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12个月
A large number of high purity Plasmid Extraction Kit
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒) DNA纯化在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒) DNA纯化
品牌:百奥莱博
编号:ALH089
英文名:A large number of high purity Plasmid Extraction Kit
产地:国产|进口
规格:10次
本试剂盒适用于大规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(10次):
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————75ml
溶液P2—————————————75ml
溶液P3—————————————110ml
去蛋白液PD———————————100ml
漂洗液WB————————————2×25ml
洗脱缓冲液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、方便,从100-200ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80 %左右。
3.获得的质粒产量高、超螺旋比例高、纯度好,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成,使用转速可以达到12000g,带50ml转头的台式离心机。
2. 溶液P3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,提高提取效率。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 质粒DNA确切分子大小,必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱,质粒应该保存-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)|高纯质粒大量制备试剂盒
除高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒) DNA纯化外,我公司正在打折促销以下产品:
·PCR增强剂
编号:ALH282
英文名称:PCR enhancer
规格:1ml
本品能与所有的耐热DNA聚合酶共同作用促进许多DNA模板的有效扩增,增加PCR反应的灵敏度和特异性。在PCR反应中,PCR增强剂主要通过提高DNA聚合酶的热稳定性,降低DNA的二级结构起作用。因此在遇到一些复杂模板时(如GC含量高),可通过提高退火温度,极大地减少DNA二级结构对PCR的影响,同时对酶的活性没有改变。
使用方法:本品在PCR 反应体系的终浓度一般为2%-8%,常用浓度为4%-6%,用户可以根据实际效果调整终浓度。
举例说明:50μl PCR 反应终体积中,加入2μl PCR增强剂,此时PCR增强剂的终浓度是4%。
储存条件:室温。
·细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)
编号:ALH158
英文名称:Cells/Tissue Apoptosis DNA Ladder Extraction Kit
规格:20次|50次
本试剂盒选择性从组织和细胞中分离提取凋亡DNA ladder,通过选择性分离基因组DNA与凋亡DNA ladder,最大限度的减少了基因组DNA对凋亡DNA ladder的观察干扰,因此显著的提高了检测敏感度,反应可在微量离心管进行,2.5小时完成,快速方便;无需有机抽提,检测灵敏度极高,可从约2000个凋亡细胞中检测到DNA ladder。推荐起始细胞量为5~10×10^5 个,但投入的细胞量可在1×10^5~5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1~2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。本试剂盒也可用于从组织中提取凋亡DNA ladder。但与培养细胞相比,整体动物组织凋亡细胞出现的时间、部位、程度等规律性差往往造成难以准确取材,可能显著影响实验结果。但只要组织确实发生凋亡,有经验的用户也可以使用本试剂盒从组织提取凋亡DNA ladder
试剂盒组份(50次):
Extraction buffer ———10ml
10%SDS—————————1ml
Enzyme A————————1ml
Enzyme B————————1ml
Precipitant ——————7ml
为保持活性方便运输,Enzyme B 客户收到时为冻干粉,收到后加500μl 灭菌水(25 次)或者1ml 灭菌水(50次)溶解后-20℃保存。Enzyme A 和Enzyme B 为酶溶液,应该避免反复冻融降低活性,如果要分多次使用,最好按照每次使用量分装后-20℃保存。
注意事项
1. *化乙锭染色过度将降低DNA条带检测灵敏度,可用水冲洗凝胶10~30分钟。如冲洗过头可再用*化乙锭复染。可用更灵敏的DNA染色剂SYBR Green。也可进行丙*(代"烯")酰胺DNA凝胶电泳和DNA银染。
2. 对细胞进行干预处理后,凋亡可能仅在某一时间点或某一干预强度下最为明显。需要进行预试验确定最佳干预时间或强度。此时也可用凋亡小体/hoeschst染色试剂盒(ALH160)快速染色凋亡小体观察。
3. 推荐起始细胞量为5~10×10^5 个,但投入的细胞量可在1×10^5~5×10^6之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1~2×10^4个凋亡细胞。多于2×10^4个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA ladder。六孔板的一个孔相当于一个35 mm培养皿长满后可得到1~10×10^5 个细胞,如果细胞凋亡发生率为10%,经过处理可得到约1~10×10^4个凋亡细胞,应该足以获得清晰的凋亡DNA ladder。反之如果不能从>3×10^6个细胞获得清晰的凋亡DNA ladder,表明其中凋亡细胞少于1%。此时增加细胞用量也难已奏效。
4. 从组织块提取凋亡DNA ladder。取10~20 mg组织块放入小玻璃匀浆器,加100~200μl Extraction buffer,上下手动匀浆15~20次。取出匀浆液,冰上5~10 min。振荡10秒。4500 rpm 10分钟收集上清液并转移到新1.5ml离心管,执行提取步骤3。另外一种方法是将30~50mg组织剪碎后在PBS里面匀浆,制成细胞悬液,离心收集细胞后接步骤2继续执行提取。
5. 采用高质量琼脂糖,使用宽度较小和厚度较窄的样品梳子,制作较薄的琼脂糖凝胶(厚度约2~4 mm);用较低的电压进行慢速电泳,将显著增加凋亡DNA条带检测灵敏度。电泳距离不要太长,否则将使小的凋亡DNA条带弥散而降低分辨率。
高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒) DNA纯化关键词:柱式提取质粒,高纯度质粒大量提取试剂盒,高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒),高纯质粒大量制备试剂盒
6138-23-4 D-海藻糖
64485-93-4 Cefotaxime,Sodium Salt 噻孢霉素
3-吲哚丁酸* Levamisole hydrochloride 60096-23-3
ARB10262 人丁型肝炎IgG(HDV IgG)Elisa定量检测 Human hepatitis d virus igg,hdv igG ELISA KIT
2,2-联喹*(代"啉") 6-CP 119-91-5
BTN90902 细菌总蛋白质微量提取试剂盒 Bacterial Total Protein Miniprep Kit
E0502 抗凝驴血(无菌 袋装) 500ml/1000ml/2000ml
ARB11174 人单核细胞增多性李斯特菌素O(LLO)酶标法分析 Human listeriolysin o,llo ELISA KIT
ARB11888 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)酶免分析 Human glypican-3,gpc-3 ELISA KIT
PY02-119 *化*三糖铁琼脂 250克
F010111 小鼠抗玉米赤霉烯酮抗体 Monoclonal Mouse Anti-Zearalenone
F040302 人IgG抗原 Human IgG
3,5-二羟基甲* L-Phenylglycinol 6153-39-5
高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒) DNA纯化关键词:柱式提取质粒,高纯度质粒大量提取试剂盒,高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒),高纯质粒大量制备试剂盒
·细菌基因组DNA提取试剂盒
编号:ALH136
英文名称:Bacterial genomic DNA Extraction Kit
规格:50次|100次|200次
本试剂盒用于快速的从各种细菌中提取基因组DNA。细菌样品加入细胞核裂解液(或者通过溶菌酶或者其它一些酶帮助裂解细胞壁后),首先在强去污剂作用下裂解细胞释放出基因组DNA,接着加入RNase A去除RNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。
试剂盒组份(100次):
细胞核裂解液———————60ml
蛋白沉淀液————————20ml
DNA溶解液————————15ml
RNaseA(10mg/ml)—————250μl
产品特点:
1.不需要使用有毒的*酚等试剂。
2.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.结果稳定,产量高,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达50 kb -150kb,可直接用于构建文库,PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 用户需自备异丙醇、70%乙醇、0.5M EDTA和Lysozyme(溶菌酶)(用于革兰氏阳性菌)、lysostaphin(用于某些难裂解的革兰氏阳性菌)、水浴箱。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4. 本试剂盒为溶液型,可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的细菌细胞量,请联系我们索取其它处理量的操作手册。
储存条件:室温,有效期12个月。
·病毒基因组快速提取试剂盒
编号:ALH048
英文名称:Nucleic acid rapid extraction from virus
规格:50次
本试剂盒采用特异性结合病毒DNA/RNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,病毒DNA/RNA提取试剂盒适合于从无细胞体液,包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA/RNA。该产品可以满足绝大多数的病毒RNA/DNA的同时提取要求, 如病毒RNA:HCV(丙肝病毒),HIV(艾滋病毒),和HTLV(人类嗜T淋巴细胞病毒); 病毒DNA:HBV(乙肝病毒)和CMV(巨细胞病毒)等等。病毒裂解后,DNA/RNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA/RNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂,可直接适用于PCR/RT-PCR分析。
试剂盒组分:
裂解液VLB————————20 ml
去蛋白液RE———————25 ml
漂洗液RW————————10 ml
RNase-free H2O—————10 ml
吸附柱和收集管————50套
产品特点:
1.不需要使用有毒的*酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.节省时间,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。
3.多次柱漂洗确保高纯度,提取的病毒DNA/RNA 纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种常规操作,包括PCR/RT-PCR、酶切、测序、Southern 杂交等。
操作步骤:
提示:第一次使用前请先在10ml 漂洗液RW 中加入40ml 无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
1. 200μl 血清等体液(需回复到室温,不足可用0.9% NaCl 或者PBS 补足)转入上述1.5ml 离心管,加入400μl 裂解液VLB, 立刻涡旋振荡充分混匀。
2. 室温(15-25℃)放置10 分钟,每隔5 分钟,振荡混匀一次。
3. 加入450μl 无水乙醇,立刻涡旋振荡充分混匀。如果周围环境高于25℃,乙醇需要冰上预冷后再加入。
4. 将上述混合物加入一个吸附柱 中,(吸附柱放入收集管中)13,000rpm 离心30-60 秒,倒掉收集管中的废液。如果总体积超过750μl,可分两次将溶液加入同一个吸附柱中。
5. 加500μl 去蛋白液RE,12,000rpm 离心30 秒,弃废液。
6. 加入500μl 漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000rpm 离心30 秒,弃废液,加入500μl 漂洗液RW,重复一遍。
7. 将吸附柱 放回空收集管中,13,000rpm 离心2 分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
储存条件:室温,有效期12个月。
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