Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒供应

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒供应，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒供应
规格：100T|50T
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：KFS208
凋亡早期的重要特征之一是半胱*酸特异性蛋白酶——caspase家族蛋白的活性激活。这一类酶可以参与到一系列的生化反应中，响应凋亡早期信号并导致相应的蛋白底物剪切，继而引发细胞解体。目的底物可识别的序列包含天门冬*酸残基，剪切发生在序列的羰基段。

Caspase3/7活细胞荧光实时法检测试剂盒采用新型的荧光底物为原料，可以检测凋亡细胞中激活的caspase3/7.这种具有膜亲和型的检测试剂盒由一个4*基的小肽（DEVD）和一种核酸结合染料。凋亡发生时，caspase3/7蛋白被激活，从而剪切caspase3/7识别序列DEVD肽段。剪切底物后，游离的核酸染料与DNA结合，从而发出亮绿色荧光信号。

操作步骤
1.1 以合适的培养基悬浮细胞或贴壁细胞，加入合适的化合物或药物，刺激细胞诱导凋亡。
1.2 去除药物或化合物，以新鲜培养基洗涤细胞2-3次，更换新鲜培养基后，以1μL/mL的量加入caspase3/7检测液，使得caspase3/7检测试剂工作液浓度为1μM。（注意： Caspase3/7 检测试剂工作液浓度为0.5μM~2μM，您根据细胞量以及培养液的体积进行调整优化。）
1.3 37℃，避光孵育30min，或室温孵育45-60min。
1.4 荧光显微镜观察拍照或荧光光度计读数。

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HC0177 PE手套
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·Ki67细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)
编号：KFS336
英文名称：Ki67 cell proliferation Detection Kit
规格：20T
Ki67 蛋白是细胞周期相关的一种核蛋白，主要表达于细胞增殖分裂的各个时期（G1、S、G2 和M 期），但是在静息的细胞（G0 期）中不表达。Ki67 常用于检测肿瘤细胞的生长指数（免疫组化法利用计算细胞总数中的Ki67 阳性细胞数所占比例得到Ki67 指数）。

Ki67 通常通过标记抗Ki67 的抗体（FITC 绿色荧光）和DNA 染料碘化丙啶（PI，红色）而利用流式细胞仪检测来实现对细胞周期的检测。

操作方法
1. 在最适的环境下培养细胞。
2. 除去培养液，用PBS 洗一次。
3. 胰蛋白酶处理和收集细胞，离心，（注意1）保证每管细胞数在106 个。
4. 用0.3 ml PBS 轻轻的重悬细胞, 然后慢慢加入0.7 ml 预冷的100%乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混匀。在4°C 至少1h。（注意2）
5. 沉淀细胞，完全吸去上清。
6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗细胞2 次。
7. 用100μl 抗体孵育液（0.5% Tween-20/1%BSA/PBS）重悬细胞，加入1ul Ki67 抗体(1μg/106 cells)，室温孵育1 小时。
8. 离心收集细胞，用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。
9. 离心收集细胞，用50μl 抗体孵育液重悬，加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC，室温孵育30 分钟。离心收集细胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。
10. 用含有终浓度为10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS（pH7.4）重悬细胞。
11. 避光使细胞在室温下孵育20min 后，离心收集细胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后，转移至流式检测管中重悬。
12. FACS 检测或者储存于4℃。


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