧化物酶即horseradish peroxidase(HRP),可以在Western、EMSA、Southern或Northern等检测时催化ECL类试剂(如ECL、BeyoECL等)产生化学发光,可以在ELISA时催化TMB产生蓝色,也可以在免疫组化、免疫细胞化学或Western blot检测时催化DAB产生棕色沉淀。
          本辣根过氧化物酶标记Streptavidin用于各种常规用途的推荐稀释比例参考下表,实际实验操作过程中需根据具体情况适当调节辣根过氧化物酶标记Streptavidin的稀释比例。对于Western,推荐的稀释范围为1:2000-10000。

    WB IHC/IC/ISH ELISA Southern/Northern EMSA
    1:2000-10000 1:200-500 1:2000-10000 1:2000-5000 1:2000-5000

          WB, Western blot; IHC, Immunohistochemistry; IC, Immunocytochemistry; ISH, in situ hybridization.
          本产品如果用于常规的Western检测,以每次检测需10毫升1:2000稀释的本产品计,可以检测40次。
    包装清单:

    产品编号 产品名称 包装
    A0303 辣根过氧化物酶标记Streptavidin 0.2ml
    说明书 1份

    保存条件:
          -20℃保存,一年有效。
    注意事项:
          叠氮钠会抑制辣根过氧化物酶的活性,在含有辣根过氧化物酶的溶液中不可加入叠氮钠。
          本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
          为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

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    • HRP (辣根过氧化物酶) 标记抗体流程

      1.         8 mg 辣根过氧化物酶放入1 ml玻璃瓶,加入1 ml双蒸水溶解,液体呈棕色。 2.         放入一个磁力搅拌子,电磁搅拌同时逐滴缓缓加入新配制的 NaIO4 0.2 ml,室温下继续搅拌40 min,液体呈现草绿色。 3.         将全部溶液用滴管装入反复用去离子水冲洗的透析袋中,4 oC 对1  mM pH 4.4的NaAc透析过夜,中间换液3-4次,每次300 ml,溶液最终呈浅棕色。 4.        

    • 辣根过氧化物酶(HRP)

      差异。如以2,2’-联氮-双-[3-乙基苯并噻唑啉]-6-磺酸(ABTS)为氢供体,则只能保护20%的酶活性,而以邻联茴香胺(ODA)为氢供体时,酶活性的保护提高至90%。HRP之所以是迄今为止在ELISA中应用最为广泛的标记用酶,主要是因为其一方面易于提取,价格相对低廉;另一方面性质稳定,耐热及有机溶剂的作用,与抗原或抗体偶联后,活性很少受损失。

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