Baker甲醛钙中性固定液

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法

原理： 苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度，如果染料与含有脂类的试样接触，便有大量染料进入脂类物质的结构内，使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色，使脂质呈色。也可用四氧化锇染色，脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。 配制试剂：1. 苏丹红Ⅲ染色液：将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用； 2. 甲醛钙固定液：将10ml甲醛和1g CaCl2 混合加水至100ml； 3. 甘油明胶：将12g明胶

细胞内糖类染色方法—过碘酸席夫反应法

的HCl 10ml； ③ 当溶液冷却至25℃时再加入0.5g偏重亚硫酸钠，在室温下放置24h，其颜色呈褐色或淡黄色； ④ 再将0.5g活性炭加入呈色液中振摇1min后过滤，滤液为无色； ⑤ 将滤液置于棕色瓶内于4℃密封保存，一般可保存数月； 2. 卡诺固定液配制 将30ml氯仿和10ml苯乙酸加入60ml纯乙醇中即得； 3. 甲醛钙固定液配制 甲醛10ml和1g CaCl2 混合加水定容至100ml即得。 染色步骤 1. 用Hanks液将盖玻片

脂类组织化学与酶组织化学

的蛋白质，使脂类保持在原位。钙离子有利于保存磷脂，故常用甲醛钙固定组织。但固定时间不宜太长，一般切片在染色前固定10分钟。组织块在室温下固定4小时或4℃ 24小时即可。如果固定时间过长，可使脂类水解，脂肪酸增加，甲醛也将被氧化而产生甲酸，固定液因此变酸而使脂类溶解。另外，含重铬酸钾和升汞等氧化剂均不宜作为脂类的固定液，以免脂类变性。       显示脂类需采用冰冻切片，但是，已固定组织在冰冻切片时，其脂滴可被切片刀带离原位，移位到其他细胞的表面或者组织间隙内，观察时需要调节显微镜的焦距识别原位