尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)价格的品牌：百奥莱博，是优质的核酸扩增(PCR)产品，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。

名称：尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)价格
规格：200U|1000U
编号：WE0115
英文名：Uracil-N-Glycosylase(UNG)
品牌：百奥莱博
  尿嘧啶-N-糖基化酶(UNG酶)也称为尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)，通过大肠杆菌表达纯化的重组酶，该蛋白分子量为25kD，可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶，并且对RNA无活性，主要应用于防止PCR扩增产物的污染。该酶作用机理为：在PCR反应中以dUTP代替dTTP，扩增产物片段中的T全部被U取代，形成了含dU碱基的PCR扩增产物。UNG酶能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键，降解反应体系中含U的DNA，有效消除PCR产物的残留污染，大大降低扩增产物污染导致的假阳性，从而保证扩增的特异性和准确性。

活性定义：37℃，60分钟内催化1 nmol尿嘧啶，从含尿嘧啶的DNA上释放所需要的酶量定义为一个单位。

质量控制：SDS-PAGE检测纯度大于95%；经检测无核酸内、外切酶活性。

注意事项：
1、UNG长期储存(非频繁使用; 每月少于3次)请置于-70℃保存，每天或每周使用请于-20℃保存。尽量避免反复冻融，大包装建议分装使用。
2、UNG可以在PCR反应前先清除不慎污染的U-DNA分子，一个实验室必须在所有的PCR反应中使用dUTP作为dNTP之一，使所有扩增产物都成为U-DNA。如单使用于某个检测，T-DNA仍会积累，此抗污染系统也难以起到完全的作用。
3、UNG/dUTP系统是PCR试剂内部的一种防污染措施，为了防止PCR产物的污染，尤其是在临检实验室中反复放大同一片段时，必须严格规范实验室的划分和操作。

使用方法：
以下举例为Taq反应体系防止PCR产物污染的使用方法，实际应用可应根据具体实验进行改进和优化。

1、PCR反应体系

 

试剂	50μl反应体系	终浓度
Taq PCR Buffer，10×	5μl	1×
dATP，10 mM	1μl	200μM
dGTP，10 mM	1μl	200μM
dCTP，10 mM	1μl	200μM
dTTP，10 mM	0.5μl	100μM
dUTP，10 mM	1μl	200μM
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	Xμl
Taq DNA Polymerase，5 U/μl	0.5μl	2.5 U/50μl
Uracil-N-Glycosylase，1 U/μl	0.2μl	0.2 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

2、反应条件

步骤	温度	时间	循环数
UNG消化	37℃-50℃	5-10 min
预变性	95℃	10 min
变性	94℃	30 s	30-40个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	1 kb/min
终延伸	72℃	5 min

注意：通常将Taq酶与UNG酶按一定的比例加入PCR反应体系中，先于37℃-50℃范围内消化5-10分钟，然后95℃ 10分钟灭活，(同时这一步也达到预变性和热启动的效果)，随后进行PCR扩增。UNG酶的反应可以在37℃-50℃，5-10分钟的范围内变化，可以根据实验的需要进行调整。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

我公司的尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)价格，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
BTN60701 土壤DNAOUT Soil DNAOUT
ARB10671 人血管紧张素Ⅱ受体IA型(AgtrIA)ELISA检测服务 Human angiotensin Ⅱ receptor type ia,agtria ELISA KIT
N-乙酰-L-谷*酸 5-Hydroxymethylfurfural 1188-37-0
L-甘-甘-甘三肽 HSPYU 556-33-2
9000-91-3 β-Amylase β-淀粉酶
BTN81202 真菌总蛋白质微量提取试剂盒 Fungal Total Protein Miniprep Kit
BL1177 DAB显色试剂盒(20×)
28053-08-9 尿苷5-二磷酸葡萄糖二* UDPG
ARB12397 大鼠性激素结合球蛋白(SHBG)尿液中含量检测 Rat sex hormone-binding globulin,shbg ELISA KIT
ARB11796 人碱性胎儿蛋白(BFP)Elisa分析 Human basic fetoprotein,bfp ELISA KIT
ARB10707 人多功能蛋白聚糖(VS)ELISA检测服务 Human versican/pg-m/pg-350,vs ELISA KIT
ARB12677 大鼠颗粒酶B(Gzms-B)检测服务 Rat granzymes b,gzms-b ELISA KIT
BTN80911 蛋白酶K溶液 Proteinase K Solution
1-乙基-3-(3-二甲*丙基)碳二亚胺盐*(代"酸")盐 D-Arginine 25952-53-8
SJ0793 褪黑素
尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)价格关键词：WE0115,Uracil-N-Glycosylase(UNG),尿嘧啶DNA糖基化酶,尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)

F020232 兔抗驴IgG抗体 Rabbit Anti-Donkey IgG
日落黄 Dextran sulfate sodiu*(代"m") salt 2783-94-0
ARB12113 大鼠可溶性Toll样受体6(sTLR6)elisa检测 Rat soluble toll-like receptor 6,stlr-6 ELISA KIT
PY04-062  两性霉素B及头孢霉素混合液  1ml/支×10支  每支添加于100mlCamp-BAP琼脂培养基基础中，用于弯曲杆菌选择性分离培养
BTN120401 热启动Taq DNA聚合酶 Hot Start Taq DNA Polymerase
ARB10502 人白细胞介素11(IL-11)尿液中含量检测 Human interleukin 11,IL-11ELISA KIT
ARB11301 人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)Elisa分析 Human noradrenaline bitartas,ne-b ELISA KIT
BL0784 PCR纯化试剂盒
D-泛酸* Reinecke salt 867-81-2
BTN131179 核酸稀释液,测OD专用 Diluent for NA OD Detection 核酸稀释液,测OD
SJ0289 FAD Na2  核黄素腺嘌呤二核苷酸二*盐
ARB10371 人去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)酶联免疫定量检测 Human asialoglyco protein receptor,asgpr ELISA KIT
BTN130859 M13mp18 DNA M13mp18 DNA
F020102 兔抗牛血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-BSA
BL1089 无支原体超级新生牛血清
C1101 大牛血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
001000 胎牛血清
2,4-二硝基*(代"*")甲*(代"酸") L-Lysine 610-30-0
尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)价格关键词：WE0115,Uracil-N-Glycosylase(UNG),尿嘧啶DNA糖基化酶,尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)


·Pfu DNA Polymerase
编号：WE0107
英文名称：Pfu DNA Polymerase
规格：500U
  Pfu DNA Polymerase是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶，具有5"-3"DNA聚合酶活性和5"-3"外切核酸酶活性的同时具有3"-5"外切核酸酶活性，因此在DNA扩增过程中具有纠错能力，是目前发现的错配率最低的耐高温DNA Polymerase。该酶与Taq DNA Polymerase相比具有更好的热稳定性，对于高GC含量模板，提高变性温度对它活性无影响。使用本产品扩增得到的PCR产物的3"端不带有“A”碱基，不能直接用于T/A克隆，如需进行T/A克隆则需要在其末端添加“A”或用平末端载体进行克隆。本产品适用于基因克隆、基因定点突变、SNP和末端补平等实验。

产品组成：

组份	500U
Pfu DNA Polymerase, 5 U/μl	100μl
10×PCR Buffer	1.8ml

注意：本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。

活性定义：
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制：
1、经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
2、经检测无外源核酸酶活性；
3、PCR方法检测无宿主残余DNA；
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；
5、室温存放一个月，无明显活性改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
10×PCR Buffer	5μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
Pfu DNA Polymerase, 5 U/μl	0.5μl	2.5 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)用Pfu酶扩增时，引物的纯度要求较高，引物长度大于18个碱基，引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2)Pfu酶3"-5"外切酶活性可能降解引物，所以应先加dNTP后，再加Pfu酶到反应体系中，并立即进行PCR反应。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	25-35 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)Pfu酶的热稳定性比Taq酶好，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，对Pfu酶的活性无影响。
2)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
3)Pfu酶具有3"-5"外切酶活性，所以Pfu酶扩增时延伸速度远比Taq酶低，延伸时间根据所扩增片段大小设定，本产品的扩增延伸速率为1 kb/min。
4)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
5)本产品具有3"-5"外切核酸酶活性，PCR产物3’端不带“A”,不能直接用于T/A克隆，如需进行T/A克隆则需要在其末端添加“A”或用平末端载体进行克隆。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

我公司正在打折促销核酸扩增(PCR)全系列产品，恭候您的咨询选购尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)价格。