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Bradford蛋白定量试剂盒
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北京百奥莱博科技有限公司
60次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
Bradford蛋白定量试剂盒 蛋白质研究是高品质的蛋白质研究,由北京百奥莱博供应,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Bradford蛋白定量试剂盒等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:Bradford蛋白定量试剂盒 蛋白质研究品牌:百奥莱博规格:60次产地:国产|进口编号:RFT058● 试剂盒内容及保存:产品名称 包装 贮存方式考马斯亮蓝G-250染色液 200 ml 4℃牛血清白蛋白(BSA)标准溶液(5 mg/ml) 2×1 ml -20℃PBS溶液 10 ml 4℃说明书 1份● 储存条件和效期:考马斯亮蓝G-250染色液4℃避光保存;牛血清白蛋白标准溶液-20℃贮存。PBS溶液4℃贮存。本试剂盒有效期1年。● 产品简介:Bradford蛋白质浓度测定试剂盒是根据考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)法研制而成,其原理是考马斯亮蓝G-250在酸性条件下和蛋白质结合,使得染料最大吸收峰从465nm变为595nm,在一定的线性范围内,反应液595nm处吸光度的变化量与反应蛋白量成正比,测定595nm处吸光度的增加即可进行蛋白定量。每个试剂盒可以检测1000个样品(使用微孔板)或60个样品(使用试管)● 产品特点:1. 检测速度极快,10个样品只需不足10分钟即可完成。2. 灵敏度高,检测浓度下限可达25μg/ml (测定浓度范围在50-1000μg/ml内有较好的线性关系),最小检测蛋白量可达0.5μg,待测样品体积为1-20μl。3. Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达1M,DTT的浓度可高达5mM。然而,此方法测定蛋白浓度受高浓度的去垢剂影响,故不能适用膜蛋白样品的浓度测定。需确保测定样品中SDS浓度低于0.01%,Triton X-100浓度低于0.05%,Tween 20, 60, 80浓度低于0.015%。测定含去垢剂的样品推荐使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(RTP7102)。● 操作方法微孔板测定程序:(工作范围25-1000 μg/ml)1. G-250染液在使用前应平衡温度至室温并温和颠倒混匀;2. 1mg/ml蛋白标准品配制:室温完全溶解蛋白标准品,取20μl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液,加入80μl PBS溶液,使其终浓度为1 mg/ml。3. 按照下表配制BSA标准测定溶液:编号 0 1 2 3 4 5 6 7 81 mg/ml BSA标准溶液 μl 5 mg/ml BSA标准溶液 μlBSA标准溶液 μl 0 0.5 2.5 5 10 15 20 6 8PBS 溶液 μl 20 19.5 17.5 15 10 5 0 14 12BSA终浓度 μg/ml 0 25 125 250 500 750 1000 1500 2000总体积 μl 20 μl4. 将适当体积的待测样品加入到微孔板中,并用PBS补足到20 μl;5. 向微孔板中加入200 μl G-250染色液,混匀,室温放置3-5分钟;6. 测定595 nm 处的吸光值,并记录读数;以不含BSA 的样品的光吸收值作为空白对照。7. 以A595为纵坐标,BSA含量为横坐标,绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内,请稀释样品后重新测定。试管测定程序:(工作范围25-1000 μg/ml)1. G-250染液在使用前应平衡温度至室温并温和颠倒混匀;2. 1mg/ml蛋白标准品配制:室温完全溶解蛋白标准品,取120μl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液,加入480μl PBS溶液,使其终浓度为1.0 mg/ml。3. 按照下表配制BSA标准测定溶液:编号 0 1 2 3 4 5 6 7 81 mg/ml BSA标准溶液 μl 5 mg/ml BSA标准溶液 μlBSA标准溶液 μl 0 5 25 50 100 150 200 60 80PBS 溶液 μl 200 195 175 150 100 50 0 140 120BSA终浓度 μg/ml 0 25 125 250 500 750 1000 1500 2000总体积 μl 200 μl4. 将适当体积的待测样品加入到试管中,并用PBS补足到200 μl;5. 向试管中加入3ml G-250染色液,混匀,室温放置3-5分钟;6. 测定595 nm 处的吸光值,并记录读数;以不含BSA 的样品的光吸收值作为空白对照。7. 以A595为纵坐标,BSA含量为横坐标,绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内,请稀释样品后重新测定。欲了解更多Bradford蛋白定量试剂盒 蛋白质研究的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:·RealECL发光液编号:RFT083规格:100ml|500ml● 产品简介:RealECL 是一种超敏ECL化学发光试剂盒,可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶(HRP)发生化学反应,发出荧光,从而可以通过用X光片压片或其它适当荧光成像设备检测样品。RealECL具有极高灵敏度和高信噪比,可检测出10-100 fg的微量抗原;发光迅速,荧光可使X感光胶片感光达12小时以上,特别适用于痕量蛋白检测;另外高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量,降低实验成本。● 贮存: 2-8℃贮存,有效期一年。● 注意事项:1 RealECL A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头,A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效,影响后续的使用效果。2 各溶液使用后,请盖紧瓶盖,以防失效。3 为获得最佳实验结果,请务必优化实验条件,包括检测样品的用量、一抗、二抗稀释度、杂交膜及封闭试剂的选择。4 由于叠氮钠是HRP抑制剂,在缓冲液中应避免使用叠氮钠作为防腐剂;如果二抗中含有叠氮钠,发光实验前要进行5次TBST或PBST漂洗,每次10分钟。5 在与膜发生接触过程中,请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材,避免蛋白污染产生高背景。● 使用说明:1 RealECL工作液的配制:等体积混合适量RealECL A液和B液,室温放置备用。工作液宜在临检测前配制。2 Western二抗孵育后,并进行数次洗涤后,用平头镊子将膜取出,用滤纸略吸去过多的液体(切勿接触膜的蛋白面),但不要使膜过度干燥,然后将膜平铺于一洁净保鲜膜上,避免产生气泡。注:某些市售保鲜膜包裹印迹膜时会淬灭荧光,请选择ECL专用保鲜膜获得更好的实验效果。3 根据膜的大小,按每平方厘米膜加0.125 ml RealECL工作液的比例,滴加RealECL工作液到膜上,确保使工作液均匀覆盖在膜上,常温放置1-2分钟。注:为达节约目的可将膜减小但勿降低发光液用量,确保发光液完全覆盖于膜上。4将保鲜膜折起来完全包裹杂交膜,去除气泡和皱褶,可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖杂交膜的保鲜膜固定在暗盒内。5在黑暗中放入X感光胶片,分别曝光不同的时间如数秒到数分钟,显影定影观察冲洗结果。如掌握不好曝光时间,可以在膜上放置3-4张X感光胶片,统一曝光3-5分钟,显影后选择一张曝光最好的胶片。Bradford蛋白定量试剂盒 蛋白质研究关键词:RFT058,Bradford蛋白定量试剂盒,百奥莱博001001 新生牛血清 100ml|500ml对甲苯胺兰 1,3-Dimethylurea 6578-06-9 ARB10024 人5羟色胺(5-HT)elisa测定使用说明书 Human 5-hydroxytryptamine,5ht ELISA KITBL0629 羧基-琼脂糖凝胶4B ECH Sepharose 4BF040321 猫IgG抗原 The cat IgGD-葡萄糖-1-磷酸二钠 Bleomycin sulfate 150399-99-8、56401-20-8BTN130695 m7G(5′)ppp(5′)A帽结构类似物 RNA Cap Structure Analogs环孢菌素A L-Cystine HCL 59865-13-3茜素紫3B FDA 4430-18-6ARB10752 人抑制素B(INHB)代做ELISA实验 PY02-147 甘氨酸培养基 250克 BL1240 溶菌酶(100mg/ml)ARB12156 大鼠白介素1可溶性受体I(IL-1sRI)ELISA检测服务 Rat soluble interleukin-1 receptor i,IL-1sri ELISA KITARB13195 小鼠脂肪型脂肪酸结合蛋白4(FABP4)elisa测定使用说明书 凝胶多糖 Hexokinase from Saccharomyces cerevisiae 54724-00-4BTN100201 海量PCR片段纯化试剂盒 Mega PCR Clean-Up KitDAB法显色试剂盒"HC0047 1.8ml冻存管内旋Bradford蛋白定量试剂盒 蛋白质研究关键词:RFT058,Bradford蛋白定量试剂盒,百奥莱博·DH5α化学感受态细胞编号:RFT112规格:20×100ul● 储存条件:-70℃冻存六个月● 产品简介:本公司生产的DH5α感受态细胞采用经特殊工艺处理得到,可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测,转化效率可达108cfu/μg,-70℃保存几个月转化效率不发生改变。● DH5α菌株介绍:基因型:supE44△lacU169(j80 lacZ△M15)hsdR17 recA1 end A1 gyrA96 thi-1 relA1特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重组缺陷的抑制型菌株。其j80 lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的 b-半乳糖苷酶氨基端实现a互补,可用于蓝白斑筛选。● 操作方法:(以下操作均按无菌条件的标准进行)1取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中,置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100 μl感受态细胞为例。2 向感受态细胞悬液中加入目的DNA(100 μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30分钟。3 将离心管置于42℃水浴中放置45-90秒,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2-3分钟,该过程不要摇动离心管。4 向每个离心管中加入500 μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素), 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟),目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。5将离心管内容物混匀,吸取100 μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收,倒置平板,37℃培养12-16小时。注:涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多,可取更少量转化产物涂布平板;反之,如转化的DNA总量较少,可取200-300 μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少,可通过离心(4,000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)注意事项:1. 感受态细胞应保存在-70℃,不可多次冻融和放置时间过长,以避免感受态细胞的转化效率。2. 进行转化操作时,应根据相应温度及无菌条件的要求进行。3. 为防止转化实验不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,将损失降到最低。
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