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低温运输,-20℃避光保存
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一年
- 英文名:
Cell Viability/Cytotoxicity Detection Kit
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大量
- 供应商:
联迈生物
- 规格:
1000次
Calcein AM是一种可对活细胞进行荧光标记的优良染色试剂,其能够轻易穿透活细胞膜。胞内的酯酶会将其水解为Calcein(钙黄绿素)留在胞内,发出强绿色荧光;而碘化丙啶(PI)不能穿过活细胞的细胞膜,但其能穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(激发:535 nm,发射:617nm),从而对死细胞染色。本产品是基于钙黄素AM和碘化丙啶(PI)的活死细胞染色试剂盒,可用于动物细胞样品的活力和毒性检测。本产品具有下列特点:
1. 即开即用,不需要专门花时间准备各种成分,操作简便、快捷、安全,灵敏度高。
2. Calcein-AM是最理想的活细胞的荧光探针,其细胞毒性很低。Calcein(钙黄绿素)不会抑制任何的细胞功能如增殖或淋巴球的趋化性。其染色结果稳定、可靠。与标准的51Cr-释放法所得结果相一致。Calcein(钙黄绿素)的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。
3. 本产品和流式细胞仪、荧光显微镜、荧光多孔板或其它荧光检测兼容。
4. 本产品适用于绝大多数的哺乳动物细胞样品,不适用于细菌、酵母等细胞。
5. 钙黄素 AM和PI的使用浓度依据不同的细胞而有较大差别,应根据具体细胞调节染料浓度以得到最佳效果。
6. 钙黄素 AM水溶液易水解,建议染色工作液现配现用。
活/死细胞染色试剂盒(Calcein AM·PI)使用及效果
荧光显微镜检测举例:取出溶液A、溶液B,室温平衡30分钟。取5 μL溶液B(16mM PI溶液)加至10 mL的PBS溶液中。取5 μL溶液A(4 mM钙黄素AM)加入到上述10 mL的PI溶液中,涡旋混匀,此溶液为染色工作液(2 μM钙黄素 AM;8 μMPI)。洗涤细胞,尽可能去除培养中的活性酯酶。加入足量上述染色工作液,至少没过单层细胞,室温孵育30-45分钟。一小时内荧光显微镜下观察检测。
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文献和实验成IPTG、X-Gal、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体(或其他带有lacZ、Amp基因载体),然后转化至lacZ缺失细胞中后,涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培养基,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组 体(白色为具有DNA插入片段的基因重组体)。 配制方法: 在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后,用蒸馏水定容至10ml,用0.22μm滤器 过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。 优点: 1.能诱导酶的合成
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