Annexin V-APC/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒

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北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖Annexin V-APC/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒 细胞凋亡与增殖在内的细胞生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：Annexin V-APC/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒 细胞凋亡与增殖
编号：KFS190
规格：10T|20T|50T|100T
产地：国产|进口
在正常细胞中，磷脂酰丝*酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝*酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝*酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝*酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素APC 标记，以标记了的Annexin V 作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。

7-AAD（7-amino-actinomycin D）是一种核酸染料，它不能通过正常质膜，随着细胞凋亡、细胞死亡过程，质膜对7-AAD 的通透性逐渐增加，结合细胞凋亡中DNA 的有控降解，在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光，通过7-AAD 标记DNA 的强弱，将细胞分为三群：7-AAD 强为死亡细胞，7-AAD 弱是凋亡细胞，7-AAD-为正常活力细胞。7-AAD 同PI 有着相似的荧光特性，但其发射波谱较PI 窄，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI 的最佳替代品，可与Annexin V- APC 联合使用。

本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测（不推荐用于检测组织样本）。

注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-APC/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

更多有关Annexin V-APC/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒 细胞凋亡与增殖的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·APC-Brdu细胞增殖检测试剂盒(ICF/FACS法)
编号：KFS326
英文名称：BrdU cell proliferation Detection Kit
规格：20T
本试剂盒细胞增殖检测是一个基于荧光检测的实验，可以监测细胞健康和通过胸苷掺合来估量DNA 合成从而监测细胞分裂。

*脱氧尿苷(5-*代-2"-脱氧尿苷, BrdU) 是一种合成的核苷酸即胸苷的类似物。BrdU 通常被用于检测活组织中再生的细胞。

BrdU 可以掺合到复制细胞中新的合成DNA 中（在细胞周期S 期），在DNA 复制可代替胸苷。利用抗BrdU 的特异性抗体便可以用于检测这个插入的化学品，从而检测出细胞是否在复制其DNA。

·一氧化*(代"氮")检测试剂盒(荧光探针法)
编号：KFS313
英文名称：BrdU cell proliferation Detection Kit
规格：100T
本荧光探针适合于检测细胞内的一氧化*(代"氮")水平，可以进行实时检测。如果收集细胞后再装载探针，通常至少可以检测100 个样品。

DAF-FM DA 即3-Amino,4-aminomethyl-2’,7’-difluorescein, diacetate ， 也称DAF-FM diacetate 或4- Amino,5- aminomethyl-2’,7’-difluorescein, diacetate。DAF-FM DA 是最新一代用于一氧化*(代"氮")定量检测的荧光探针，比以前比较常用的一氧化*(代"氮")荧光检测探针DAF-2 diacetate 有多方面的改进。首先，DAF-FM DA 和DAF-2 diacetate 相比，最后和一氧化*(代"氮")反应形成的荧光产物受pH 值的影响小，在pH 值大于5.5 时不受pH 值的影响。其次，DAF-FM DA 和DAF-2 diacetate 相比，前者产生的荧光更加稳定，不容易淬灭，这样更加便于检测。另外，DAF-FM DA 和DAF-2 diacetate 相比，前者对一氧化*(代"氮")的检测灵敏度更高，相同条件下检测灵敏度可以提高接近2 倍，最低检测浓度可以达到3nM。

DAF-FM DA 可以穿过细胞膜(cell-permeable)，进入细胞后可以被细胞内的酯酶催化形成不能穿过细胞膜的DAF-FM 。DAF-FM 本身仅有很弱的荧光，但在和一氧化*(代"氮")反应后可以产生强烈荧光，激发波长为495nm，发射波长为515nm。DAF-FM DA 检测一氧化*(代"氮")的机制可以参考上图。任何可以检测fluorescein 的仪器，包括荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计或荧光酶标仪都可以用于该荧光探针的检测。右图为DAF-FM 在不同浓度一氧化*(代"氮")存在时的发射荧光扫描图谱(fluorescence emissionspectra)。DAF-FM DA 的分子量为496.4，分子式为C25H18F2N2O7，HPLC 分析纯度大于98%。本DAF-FM DA 为溶解于DMSO的淡黄色溶液，浓度为5mM。


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·线粒体细胞核转位分析试剂盒(HCS法)
编号：KFS104
规格：100T
小牛胸腺提取的组蛋白H1，以Alexa Fluor488 标记富含赖*酸的组蛋白H1。在体外细胞实验中可以通过搭配相应的蛋白转染步骤，将Alexa Fluor488 标记的组蛋白H1 结合物导入细胞中，从而跟踪研究组蛋白H1 在细胞内的运输与定位。

具有细胞膜渗透性的MitoRed 探针包含一个温和的巯基反应性*甲基基团，可用于标记线粒体，并在固定之后保留在线粒体内。标记线粒体，细胞可以与MitoRed 探针简单孵育，探针通过被动扩散传过质膜，并在有活性的线粒体内富集。

细胞核荧光染料Hoechst 33258 是一种无毒、水溶性双*咪唑类化合物，具有很好的膜透性，可作为荧光探针与DNA 分子结合。

储存：4℃避光，有效期12个月。

·即用型DAPI染色液
编号：KFS257
规格：10ml|50ml
DAPI（4,6-Diamidino-2-phenylindole ，4,6-二*基-2-*基吲哚）是一种DNA 特异性染料，与DNA产生非嵌入式结合，发出蓝色荧光。该染料对细胞膜有半通透性，可透过正常活细胞产生较弱的蓝色荧光（细胞固定后荧光增强），而凋亡细胞的膜通透性增加，对其摄取能力增强，产生很强蓝光染色。

正常细胞的核形态呈圆形，边缘清晰，染色均匀，而凋亡细胞的细胞核边缘不规则，细胞核染色体浓集，着色较重，并伴有细胞核固缩，核小体碎片增加，因此从荧光强度及核形态均可鉴别出细胞发生凋亡的典型特征。

操作方法（本方法针对贴壁细胞，但不仅限于贴壁细胞）
1. 贴壁培养的细胞爬片弃去培养基，10mM PBS，pH7.4，洗一次；
2. 再滴加入100μL 的DAPI 染液，室温避光染色5-15 min；
3. 弃去染色液，PBS 漂洗一次，
4. 滴加甘油或Buffer A，荧光显微镜以340/380nm 紫外光激发，500×（40×12.5）（最好是100×油镜头）观察、拍照。

储存：2-8℃，避光，有效期6个月。


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